重离子诱变枯草芽孢杆菌高产复合酶菌种的筛选

论文摘要

重离子诱变作为一种新型高效的辐照诱变方式,具有突变率高、突变谱广、突变体稳定等特点。枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）因具有多种水解酶活力而广泛应用于工业生产,虽然经过多次诱变和改造,其酶活力不断提高,但其复合酶活力仍有提升空间。同时,多次同种诱变剂的使用容易导致菌种产生"抗性",酶活力提高不大。为此,本研究首次利用不同剂量12C6+重离子束对枯草芽孢杆菌20076进行辐照诱变。诱变后通过透明圈初筛和酶活力验证复筛方式选育出一株复合酶活力较高的菌株B. subtilis KC-1。与原始菌株相比,其发酵液滤纸酶活力、内切葡聚糖酶活力、β-葡萄糖苷酶活力、外切葡聚糖酶活力、蛋白酶活力和α-淀粉酶活力分别提高了20. 2%、79. 6%、98. 2%、7. 4%、10. 4%和27. 4%。11代遗传稳定性实验结果表明该突变株具有良好的稳定性。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 菌株
•   1.2 培养基
•   1.3 诱变处理
•   1.4 突变菌株的选育
•     1.4.1 致死率的计算
•     1.4.2 菌种初筛
•     1.4.3 不同辐照剂量正突变率计算
•     1.4.4 摇瓶发酵
•   1.5 酶活力的测定方法
•     1.5.1 蛋白酶活力的测定
•     1.5.2 淀粉酶活力测定
•     1.5.3 纤维素酶活力的测定
•   1.6 遗传稳定性测试
•   1.7 统计分析
• 2 结果与分析
•   2.1 致死率和正突变率
•   2.2 初筛结果
•   2.3 菌种复筛
•     2.3.1 蛋白酶活力测定结果
•     2.3.2 α-淀粉酶活力测定结果
•     2.3.3 纤维素酶活力测定结果
•   2.4 突变菌株遗传稳定性分析
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘艳新,胡建华,崔金娜,张耀胜,李永丽,石雅丽,朱明达,刘占英

关键词: 枯草芽孢杆菌,复合酶,重离子诱变,遗传稳定性

来源: 激光生物学报 2019年02期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 内蒙古工业大学化工学院,神舟生物科技有限责任公司

基金: 兰州重离子加速器国家实验室课题项目,内蒙古科技计划项目,中国科学院“西部之光”人才培养计划项目,国家自然科学基金项目(61361016),内蒙古自治区高等学校青年科技英才支持计划项目,内蒙古“草原英才”工程及“草原英才”滚动支持计划项目(CYYC20130034),内蒙古自治区自然科学基金项目(2018MS02019),内蒙古自治区科技成果转化项目(CGZH2018133)

分类号: Q933

页码: 123-130

总页数: 8

文件大小: 391K

下载量: 269