导读:本文包含了噬菌体抗体库论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:噬菌体,抗体,技术,尘肺,病毒,全人,内皮。
噬菌体抗体库论文文献综述
詹明硕,刘方杰,张亚兰[1]（2019）在《噬菌体抗体库技术筛选抗VEGF165单克隆抗体》一文中研究指出目的:获得抗血管内皮生长因子165(VEGF165)单克隆抗体,并对其功能进行初步验证。方法:利用噬菌体抗体库展示技术筛选与VEGF165结合的噬菌体克隆并测序,以测序正确的阳性克隆质粒为模板,PCR扩增抗体的轻重链可变区基因,并克隆至哺乳动物细胞表达载体中,构建全抗体表达载体;将全抗体表达载体转染293E细胞,收取培养细胞上清,利用Protein A亲和纯化抗体;通过结合ELISA、表面等离子共振检测抗体的亲和力,以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为模型验证抗体功能。结果:经过噬菌体抗体库展示技术筛出1个与VEGF165特异性结合的抗体序列VG2;293E细胞表达了VG2全抗体蛋白,SDS-PAGE显示VG2抗体纯度较高;BIAcore检测结果表明该抗体具有较高亲和力(KD=0.56 nmol/L),竞争抑制ELISA结果表明VG2抗体能抑制VEGF与VEGF受体(VEGFR)的结合(IC50为1.470μg/mL),进一步实验结果表明VG2能够抑制VEGF引起的HUVEC增殖。结论:制备了靶向VEGF165的全人源单克隆抗体VG2,该抗体具有较高的亲和力,能阻断VEGF165/VEGFR2的结合,并抑制HUVEC的增殖,可以作为潜在药物应用于肿瘤治疗。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2019年03期）
康茜,任志军,唐欣浩,王雪伟,陈颖彬[2]（2018）在《天然鼠源噬菌体抗体库的构建及抗鸡堆型艾美耳球虫裂殖子单链抗体的筛选（英文）》一文中研究指出从未经主动免疫的BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR扩增鼠抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,将轻链和重链可变区基因经重迭延伸拼接PCR反应,构建成单链抗体(ScFv)基因。将ScFv基因克隆到噬菌体载体PCANTAB-5E,转化入大肠杆菌TG1中,筛选出阳性克隆,接种于LB培养基,经辅助噬菌体M13KO7拯救,构建天然鼠源噬菌体抗体库,并进行抗体库滴度测定,通过DNA finger printing技术及单链抗体基因序列分析鉴定抗体库的多样性。以堆型艾美耳球虫裂殖子为靶抗原,对构建的噬菌体抗体库进行亲和筛选,将强阳性重组噬菌体克隆感染大肠杆菌HB2151,经IPTG诱导表达可溶性ScFv抗体,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot鉴定,用ELISA法鉴定其对堆型艾美耳球虫裂殖子抗原的结合活性。结果表明,天然鼠源噬菌体抗体库成功构建,库容量约为2.50×10~(11) CFU/mol,单链抗体库具有一定的多样性。经过4轮亲和筛选,携带抗鸡堆型艾美耳球虫裂殖子表面抗原的特异性噬菌体抗体得到了富集。特异性ScFv抗体在E.coli中分泌表达,表达产物具有免疫活性。筛选出5个与鸡堆型艾美耳球虫裂殖子抗原结合活性较高的克隆,构建的单链噬菌体抗体库的有效表位具有多样性。本研究为进一步认识鸡球虫的各个发育阶段奠定理论基础,为鸡球虫病免疫控制研究提供参考。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2018年11期）
