导读:本文包含了长效类似物基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:胰岛素类似物,Pluronic,L64-电脉冲体系,1型糖尿病小鼠,骨骼肌基因治疗
长效类似物基因论文文献综述
杨平,苏若珂,邓璐,杨月瑶,王刚[1]（2019）在《利用小鼠骨骼肌细胞持续表达单链胰岛素类似物进行1型糖尿病模型鼠的长效基因治疗》一文中研究指出目的探讨Pluronic L64-电脉冲(L/E)体系介导的单链胰岛素类似物基因在骨骼肌组织的传递表达对1型糖尿病小鼠的治疗效果和影响。方法将胰岛素基因中的C肽区域换成(GGGGS)_3,克隆到pcDNA3.1(+)质粒中,构建载体pcDNA-INS。使用链脲佐菌素腹腔注射雄性BALB/c小鼠建立1型糖尿病小鼠模型,并分为L/E联合pcDNA3.1(+)空质粒治疗的L/E-pcDNA3.1(+)组、仅使用pcDNA-INS裸质粒治疗的pcDNA-INS组和L/E联合pcDNA-INS裸质粒治疗的L/E-pcDNA-INS组。模型小鼠在胫骨前肌注射相关质粒进行治疗,且根据治疗方案在注射1 h后进行Pluronic L64-电脉冲处理,并以生理盐水处理的正常小鼠(NC)组作为对照。记录各组小鼠的血糖、体质量、血清胰岛素含量、生存率、免疫组化、外形特征及组织病理等指标。结果 (1)pcDNA-INS质粒通过酶切和测序鉴定无误;(2)与NC组相比,模型小鼠血糖显着上升,体质量显着下降(P<0.05),且胰岛遭到严重破坏;(3)L/E-pcDNA-INS组的血糖水平和血清胰岛素含量显着缓解,与NC组较为接近,pcDNA-INS组的血糖缓解和胰岛素补偿远不及L/E-pcDNA-INS组(P<0.05),且与NC组之间的差异一直有统计学意义(P<0.05)。第4周免疫组化结果显示,L/E-pcDNA-INS组的胰腺胰岛素表达较少,但肌肉胰岛素表达量较高,且该组生存率较高,与NC组均为100%(12/12),L/E-pcDNA-INS组的病理结果和外形特征与NC组小鼠最为接近,L/E-pcDNA3.1(+)组与pcDNA-INS组在不同部位均有不同程度的病变发生,且鼠毛疏少粗糙,体形较小。结论 Pluronic L64-电脉冲体系与单链胰岛素类似物基因联合治疗1型糖尿病的效果较好,且无明显不良影响,可为相关研究提供实验依据。(本文来源于《四川动物》期刊2019年06期）
严正杰,杨欢利,孙雪萍,赵西彪,丁家桐[2]（2008）在《山羊FSH及其长效类似物基因在小鼠乳腺中的暂态表达》一文中研究指出应用山羊促卵泡素长效类似物基因构建其乳腺暂态表达载体pcDNAFSH-βCTP、pcDNAFSH-βCTP-α及构建报告基因pcDNAEGFP,测序后通过脂质体转染至怀孕末期的小鼠乳腺组织。结果表明,构建的乳腺暂态表达载体在小鼠乳腺中获得了表达,表达量分别为pcDNAFSHα,β(7.933±2.074)IU/L,pcDNAFSHα,-βCTP(9.311±2.995)IU/L,pcDNAFSH-βCTP-α(11.059±4.107)IU/L。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2008年07期）
杨欢利,赵西彪,宋晓娟,丁家桐[3]（2008）在《山羊重组促卵泡素长效类似物基因在毕赤酵母中表达》一文中研究指出为了获得长效FSH制剂,利用重迭PCR技术将山羊FSH的α,β亚单位,通过hCGβ亚单位羧基末端延长肽(CTP)基因序列的连接,构建成单链长效类似物基因FSHβ-CTP-α。将其克隆至表达载体pPIC9K,重组载体线性化处理后电转化至毕赤酵母GS115中,经判型和G418筛选后获得高拷贝菌株His+Mut+。经甲醇诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析表明:重组FSHβ-CTP-α的转化子可以正确有效地表达目的蛋白,分子量约为29kD。放射免疫分析法(RIA)测定表达上清,高拷贝转化子的平均表达量为91.849mIU/mL,显着高于低拷贝转化子的平均37.419mIU/mL的表达量,为FSH的结构研究和长效FSH制剂的生产奠定了基础。(本文来源于《生物工程学报》期刊2008年03期）
