冬凌草甲素通过TPX2诱导前列腺癌细胞凋亡与周期阻滞的研究

论文摘要

目的研究冬凌草甲素对前列腺癌细胞凋亡和周期的影响及机制。方法用0 mg/L、15 mg/L、30 mg/L、60 mg/L、120 mg/L冬凌草甲素处理前列腺癌LNCa P细胞,CCK-8法检测细胞增殖,q RT-PCR和Western blot检测细胞中Xklp2靶蛋白（TPX2）表达变化。前列腺癌LNCa P细胞分成对照组（NC）、Oridonin、TPX2 si RNA、TPX2 si RNA+Oridonin共4组。NC、Oridonin为转染阴性对照慢病毒载体的LNCa P细胞,TPX2 si RNA、TPX2 si RNA+Oridonin为转染TPX2 si RNA重组慢病毒载体的LNCa P细胞,Oridonin、TPX2 si RNA+Oridonin细胞用含有70 mg/L冬凌草甲素细胞培养液培养。在LNCa P细胞中转染TPX2 si RNA慢病毒载体,q RT-PCR和Western blot检测干扰效果。用冬凌草甲素处理下调TPX2的LNCa P细胞,CCK-8法检测细胞增殖变化,PI单染法检测细胞周期分布变化,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V-FITC）/碘化丙啶（PI）双染法检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中细胞周期蛋白（cyclin B）、P21、活化的Caspase-3（C-Caspase-3）蛋白水平。结果冬凌草甲素处理后的LNCa P细胞增殖能力降低,细胞中TPX2 m RNA和蛋白表达水平降低。下调TPX2、冬凌草甲素和下调TPX2联合冬凌草甲素处理均可以降低LNCa P细胞增殖能力,提高细胞G2/M期比率,提高细胞凋亡率,促进细胞中cyclin B、P21、C-Caspase-3蛋白表达,并且下调TPX2联合冬凌草甲素对细胞增殖抑制、细胞周期阻滞、凋亡促进和cyclin B、P21、C-Caspase-3蛋白表达促进作用增强。结论冬凌草甲素可以通过下调TPX2表达诱导前列腺癌细胞凋亡并阻滞细胞周期。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 CCK-8法检测冬凌草甲素对前列腺癌细胞增殖影响
•   1.3 冬凌草甲素对前列腺癌细胞中TPX2表达影响
•   1.4 细胞转染和分组处理
•   1.5 PI单染法检测细胞周期
•   1.6 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡
•   1.7 Western blot检测细胞中cyclinB、P21、C-Caspase-3蛋白表达
•   1.8 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 各组前列腺癌细胞存活率比较
•   2.2 两组前列腺癌细胞中TPX2的表达比较
•   2.3 TPX2 si RNA可明显下调前列腺癌细胞中TPX2的表达水平
•   2.4 各组前列腺癌细胞存活率、细胞周期分布及细胞中cyclinB、P21蛋白表达比较
•   2.5 各组前列腺癌细胞凋亡情况比较
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 吴楠,张涛,刘文军

关键词: 前列腺癌,细胞,冬凌草甲素,靶蛋白,细胞周期,细胞凋亡

来源: 临床和实验医学杂志 2019年24期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 中药学

单位: 唐山市中医医院泌尿外科,青岛阜外医院内科学,迁安市人民医院泌尿外科

分类号: R285

页码: 2632-2636

总页数: 5

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