气肿疽NanA基因真核表达质粒的构建与鉴定

论文摘要

为构建气肿疽NanA基因真核表达质粒,根据GenBank中已发表的气肿疽梭菌NanA基因序列,设计合成了1对特异性引物,以气肿疽梭菌基因组DNA为模板,扩增出NanA目的基因并克隆至pMD 18-T simple载体,将连接后的pMD 18-T-NanA进行鉴定分析。将克隆质粒pMD 18-T-NanA进行双酶切后,与pVAX1真核表达质粒连接。结果表明:构建的重组克隆质粒pMD 18-T-NanA和重组表达质粒pVAX1-NanA经PCR鉴定和酶切鉴定正确。该试验成功构建了气肿疽NanA基因真核表达质粒,为气肿疽核酸疫苗的制备奠定了基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验菌株及试剂
•   1.2 引物设计与合成
•   1.3 延边株气肿疽梭菌DNA的提取与NanA基因的扩增
•   1.4 气肿疽梭菌NanA基因的克隆与鉴定
•   1.5 重组质粒pVAX1-NanA的构建及鉴定
• 2 结果与分析
•   2.1 NanA基因的扩增
•   2.2 重组质粒pMD 18-T-NanA的PCR及双酶切鉴定
•   2.3 重组质粒pVAX1-NanA的PCR及双酶切鉴定
•   2.4 NanA基因核苷酸同源性比对
• 3 讨论与结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 马玉腾,罗永仁,姜永越,于成东,张皓,金鑫

关键词: 气肿疽梭菌,基因,真核表达质粒,鉴定

来源: 延边大学农学学报 2019年03期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 延边大学农学院,图们市农业农村局畜牧管理总站,敦化市民政局

基金: 吉林省教育厅“十二五”科学技术重点项目(吉教科合字[2014]第6号)

分类号: S852.61

DOI: 10.13478/j.cnki.jasyu.2019.03.009

页码: 53-58

总页数: 6

文件大小: 3004K

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