辛英豪[3]（2018）在《猪源噬菌体抗体库的构建与抗PRRSV抗体的筛选》一文中研究指出中和抗体能够与病毒表面的抗原结合,从而阻止病毒吸附靶细胞受体,防止病毒侵入细胞,在抗病毒感染中发挥重要作用。因此,中和抗体是一种具有很好应用前景的抗病毒治疗制剂。但是,采用小鼠单克隆抗体技术制备的抗病毒中和抗体对于人或畜禽等动物存在异源性等特性,导致其临床应用受到限制。近年来,随着抗体制备技术的发展,制备人源或动物源的中和抗体成为研究热点。目前,针对人类免疫缺陷病毒、流感病毒、埃博拉病毒、登革热病毒等多种病毒的全人源中和抗体开发取得了显着进展,而且还发现人体内可能存在具有抗病毒中和作用的天然中和抗体。相对于人源中和抗体研究,猪等动物源中和抗体的开发尚处于起步阶段。猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS Virus,PRRSV)引起的妊娠母猪繁殖障碍、仔猪严重呼吸系统症状和生长迟缓等临床表现的病毒性传染病。PRRSV感染或免疫能诱发很强的体液免疫反应,一般于感染后7~9 d可检测到特异性抗体,但这些抗体对体内、外的病毒都没有中和能力甚至会增强感染,而有效的中和抗体一般出现于28 d以后。由于中和抗体产生的时间晚、水平低,使该病的防治十分困难。为深入研究猪对PRRSV的抗体反应,本研究利用噬菌体展示技术构建了猪源抗体库,并从中筛选到具有中和能力的抗体。进一步研究发现筛选到的中和抗体为多反应性抗体,主要结合细胞蛋白KRT8(Keratin 8)和MYH9(Nonmuscle myosin heavy chain II-A)。具体研究内容如下:1.猪源天然抗体库的构建与抗PRRSV抗体的筛选分离PRRSV抗原、抗体阴性猪的PBMCs(Peripheral Blood Mononuclear Cells),提取mRNA,利用RT-PCR技术扩增得到抗体重链可变区(VH)、轻链可变区(VL)基因,通过overlap PCR将VH、VL用一条柔性多肽基因组装成scFv(single-chain antibody)片段。噬粒pComb3XSS与scFv片段经Sfi I酶切、回收、连接、电转化感受态细胞,获得库容为1.5×10~8的初级库,经鉴定插入片段大小的正确率为80%。通过测序发现VH序列的相似度介于63.3%~92.5%,未发现相同序列,说明抗体库的多样性好。与IMGT数据库比对发现天然库VH基因家族的分布符合文献报道的最多的3个基因家族占比>40%,最多的6个基因家族占比>70%的规律,而且天然库的VH基因分布于13个不同的基因家族,进一步证实构建的天然库具有很好的多样性。加入辅助噬菌体超感染获得重组噬菌体抗体库,用纯化的PRRSV病毒粒子进行筛选,获得4株噬菌体抗体N-28、N-36、N-48、N-67。将获得的抗体基因连接至pET-22b表达载体,经鉴定重组蛋白主要以包涵体的形式表达。对包涵体进行变性、复性后,测定了4株抗体中和PRRSV的能力,发现其中N-28、N-67具有一定的中和PRRSV的能力。2.猪源PRRSV免疫抗体库的构建与抗PRRSV抗体的筛选为筛选具有广谱抗PRRSV的中和抗体,首先用PRRSV商品化弱毒活疫苗免疫30日龄仔猪,然后用高致病性PRRSV毒株(WUH3株)、两种美国流行毒株(VR2385、VR2549)、国内分离的流行毒株(NADC30L)对仔猪进行感染。经过8次免疫/感染后,实验猪体内产生了针对PRRSV WUH3株、VR2385株、VR2549株和NADC30L株的高滴度中和抗体,中和效价介于1∶63.5~1∶858.7之间。分离高免疫猪的PBMCs,扩增抗体基因,经过多次电转获得库容为2×10~7的初级库,经鉴定插入片段大小的正确率为89.4%。通过测序发现VH序列的相似度介于70.3%~93.5%,未发现相同序列,说明免疫抗体库的多样性好;VH基因家族则由天然库的13个下降为6个,说明经过多次免疫/感染后试验猪的抗体基因使用率发生了明显的变化。用纯化的PRRSV病毒粒子对构建的抗体库进行富集、筛选,最终获得3株噬菌体抗体I-2154、I-1320、I-141。将抗体基因连接至原核表达载体pET-22b中,表达纯化后测定了3株抗体对PRRSV WUH3株、VR2549株、NADC30L株的中和能力,结果表明3株抗体对3株病毒均有一定的中和作用,其中I-141的中和效果最好。3株病毒对抗体的敏感度也不相同,其中NADC30L对I-141最为敏感。进一步分析了I-141对NADC30L的抑制机制,发现I-141并不影响病毒的吸附而是抑制了病毒的侵入。