种间杂交选育新型产脂蛹虫草

论文摘要

为选育能够合成虫草素又能高效积累油脂的新型蛹虫草菌株,将高产虫草素的蛹虫草FY1421及高效合成油脂特别是不饱和脂肪酸的深黄被孢霉菌株Z0108进行原生质体融合。对亲本的原生质体的形成与再生、双亲灭活及融合的条件进行了筛选与优化,并结合96微孔板初筛和摇瓶发酵复筛,获取融合子。结果表明:蛹虫草菌株FY1421采用1. 5%溶壁酶+0. 5%蜗牛酶+0. 5%纤维素酶的混合酶液处理120 min,原生质体数量最多,再生率最高;深黄被孢霉菌株Z0108采用1%溶壁酶+1%蜗牛酶+1%纤维素酶的混合酶液处理4 h,原生质体数量最多,再生率最高; FY1421原生质体采用60℃水浴热灭活10 min,Z0108原生质体采用紫外线灭活30 s,均可达到100%的灭活率;灭活双亲在35℃下,使用40%的PEG促融10 min,融合效率最高。从650株融合子筛选得到融合菌株RCS262,其摇瓶发酵虫草素含量达5 926μg·g-1,油脂含量达到37. 5%。采用原生质体融合技术进行蛹虫草与深黄被孢霉的种间杂交,成功获得融合菌株既能高产虫草素,也具有高效积累油脂的能力。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验材料
•     1.1.1 出发菌种
•     1.1.2 培养基
•     1.1.3 主要药品和试剂
•     1.1.4 主要仪器设备
•   1.2 试验方法
•     1.2.1 蛹虫草菌株FY1421原生质体制备
•     1.2.2 深黄被孢霉原生质体制备
•     1.2.3 原生质体再生
•     1.2.4 原生质体灭活
•     1.2.5 原生质体融合与再生
•     1.2.6 融合子的检出
•   1.3 数据处理与分析
• 2 结果与分析
•   2.1 蛹虫草菌株FY1421原生质体制备最佳条件的选择
•     2.1.1 酶系统的选择
•     2.1.2 酶解时间的选择
•   2.2 深黄被孢霉菌株Z0108原生质体制备最佳条件的选择
•     2.2.1 酶系统的选择
•     2.2.2 酶解时间的选择
•   2.3 原生质体灭活条件确定
•   2.4 融合条件的确定
•   2.5 融合子检出
• 3 结论与讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 梁玲,赵燕玉,黄建忠

关键词: 蛹虫草,深黄被孢霉,杂交,原生质体融合

来源: 福建农业科技 2019年11期

年度: 2019

分类: 农业科技

专业: 农作物

单位: 福建师范大学生命科学学院工业微生物教育部工程研究中心

基金: 国家高技术研究开发计划项目(2015AA021005)

分类号: S567.3

DOI: 10.13651/j.cnki.fjnykj.2019.11.001

页码: 1-7

总页数: 7

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