导读:本文包含了白藜芦醇合酶基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,杆状,家蚕,链式反应,逆转录,葡萄,云杉。
白藜芦醇合酶基因论文文献综述
孙诗雯[1]（2017）在《葡萄白藜芦醇合酶基因的克隆及转化黄芪的研究》一文中研究指出白藜芦醇合成酶(Resveratrol Synthase,RS)是白藜芦醇(Resveratrol,Res)生物合成代谢途径中的限速关键酶。RS基因无论是在植物,还是在微生物中都实现了遗传转化与生产活性产物,并且在两种表达体系中获得的Res在生物合成代谢途径和表达调控方面均具有生物学活性。随着Res的需求日益增大,通过对有效成分的直接提取,已经远远不能满足对Res的需求,通过现代生物技术和基因工程技术对植物产生改良或者超量表达的途径来有效的提高生产Res这种活性成分已经成为了有效的途径和可行的策略。因此,利用转基因植物技术进行异源植物生产Res的研究前景广阔,同时通过转化RS基因达到协同作用的理念受到了人们广泛的关注。本实验利用基因工程技术克隆RS基因并进行生物信息学分析,再通过农杆菌介导法将葡萄中克隆的RS基因转入黄芪中,由于黄芪中主要有效成分黄酮和白藜芦醇的生物合成途径都从苯丙氨酸合成途径开始,有相同的合成过程,所以选择黄芪为受体材料,不仅可以探索RS基因转化异源植物黄芪,达到异源植物生产白藜芦醇的可能,并为黄芪转基因育种提供技术支持;更可以提高黄芪抗性,进一步佐证白藜芦醇合成酶的功能,为中药现代化提供了有价值的理论参考。本论文获得了以下研究结果:1.RS基因编码一个含310个氨基酸残基的蛋白质,经Blast2go软件分析该基因编码白藜芦醇合成酶。2.成功构建了RS基因的表达载体:p BR121-RS并利用农杆菌遗传转化法对黄芪外植体进行感染,共获得抗性芽204棵,经过生根培养、炼苗、移栽后,共获得11株转基因阳性黄芪植株。3.经DNA、Southern blot杂交以及RT-PCR检测,获得3株转基因黄芪阳性植株,被证明RS基因完全整合到黄芪基因组中并表达产生白藜芦醇。4.经过比较转基因阳性植株和非转基因植株中的白藜芦醇含量,发现3株具有Southern blot杂交信号的阳性植株比非转基因植株的白藜芦醇含量高,其中黄芪非转基因植株的白藜芦醇含量为2029.46μg/g,而叁颗黄芪转基因植株的白藜芦醇含量分别为2998.32μg/g、3854.66μg/g、3989.77μg/g,分别提高了48.23%、91.27%和96.59%。本研究建立了黄芪再生及转化体系,并将来源于巨峰葡萄的RS基因成功的转入黄芪中进行表达,获得黄芪转基因阳性植株,这不仅可以探索RS基因转化异源植物黄芪,达到异源植物生产白藜芦醇的可能,并为黄芪转基因育种提供技术支持;更可以提高黄芪抗性,进一步佐证白藜芦醇合成酶的功能,为中药现代化提供了有价值的理论参考。(本文来源于《吉林大学》期刊2017-06-01）
张晓丽,秦晨亮,代红军[2]（2016）在《半定量RT-PCR法检测赤霞珠葡萄白藜芦醇合酶STS基因的表达》一文中研究指出以赤霞珠葡萄(Vitis vinifera L.)为材料,以Actin基因为内参,采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测葡萄果实发育过程中白藜芦醇合酶(STS)基因表达量的变化,以期建立适于检测该基因表达的RT-PCR试验体系。结果表明,在退火温度58℃,扩增循环31次的时候,STS基因能够进行较好的扩增。在赤霞珠葡萄浆果发育的过程中,花后20、50 d STS基因表达量较少,在花后80 d表达量增到最大,花后110 d又降低。(本文来源于《湖北农业科学》期刊2016年03期）