3.scFv结合蛋白的质谱鉴定与功能研究首先用生物素标记的N-28、I-141分别与感染或不感染PRRSV的MARC-145细胞裂解液孵育,用链霉亲和素偶联的磁珠分离与scFv结合的蛋白,然后对分离的蛋白进行了质谱鉴定。根据质谱结果检索PRRSV WUH3编码蛋白,在2个接毒组中均未能鉴定到病毒蛋白;对4个实验组鉴定到的蛋白分析发现有30种蛋白在4个实验组均能被鉴定到,提示N-28、I-141可能为多反应性抗体。为了确认这两株scFv的多反应性,选择了KRT8、MYH9这两种已知在病毒感染细胞过程中发挥重要作用的蛋白作为研究对象,通过免疫共沉淀实验发现N-28、I-141能与KRT8、MYH9发生互作,确认了这两种scFv的多反应性。然后在PK-15~(CD163)细胞中干扰或超表达这两种蛋白,证实这两种蛋白参与了PRRSV的感染,并且在PRRSV侵入细胞过程中这两种蛋白的表达量上调。(本文来源于《华中农业大学》期刊2018-06-01）
蒋红欣[4]（2017）在《噬菌体抗体库技术在抗体研发中的运用》一文中研究指出噬菌体抗体库技术是一种以噬菌体为载体,将外源抗体库基因插入到噬菌体衣壳蛋白基因中,并组装出具有扩增能力且在噬菌体表面无缺损表达抗体的融合噬菌体的技术。噬菌体抗体库技术已广泛运用于单克隆抗体的研发,它相对于传统的筛选技术,在时间周期,抗体类型,筛选范围,经济成本等有较为突出的优势。本文主要介绍噬菌体抗体库技术的原理、类型、运用以及最新研究进展。(本文来源于《科学技术创新》期刊2017年33期）
蔡尽忠[5]（2017）在《噬菌体抗体库技术概述》一文中研究指出噬菌体抗体库是近年发展起来的一项分子生物学新技术。构建容量大、特异性高和敏感性强的人源性抗体是此项技术的核心。本文就噬菌体抗体库的技术原理、构建过程及应用作一综述。(本文来源于《生物学教学》期刊2017年05期）
乔媛媛,霍雨佳,周丽君,王欲晓,张达矜[6]（2017）在《用不同方法从大容量噬菌体抗体库中筛选抗完整食管癌细胞的单链抗体》一文中研究指出目的:初步探索从天然的单链大容量噬菌体抗体库中筛选肿瘤细胞抗体的技术策略。方法:通过两种方法,即2%多聚甲醛固定细胞筛选法(PF)及活细胞直接筛选法(NF),经过4轮"吸附-洗脱-扩增"的淘筛过程,对食管癌KYSE-170细胞进行筛选,得到抗食管癌细胞的噬菌体抗体,完善了噬菌体抗体库筛选完整细胞的特异性抗体的技术策略。并且进一步制备了其可溶性抗体。结果:活细胞NF组的筛选阳性率高于2%多聚甲醛固定PF组,筛选特异性抗体的阳性率分别为25.00%和12.50%,两组的差异具有统计学意义。结论:利用单链大容量抗体库可以采用不同的筛选方法成功制备与肿瘤细胞结合的噬菌体抗体,为今后的研究和应用奠定基础。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2017年10期）
徐重新,张霄,张存政,刘媛,仲建锋[7]（2017）在《鼠源噬菌体抗体展示库的构建及初步应用》一文中研究指出构建可用于特异性单链抗体(ScFv)筛选和应用的大容量鼠源噬菌体抗体展示库,获得拥有自主知识产权的抗体库材料。从小鼠脾脏细胞中提取总RNA,反转录成c DNA后,分别扩增抗体的重链基因、轻链基因,并设计2条互补的Linker基因。采用重迭延伸PCR(SOE-PCR)法将重链-Linker和Linker-轻链拼接为完整的ScFv基因,酶切、酶连后,将ScFv基因克隆到pCANTAB-5E噬菌粒载体上,经电穿孔导入E.coli TG1感受态细胞中,过夜培养获得初级噬菌体展示库。以单克隆菌落数计算库容量大小,通过比对随机挑取的单克隆噬菌体ScFv可变区序列的差异,分析库的多样性。以Bt毒素(Cry1B、Cry1C、Cry1F)为包被抗原,从库中筛选具有结合活性的ScFv验证库的实用性。经检测,提取的总RNA条带清晰,浓度为2.76μg/μl,扩增的抗体重链基因、轻链基因条带清晰,且2条互补的Linker基因成功添加到重链基因和轻链基因上。经SOE-PCR法扩增,重链-Linker与Linker-轻链成功拼接为ScFv基因。电转化后,经PCR(Polymerase chain reaction)扩增和凝胶电泳检测,证实ScFv基因克隆成功,测得初级噬菌体抗体展示库的库容为3.67×10~8。随机挑取12个单克隆菌种进行测序和比对,证实ScFv基因为鼠源抗体基因,且12个单克隆菌种的ScFv基因可变区均有一定差异,说明ScFv基因具有多样性。以3种Bt毒素(Cry1B、Cry1C、Cry1F)为抗原,经4轮特异性富集筛选后均获得了具有抗原结合活性的噬菌体ScFv菌种,表明该库的实用性较强。(本文来源于《江苏农业学报》期刊2017年01期）
