无血清培养体系对脐带血CD34+细胞定向红系分化影响的比较

论文摘要

目的:通过3种无血清红系定向诱导分化培养体系比较,优化培养体系诱导脐带血干/祖细胞（HSPC）体外红系定向分化,以满足基础研究与临床应用。方法:应用磁珠分选脐带血单个核细胞中的CD34+细胞;分别接种到3种培养体系（1、2、3）中并采用3阶段培养法诱导CD34+细胞红系定向分化,在分化不同阶段进行细胞计数,瑞氏吉姆萨染色,应用流式细胞术检测细胞表面CD71、CD235a的表达,集落形成能力检测鉴定红系分化的进程。结果:体系2促HSPC增殖能力最强,体系3促红系分化效果最佳。体系2培养的细胞增殖能力均明显高于体系1、2（P <0.05）;FACS分析显示,红系表面分子CD71、CD235a在体系3培养的细胞表面表达最高,分化d 15 CD235a+百分率高达（92.23±3.89）%,体系2为（84.67±3.12）%,体系1为（72.17±6.83）%（P <0.05）;细胞形态学染色显示,体系3培养的细胞在分化d 12的晚幼红细胞比例为（67.67±2.08）%,是体系2的10.69倍、体系1的25.34倍（P <0.05）;造血集落形成实验发现在体系3中d 3-9形成的BFU-E比例逐渐升高（r=0.99, P <0.05）,体系3中BFU-E形成比率明显高于体系1、2（P <0.05）。结论:通过比较3种培养体系,筛选出体系3是促进CD34+细胞体外红系分化最有效的体系,体系2是促增殖最有效的体系。本研究为进一步提高HSPC体外红系增殖与诱导效率奠定了技术基础,也为研究红系分化调控机制提供了体外培养体系。

论文目录

• 材料和方法
•   标本来源
•   试剂与仪器
•   脐带血CD34+细胞的制备
•   脐带血CD34+细胞的体外培养
•   细胞计数
•   细胞表面CD71、CD235a表达的流式细胞术检测
•   细胞甩片、瑞氏姬姆萨染色
•   造血祖细胞集落培养
•   统计学分析
• 结果
•   不同培养体系中脐带血CD34+细胞增殖能力的比较
•   不同培养体系中脐带血CD34+细胞红系分化比较
•   不同培养体系中CD34+细胞红系分化的细胞形态学分析比较
•   不同培养体系中CD34+细胞红系分化的造血集落形成实验比较
• 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 段永娟,王文天,魏晓晶,杨洋,赵慧娟,胡晓

关键词: 无血清培养体系,红系分化,造血干祖细胞,细胞

来源: 中国实验血液学杂志 2019年03期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室

基金: 国家自然科学面上基金(81170459),863国家高技术研究发展计划(2011AA020118),国家自然科学青年基金(81500084),协和学者特聘教授资助经费

分类号: R329.2

DOI: 10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2019.03.049

页码: 935-941

总页数: 7

文件大小: 2022K

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