高剑坤,蔡绍皙,范开,龙波[4]（2007）在《2种新型基因工程长效人胰岛素类似物》一文中研究指出甘精胰岛素和地特胰岛素是2种新型的人胰岛素类似物。虽然他们都通过基因工程的方法生产,药效能持续24h,无明显的波峰和波谷,是真正意义上的基础胰岛素,但是这2种长效胰岛素的分子结构、长效机制、生产工艺各不相同,在临床使用上也有各自的利弊。(本文来源于《中国新药与临床杂志》期刊2007年07期）
杨欢利[5]（2007）在《山羊重组促卵泡素（FSH）及其长效类似物基因在巴斯德毕赤酵母中的表达研究》一文中研究指出FSH对配子的发生、分化、成熟及与生殖有关的行为的发生都起着重要的作用。FSH制剂可广泛的应用于动物的生殖调控,提高其繁殖潜力,也可在人类辅助生殖临床上诱导排卵,治疗生殖方面的疾病。重组FSH可避免天然激素制剂在应用过程中的不足,为FSH的高效、广泛的应用带来了契机。本研究在获得山羊FSH及其长效类似物基因cDNA序列的基础上,构建其酵母表达载体在巴斯德毕赤酵母中进行稳定的表达,为高效表达重组FSH及其长效类似物基因提供了必备的条件。根据FSH及其长效类似物基因序列和酵母表达载体的特点,设计了含有相应酶切位点和可以去掉目的基因信号肽的特异性引物,分别以pVITRO-FSHα,β-CTP,pVITRO-FSHβ-CTP-α为模板,PCR扩增获得含有特异性酶切位点的FSHα、FSHβ、FSHβ-CTP、FSHβ-CTP-α。将扩增的目的基因与载体pPIC9K和pPICZαA经限制性内切酶EcoRI和NotI双酶切后,再进行连接和转化构建含有目的基因的酵母表达载体,经PCR和测序验证正确后大提酵母表达载体。将纯化的酵母表达载体经酶切线性化后,再进行纯化和浓缩使其浓度为0.5～1μg/mL后,采用电转化的方法将含FSHα的载体分别与含有FSHβ、FSHβ-CTP的载体共转化到感受态的酵母细胞的基因组中,而含有FSHβ-CTP-α的载体单独转化到感受态的酵母细胞的基因组中;然后采用营养缺陷型的培养基、含抗生素的培养基及PCR的方法筛选阳性酵母转化子His+及高拷贝转化子,再利用MM和MD培养基筛选甲醇利用快型菌落Mut+。将His+Mut+型转化子接种于BMGY培养基获得生物量的菌体后,再用含0.5%甲醇的BMMY培养基诱导表达,每间隔24h取一次表达上清进行SDS-PAGE电泳分析及Western blot鉴定,然后用放射免疫的方法测定FSH的表达量。结果显示表达蛋白的分子量:FSHαβ约为27KD、FSHαβ-CTP约为28KD、FSHβ-CTP-α约为29KD,与预期的大小一致,FSHβ为22KD糖基化高一些,高浓度G418筛选的高拷贝转化子的表达量比低浓度G418筛选的菌落的表达量显着的高,FSH长效类似物基因的表达量显着高于FSH基因的表达量,表明CTP结构具有促进基因表达的功能。本次实验成功的构建了FSH及其长效类似物基因的巴斯德毕赤酵母表达载体,并在GS115中成功的进行了表达,为进一步开展FSH及其类似物的研究和应用奠定了基础。(本文来源于《扬州大学》期刊2007-05-01）
长效类似物基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
应用山羊促卵泡素长效类似物基因构建其乳腺暂态表达载体pcDNAFSH-βCTP、pcDNAFSH-βCTP-α及构建报告基因pcDNAEGFP,测序后通过脂质体转染至怀孕末期的小鼠乳腺组织。结果表明,构建的乳腺暂态表达载体在小鼠乳腺中获得了表达,表达量分别为pcDNAFSHα,β(7.933±2.074)IU/L,pcDNAFSHα,-βCTP(9.311±2.995)IU/L,pcDNAFSH-βCTP-α(11.059±4.107)IU/L。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
长效类似物基因论文参考文献
[1].杨平,苏若珂,邓璐,杨月瑶,王刚.利用小鼠骨骼肌细胞持续表达单链胰岛素类似物进行1型糖尿病模型鼠的长效基因治疗[J].四川动物.2019
[2].严正杰,杨欢利,孙雪萍,赵西彪,丁家桐.山羊FSH及其长效类似物基因在小鼠乳腺中的暂态表达[J].中国兽医学报.2008
[3].杨欢利,赵西彪,宋晓娟,丁家桐.山羊重组促卵泡素长效类似物基因在毕赤酵母中表达[J].生物工程学报.2008
[4].高剑坤,蔡绍皙,范开,龙波.2种新型基因工程长效人胰岛素类似物[J].中国新药与临床杂志.2007
[5].杨欢利.山羊重组促卵泡素（FSH）及其长效类似物基因在巴斯德毕赤酵母中的表达研究[D].扬州大学.2007