刘冬兰[8]（2017）在《人源特异性抗3型、7型腺病毒Fab噬菌体抗体库的构建及筛选》一文中研究指出【目的】构建人源特异性抗3型、7型腺病毒Fab噬菌体抗体库,筛选人源抗3型、7型腺病毒中和活性抗体。【方法】从含有抗3型和7型腺病毒高中和效价(﹥1:1000)抗体的志愿者全血中分离外周血单个核细胞(PBMC),提取总RNA后经逆转录PCR(RT-PCR)制备c DNA,然后以cDNA为模板分别扩增抗体轻链、重链可变区序列,再以pComb3噬菌体质粒为模板分别扩增轻链恒定区(Cκ/λ)和重链恒定区(CH1),将轻链可变区和轻链恒定区进行重迭延伸PCR(SOE-PCR),重链可变区和重链恒定区进行SOE-PCR,分别形成κ/λ轻链和Fd重链,再以κ/λ轻链和Fd重链为模板进行SOE-PCR,最终形成完整的Fab基因,Fab基因连接至p Comb3噬菌体质粒中,电转化大肠杆菌XL1-Blue,以辅助噬菌体M13KO7进行超感染,构建人源特异性抗3型、7型腺病毒Fab噬菌体抗体库。以纯化的3型、7型腺病毒完整病毒颗粒作为抗原进行亲和筛选,经过4轮筛选,富集特异性结合抗3型、7型腺病毒噬菌体抗体。化学发光酶免分析法(CLEIA)鉴定每一轮筛选后的总噬菌体以及第四轮筛选后的噬菌体单克隆,同时对获得的阳性克隆进行型别(Adv14、Adv55)特异性检测。获得的阳性单克隆进行DNA测序,然后将抗体序列IMGT/V-QUEST数据库中进行抗体序列分析,确定其CDR区和重轻链型别。从阳性克隆中提取质粒Pcomb3-Fab作为模板,分别扩增特异性轻链、重链可变区基因,并利用同源重组方法分别将轻、重链可变区基因克隆至真核表达载体Igk和IgH。共转染293T细胞进行瞬时表达,转染72h后收取细胞上清先用化学发光酶免分析法(CLEIA)、SDS-PAGE鉴定抗体的表达,然后再用CLEIA鉴定与腺病毒的结合活性。【结果】由于轻链的不同,分别构建了容量为3.0×109(轻链是κ)和1.8×109(轻链是λ)的抗3型、7型腺病毒的Fab噬菌体抗体库,Fab(Κ)和Fab(λ)基因插入率均接近100%。用纯化的3型腺病毒颗粒作为抗原从Fab库中筛选抗体,未筛选到与3型腺病毒特异性结合的阳性克隆;用纯化的7型腺病毒颗粒作为抗原从Fab库中筛选抗体,获得了4株与7型腺病毒特异性结合的阳性克隆,分别是5C、5D、9F、9H,型别特异性检测表明4株阳性克隆与3型、14型、55型腺病毒也有结合活性。阳性克隆进行DNA测序后在IMGT/V-QUEST数据库中进行分析比对,结果显示4株克隆序列各不相同,其中5C、9H的轻链型别是Κ,5D、9F的轻链型别是λ。4株阳性克隆的重链可变区、轻链可变区分别与人胚系免疫球蛋白基因有高度的同源性。5C、9H的Κ轻链可变区成功克隆入Igκ,5C、9F和9H重链可变区成功克隆入Ig H,2条轻链和3条重链组合成6个抗体,并在293T细胞表达。表达的细胞上清经CLEIA鉴定,6个抗体均得到表达,其中抗体组合2和组合5表达量相对较好,CLEIA鉴定结果显示与Adv7有结合活性。表达量相对较好的上清经SDS-PAGE鉴定,在还原和非还原状态下均未见目的条带,说明抗体表达量较低。全抗体型别特异性检测结果表明,表达量较好的抗体组合2和组合5与Adv3、Adv14、Adv55也有结合活性。【结论】成功构建了全人源特异性抗3型、7型腺病毒Fab噬菌体抗体库,筛选到4株与7型腺病毒特异性结合的抗体,并且抗体与3型、14型、55型腺病毒有结合活性。抗体序列转染293T细胞进行全抗体表达,由于抗体表达量较低,抗体活性需要进一步验证。本研究对抗腺病毒噬菌体抗体库的建立和筛选进行了各方面的探索,为未来抗3型、7型腺病毒治疗性抗体的研发提供参考和借鉴。(本文来源于《广州医科大学》期刊2017-03-01）