夏海武,曹慧,王效忠[3]（2015）在《桑树白藜芦醇合酶基因全长克隆及序列分析》一文中研究指出根据已知的其他物种白藜芦醇合酶c DNA保守序列设计引物,用RT-PCR技术从桑葚中扩增获得白藜芦醇合酶基因部分c DNA序列,再用RACE技术获得其两端序列,并拼接得到完整的1 442 bp白藜芦醇合酶基因。经序列分析发现,桑树白藜芦醇合酶基因开放阅读框长1 170 bp,编码389个氨基酸,氨基酸序列含有芪合酶家族特征信号区GVLFGFGPGLT和活性中心序列GCFAGGTVLR;该基因与花生芪合酶基因的核苷酸序列同源性高达82.82%,氨基酸序列的同源性高达87.15%。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2015年04期）
潘晶晶,潘华晔,严珍珍,叶甫云,张耀洲[4]（2014）在《利用家蚕杆状病毒表达系统表达葡萄白藜芦醇芪合酶基因》一文中研究指出通过提取葡萄幼叶总RNA,用RT-PCR的方法获得白藜芦醇芪合酶基因,并将其成功克隆到pFastBac HTA中,获得重组pFastBac HTA-STS载体,转化DH10Bac大肠杆菌感受态细胞,筛选获得重组Bacmid DNA后转染家蚕BmN细胞,进一步筛选获得重组杆状病毒,重组病毒接种家蚕蛹,工程蚕蛹匀浆后经初步纯化收获粗酶液,利用粗酶液对葡萄提取液进行转化,体外生物合成白藜芦醇,提取液中的白藜芦醇含量显示出明显的上升。该研究为体外生物合成白藜芦醇提供了新途径。(本文来源于《药物生物技术》期刊2014年02期）
刘聃璐,林拥军[5]（2014）在《葡萄白藜芦醇合酶基因转化水稻的研究》一文中研究指出将来源于2个葡萄品种的白藜芦醇合酶基因以组成型表达的强启动子Ubiquitin驱动,并利用农杆菌介导的遗传转化引入粳稻品种中花11中。通过对单拷贝转基因家系基因表达量及白藜芦醇目标物的检测,发现大多数转基因家系的外源基因可稳定表达,但检测到的最终产物不是白藜芦醇,而是白藜芦醇苷(亦称云杉新苷),最高检出量达到了10.26μg/g,是野生型对照的1 000倍,推测这是在生成白藜芦醇的基础上,水稻内源的糖基转移酶作用的结果。虽然经抗病检测发现转基因植株并没有对稻瘟病菌表现出明显抗性,但是高含量的云杉新苷转基因家系可以作为提升水稻潜在营养价值的材料进行使用。(本文来源于《华中农业大学学报》期刊2014年02期）
郭辉力,罗在柒,杨亚东,马兰青,王有年[6]（2013）在《葡萄白藜芦醇合酶基因VvSTS的克隆及其在原核中的表达》一文中研究指出白藜芦醇是一种含有芪类结构的非黄酮类多酚化合物,存在于少数几种植物中,是一种植保素,同时具有多种药理和保健功能,如抗肿瘤、心血管保护、抗氧化功能等。白藜芦醇合酶是催化合成白藜芦醇的关键酶,为进一步验证葡萄白藜芦醇合酶基因的功能,比较其与其它物种白藜芦醇合酶催化活性的差异,筛选高活性表达白藜芦醇的基因。以‘京玉'葡萄为材料,从其叶片中提取基因组DNA,以其为模板,通过Overlap-PCR技术克隆得到葡萄白藜芦醇合酶(stilbene synthase,STS)基因。将回收的目的基因连接到克隆载体pMD18-T上,经酶切、测序对克隆基因进行鉴定,结果表明STS基因片段大小1 176 bp,编码392个氨基酸。(本文来源于《中国园艺学会2013年学术年会论文摘要集》期刊2013-10-20）
