miR-489-3p靶向负调控BDNF并抑制PC12细胞增殖

论文摘要

目的:探究微小RNA-489-3p（miR-489-3p）对神经生长因子家族重要成员脑源性神经营养因子（BDNF）的转录后调控及对PC12细胞增殖能力的影响。方法:通过生物信息预测和双萤光素酶报告基因实验检测miR-489-3p与BDNF的结合能力。PC12细胞分别转染mimic control/miR-489-3p mimic和inhibitor control/miR-489-3p inhibitor,分别采用RT-qPCR、Western blot、CCK-8和EdU实验检测miR-489-3p和BDNF的表达及细胞增殖能力的变化。结果:生物信息分析和双萤光素酶报告基因实验结果显示,miR-489-3p能够结合BDNF的3′-UTR。转染miR-489-3p mimic可以显著提高PC12细胞的miR-489-3p水平,而BDNF的蛋白表达显著下调,细胞增殖能力显著降低（P<0.05）;转染miR-489-3p inhibitor可以显著降低PC12细胞的miR-489-3p水平,而BDNF的蛋白表达显著上调,并且显著提高了细胞的增殖能力（P<0.05）。过表达或抑制miR-489-3p对BDNF的mRNA表达并无显著影响。结论:miR-489-3p可以在转录后水平靶向负调控BDNF的表达。miR-489-3p抑制PC12细胞的增殖。

论文目录

• 材 料 和 方 法
•   1 细胞株
•   2 主要试剂
•   3 主要方法
•     3.1 转染实验
•     3.2 Luciferase报告基因检测
•     3.3 RT-qPCR实验
•     3.4 Western blot检测
•     3.5 CCK-8法检测细胞活力
•     3.6 EdU实验检测细胞增殖能力
•   4 统计学处理
• 结 果
•   1 BDNF 3′-UTR 和miR-489-3p结合位点之间的相互作用
•   2 双萤光素酶报告基因实验验证miR-489-3p靶向结合BDNF的3′-UTR
•   3 miR-489-3p在转录后水平靶向调控BDNF表达
•   4 转染miR-489-3p mimics和anti-miR-489-3p inhibitor对PC12细胞增殖能力的影响
• 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘得水,吴雪,李丽波,兴桂华,高志影

关键词: 脑源性神经营养因子,微小,细胞增殖,转录后调节

来源: 中国病理生理杂志 2019年07期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 齐齐哈尔医学院医药科学研究院,齐齐哈尔医学院附属第二医院耳鼻喉科

基金: 黑龙江省教育厅科学技术研究项目(No.2016-KYYWF-0871)

分类号: R329.2

页码: 1213-1218

总页数: 6

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