张光辉,郝长付,高彬,暴磊,翟伟[9]（2016）在《煤工尘肺单链噬菌体抗体库建立和人群验证》一文中研究指出目的:有研究提示尘肺病的发生发展过程与机体免疫功能的变化密切相关,本研究拟构建人源性煤工尘肺噬菌体单链抗体库,从中筛选煤工尘肺特异性单链抗体(single chain variable fragment,scFv),并采用职业流行病学调查进行初步验证,寻找体内是否存在煤工尘肺抗体生物标志,为筛选煤工尘肺诊断和治疗生物标志提供依据。方法:利用煤工尘肺患者外周血,构建人源性煤工尘肺噬菌体单链抗体库,采用煤工尘肺和对照组的肺灌洗液进行4轮富集筛选,并测定库容量。每轮富集筛选时随机挑取20个单菌落,分别制备成scFv。将制备好的scFv包被到酶标板上,Elisa检测煤工尘肺患者(P)和对照者(N)肺灌洗液OD450佰,以P/N>2.0为阳性克隆,P/N>3.0为强阳性克隆。提取强阳性克隆质粒DNA,进行PCR扩增和双酶切验证是否插入scFv基因。并对强阳性克隆进行测序判定,选择867例男性在岗接尘工人作为接尘组(558例煤工尘肺和309位接尘作业者)和393例男性岗前体检者作为对照组,Elisa法检测血浆中筛选出的强阳性克隆抗体浓度。结果:随着富集筛选次数的增加,煤工尘肺噬菌体抗体库的产出量逐渐增多,从8.9×10~3pfu增加到5.5×10~6pfu,并且投入产出比从1.46×10~(-6)上升到6.40×10~(-4),富集倍数增加了438.36倍,说明煤工尘肺噬菌体抗体得到了有效的富集。比对鉴定6个强阳性克隆分别为血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、白介素-18(interleukin-18,IL-18)、热休克蛋白-70.1(heat shock protein-70.1,HSP70.1)、人表皮生长因子受体3(human epidermal growth factor receptor3,HER3)、颗粒酶B(Granzyme B,Gz-B)和类风湿因子(rheumatoid factor,RF)scFv。Logistics回归分析在调整影响因素后得到VEGF(OR(95%CI),0.02(0.01-0.07),P<0.05),RF-Ab(OR(95%CI):0.46(0.28-0.73),P<0.05)和HSP70/HSP-70-Ab(OR(95%CI):0.71(0.53-0.95),P<0.05)是煤工尘肺保护因素(表1-3)。结论:从已构建的人源性煤工尘肺噬菌体抗体库筛选出6种煤工尘肺相关抗体,并且实现了可溶性表达。血清中VEGF,RF-Ab和HSP-70/HSP-70 AB是煤工尘肺诊断和治疗的潜在生物标志。(本文来源于《第六届中国毒理学会免疫毒理专业委员会换届及学术会议资料汇编》期刊2016-11-16）
张秋丽,祁艳华,宋瑞雪,张阳,周景明[10]（2016）在《抗猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)噬菌体抗体文库的构建及筛选》一文中研究指出背景:猪圆环病毒是迄今发现的最小的病毒之一,现已知它包括PCV1和PCV2两个血型,其中PCV2是致病性病毒,它与很多疾病的发生有关。猪圆环病毒现已成为世界范围内危害养猪业最大的病原体之一,因此PCV2的早期诊断对于PCV2的防控至关重要。目的:本研究利用噬菌体展示技术构建猪圆环病毒Ⅱ型噬菌体抗体文库并做了初步筛选研究。方法:将PCV2的ORF2区的基因表达的蛋白作为免疫原免疫小鼠,取血清效价较好的小鼠脾脏,提取总RNA,并反转录成cDNA,以cDNA为模板扩增抗体的VH和VL片段。利用重迭延伸PCR将VH与VL用(Gly4ser)3多肽连接起来构建成sc Fv片段,将噬菌粒载体PCANTAB-5e用sfiⅠ和NotⅠ酶切后与sc Fv构成重组载体,转入到大肠杆菌TG1中,菌液PCR、质粒PCR、酶切鉴定以及序列测序鉴定。随后用辅助噬菌体M13K07辅助感染构成噬菌体文库,利用不同浓度包被原的亲和力筛选方法,筛选出针对猪圆环病毒的噬菌体抗体。