廖静文,郭丽琼,林俊芳,游楚镇[7]（2013）在《白藜芦醇合酶基因遗传转化杏鲍菇的研究》一文中研究指出目的:研究利用杏鲍菇作为生物反应器表达白藜芦醇。方法:以杏鲍菇菌株Pe18和P811为材料,以潮霉素浓度梯度对杏鲍菇原生质体与菌丝体对潮霉素的敏感浓度进行测定。采用PEG介导法将白藜芦醇合酶基因(rs)和潮霉素抗性基因(hph)共转化进杏鲍菇的原生质体中,采用潮霉素筛选与PCR扩增对拟转化子进行筛选鉴定。结果:Pe18和P811菌株的原生质体对潮霉素的最低敏感浓度分别为20μg/mL和10μg/mL,两菌株的菌丝体对潮霉素的敏感性均为160μg/mL;90个拟转化子中有30个同时整合了两个基因。结论:杏鲍菇不同菌株的原生质体的潮霉素敏感性不同,不同菌株菌丝体的潮霉素敏感性相同,相同菌株的原生质体和菌丝体的潮霉素敏感性不同,rs和hph两个基因在杏鲍菇中的共转化率为33%。(本文来源于《生物技术》期刊2013年05期）
郑钦[8]（2013）在《花生白藜芦醇合酶基因在烟草根部的表达》一文中研究指出白藜芦醇(Resveratrol,简称Res),其化学名为3,5,4’-叁羟基-反-二苯乙烯(3,5,4'-trihy droxysitlbene),又名芪叁酚,是一种重要的植物抗毒素,存在于虎杖、葡萄、花生等植物中,在葡萄果皮和花生根中含量尤为丰富。它具有多种生物活性,是一种天然的抗氧化剂,可以降低血脂,抑制血小板凝结,抗癌,抗炎,抗辐射,抗衰老,防治心血管疾病等。它与紫杉醇都被誉为绿色抗癌药物。但自然界中存在的白藜芦醇的含量较少,利用生物技术生产白藜芦醇有望高效生产白藜芦醇。白藜芦醇合酶(Resveratrol synthase,简称RS)是白藜芦醇合成的关键酶,本研究利用烟草根特异表达启动子驱动花生白藜芦醇合酶基因在烟草根部的表达来生产白藜芦醇。本研究得到如下结果：1、以有机溶剂浸提法提取闽花6号花生叁叶期的根、茎、叶、下胚轴中的白藜芦醇,以RP-HPLC法检测其含量,发现各组织器官中的白藜芦醇含量不等,且下胚轴中不含有白藜芦醇,其含量呈现根>叶>茎>下胚轴的趋势。2、利用PCR的方法,根据本实验分离得到的1503bp的NtR12启动子序列设计引物,从烟草基因组中克隆出烟草根、茎特异表达启动子NtR12,测序后得到5个序列有差异的启动子序列,通过利用PLACE database (availabled at http://www.dna.affrc.go.jp/PLACE/signalscan.html; Higoetal.1999)分析了该启动子的序列,该序列具有TATA-box, CAAT-box, ROOTMOTIFTAPOXl等顺式作用元件,具有典型的根特异表达启动子的特征。3、构建了烟草根(或含茎)部特异表达载体pB1121-NtR12-GUSA、pBI121-NtR12-RS,将本研究构建的两个载体与pBI121-NtR2-RS、pBI121-NtR6-RS载体经农杆菌介导转化本生烟草和烟草优良品种翠碧一号获得了转基因植株。4、用发根农杆菌001和发根农杆菌002分别侵染本生烟草和烟草优良品种翠碧一号无菌苗,进行无菌培养,发现发根农杆菌001侵染CB-1烟草、发根农杆菌002侵染本生烟草有利于进行快速发根,指出发根农杆菌诱导发根因菌株和植物寄主不同而异。将经过Kan筛选得到的转基因芽,分别进行自然生根培养和利用发根农杆菌诱异发根,发现用发根农杆菌侵染烟草可显着促进根的生长。5、将经过发根农杆菌侵染诱导的毛状根进行液体培养,发现液体培养可使毛状根大量生产,其生长速率比固体培养基快。6、提取转基因烟草叶片的DNA,经PCR检测以及根、茎、叶的RNA的提取、RT-PCR检测,证明已获得阳性植株,其白藜芦醇的提取鉴定尚待分析；经过发根农杆菌诱导的转基因烟草根中的RNA提取、RT-PCR验证以及白藜芦醇的提取鉴定也在进行中。(本文来源于《福建农林大学》期刊2013-04-01）
