GDF-5在体外诱导脂肪干细胞向软骨细胞转化实验研究

论文摘要

目的研究体外生长分化因子5（GDF-5）对脂肪干细胞向软骨细胞分化能力的影响。方法选择40只4周龄雌性SD大鼠,体质量约50 g。采用酶消化-密度梯度离心法提取脂肪干细胞,行体外培养,并通过流式细胞术鉴定脂肪干细胞。体外培养的脂肪干细胞分3组,即对照组、矿化组和GDF-5诱导组。不同试剂培养2周后分别进行免疫组织化学、甲苯胺蓝及免疫荧光染色。结果原代细胞经过接种沉降贴壁大量增殖后,按一定方向性排列呈旋涡状或束状,传代后细胞增殖迅速,生长稳定。细胞接种经Ⅱ型胶原免疫组织化学染色:GDF-5诱导组棕黄色阳性表达的细胞数量多;矿化组弱阳性,染色细胞数量少;对照组呈阴性表达。细胞甲苯胺蓝染色示:GDF-5诱导组蓝染阳性,细胞胞浆及其周围有紫红色异常染色;矿化组染色淡,染色细胞少;对照组阴性,细胞几乎均失染。结论 GDF-5能够在体外增强脂肪干细胞的软骨化。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验材料
•     1.1.1 实验动物
•     1.1.2 主要试剂与仪器
•   1.2 方法
•     1.2.1 脂肪干细胞的培养
•     1.2.2 脂肪干细胞的鉴定
•     1.2.3 生长分化因子5诱导脂肪干细胞向软骨细胞分化
•     1.2.4 甲苯胺蓝染色鉴定
•     1.2.5 Ⅱ型胶原免疫组织化学法
•     1.2.6 蛋白聚糖免疫荧光检测
• 2 结果
•   2.1 脂肪干细胞表面分子检测结果
•   2.2 甲苯胺蓝染色结果
•   2.3 Ⅱ型胶原免疫组织化学染色结果
•   2.4 蛋白聚糖免疫荧光表达结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张觅,刘洋,谭俊峰,刘立冰,严磊

关键词: 生长分化因子,脂肪干细胞,软骨分化,诱导分化

来源: 生物医学工程与临床 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 武汉市第五医院骨科

基金: 武汉市科技局科学技术计划资助项目(2013060602010265)

分类号: R329.2

DOI: 10.13339/j.cnki.sglc.20191108.002

页码: 634-639

总页数: 6

文件大小: 1234K

下载量: 119