结果:SDS-PAGE、ELISA等鉴定结果显示:PCV2的ORF2融合蛋白26KD,叁只小鼠效价均达到106,总RNA提取完整,目的条带VH和VL片段大约300bp到400bp之间显示正确,菌液PCR、重组质粒PCR以及酶切鉴定结果显示转化成功,每轮筛选都有富集现象,18号克隆鉴定为阳性。结论:抗猪圆环病毒Ⅱ型噬菌体文库构建成功,成功筛选出特异性的猪圆环病毒单链抗体克隆,为抗PCV2单链抗体的制备以及病毒的检测奠定了基础。(本文来源于《第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编》期刊2016-11-04）
噬菌体抗体库论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
从未经主动免疫的BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR扩增鼠抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,将轻链和重链可变区基因经重迭延伸拼接PCR反应,构建成单链抗体(ScFv)基因。将ScFv基因克隆到噬菌体载体PCANTAB-5E,转化入大肠杆菌TG1中,筛选出阳性克隆,接种于LB培养基,经辅助噬菌体M13KO7拯救,构建天然鼠源噬菌体抗体库,并进行抗体库滴度测定,通过DNA finger printing技术及单链抗体基因序列分析鉴定抗体库的多样性。以堆型艾美耳球虫裂殖子为靶抗原,对构建的噬菌体抗体库进行亲和筛选,将强阳性重组噬菌体克隆感染大肠杆菌HB2151,经IPTG诱导表达可溶性ScFv抗体,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot鉴定,用ELISA法鉴定其对堆型艾美耳球虫裂殖子抗原的结合活性。结果表明,天然鼠源噬菌体抗体库成功构建,库容量约为2.50×10~(11) CFU/mol,单链抗体库具有一定的多样性。经过4轮亲和筛选,携带抗鸡堆型艾美耳球虫裂殖子表面抗原的特异性噬菌体抗体得到了富集。特异性ScFv抗体在E.coli中分泌表达,表达产物具有免疫活性。筛选出5个与鸡堆型艾美耳球虫裂殖子抗原结合活性较高的克隆,构建的单链噬菌体抗体库的有效表位具有多样性。本研究为进一步认识鸡球虫的各个发育阶段奠定理论基础,为鸡球虫病免疫控制研究提供参考。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
噬菌体抗体库论文参考文献
[1].詹明硕,刘方杰,张亚兰.噬菌体抗体库技术筛选抗VEGF165单克隆抗体[J].生物技术通讯.2019
[2].康茜,任志军,唐欣浩,王雪伟,陈颖彬.天然鼠源噬菌体抗体库的构建及抗鸡堆型艾美耳球虫裂殖子单链抗体的筛选（英文）[J].中国兽医学报.2018
[3].辛英豪.猪源噬菌体抗体库的构建与抗PRRSV抗体的筛选[D].华中农业大学.2018
[4].蒋红欣.噬菌体抗体库技术在抗体研发中的运用[J].科学技术创新.2017
[5].蔡尽忠.噬菌体抗体库技术概述[J].生物学教学.2017
[6].乔媛媛,霍雨佳,周丽君,王欲晓,张达矜.用不同方法从大容量噬菌体抗体库中筛选抗完整食管癌细胞的单链抗体[J].现代肿瘤医学.2017
[7].徐重新,张霄,张存政,刘媛,仲建锋.鼠源噬菌体抗体展示库的构建及初步应用[J].江苏农业学报.2017
[8].刘冬兰.人源特异性抗3型、7型腺病毒Fab噬菌体抗体库的构建及筛选[D].广州医科大学.2017
[9].张光辉,郝长付,高彬,暴磊,翟伟.煤工尘肺单链噬菌体抗体库建立和人群验证[C].第六届中国毒理学会免疫毒理专业委员会换届及学术会议资料汇编.2016
[10].张秋丽,祁艳华,宋瑞雪,张阳,周景明.抗猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)噬菌体抗体文库的构建及筛选[C].第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编.2016
论文知识图