宋长征,张振文[9]（2013）在《赤霞珠白藜芦醇合酶基因的克隆及酿酒酵母表达载体的构建》一文中研究指出为克隆酿酒葡萄品种赤霞珠的白藜芦醇合酶基因并构建其酿酒酵母表达载体,利用改良CTAB法提取赤霞珠葡萄叶片组织中的DNA,根据文献报道的序列(Genbank登录号AF128861)设计引物扩增得到白藜芦醇合酶基因全长序列。将全长序列克隆至克隆载体后,通过重迭延伸PCR扩增到RS基因cDNA片段。然后分别将RS基因全序列和cDNA片段连接至真核表达载体pGBKT7,经克隆和测序分析后,构建两种真核表达载体pGBKT7/RSDNA和pGBKT7/RScDNA,用SD-trp选择培养基筛选出阳性克隆,菌落PCR验证得到阳性转化子。(本文来源于《西北农业学报》期刊2013年01期）
林碧英,钱昆,连肖华,林忠平,张瑜[10]（2012）在《白藜芦醇合酶基因对草莓遗传转化的研究》一文中研究指出根据已公布的白藜芦醇合酶基因(RS)序列,利用RT-PCR方法从川鄂爬山虎总RNA中获得完整的RScDNA序列;根据已公布的草莓果实特异性启动子RJ39序列,利用PCR方法从草莓基因组DNA中获得该启动子序列;构建特异性植物表达载体pCAMBIA3300-RJ39-RS-Tnos;在根癌农杆菌介导下,利用叶盘法转化草莓,通过PPT筛选和PCR检测,获得18个转基因株系,对其中7个株系进行Southern印迹杂交鉴定,均杂交出条带。(本文来源于《热带作物学报》期刊2012年05期）
白藜芦醇合酶基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以赤霞珠葡萄(Vitis vinifera L.)为材料,以Actin基因为内参,采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测葡萄果实发育过程中白藜芦醇合酶(STS)基因表达量的变化,以期建立适于检测该基因表达的RT-PCR试验体系。结果表明,在退火温度58℃,扩增循环31次的时候,STS基因能够进行较好的扩增。在赤霞珠葡萄浆果发育的过程中,花后20、50 d STS基因表达量较少,在花后80 d表达量增到最大,花后110 d又降低。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
白藜芦醇合酶基因论文参考文献
[1].孙诗雯.葡萄白藜芦醇合酶基因的克隆及转化黄芪的研究[D].吉林大学.2017
[2].张晓丽,秦晨亮,代红军.半定量RT-PCR法检测赤霞珠葡萄白藜芦醇合酶STS基因的表达[J].湖北农业科学.2016
[3].夏海武,曹慧,王效忠.桑树白藜芦醇合酶基因全长克隆及序列分析[J].江苏农业科学.2015
[4].潘晶晶,潘华晔,严珍珍,叶甫云,张耀洲.利用家蚕杆状病毒表达系统表达葡萄白藜芦醇芪合酶基因[J].药物生物技术.2014
[5].刘聃璐,林拥军.葡萄白藜芦醇合酶基因转化水稻的研究[J].华中农业大学学报.2014
[6].郭辉力,罗在柒,杨亚东,马兰青,王有年.葡萄白藜芦醇合酶基因VvSTS的克隆及其在原核中的表达[C].中国园艺学会2013年学术年会论文摘要集.2013
[7].廖静文,郭丽琼,林俊芳,游楚镇.白藜芦醇合酶基因遗传转化杏鲍菇的研究[J].生物技术.2013
[8].郑钦.花生白藜芦醇合酶基因在烟草根部的表达[D].福建农林大学.2013
[9].宋长征,张振文.赤霞珠白藜芦醇合酶基因的克隆及酿酒酵母表达载体的构建[J].西北农业学报.2013
[10].林碧英,钱昆,连肖华,林忠平,张瑜.白藜芦醇合酶基因对草莓遗传转化的研究[J].热带作物学报.2012
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