海生红藻多管藻中2种R-藻红蛋白的分离与分析

论文摘要

本研究以海生红藻多管藻（Polysiphonia urceolata）为材料,用DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析和Butyl Sepharose 4 Fast Flow疏水作用层析,从Sephacry S-300 （S-300）凝胶过滤所得R-藻红蛋白中分离纯化出在带电性和疏水性表现结构特性差异的2种R-藻红蛋白组分,R-PEI和R-PEII.这2种R-藻红蛋白在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Native-PAGE）和非变性等电聚焦（native isoelectric focusing,Native-IEF）中均表现单一条带,等电点（pI）分别为R-PEI 4. 7,R-PEII 4. 6. R-PEI和R-PEII有着相同的荧光光谱和400～750 nm吸收光谱,仅在波长小于400 nm时R-PEI表现出大于RPEII的紫外光吸收. SDS-PAGE多肽组成分析结果证明,R-PEI和R-PEII不仅有相同的α、β、γ等有色亚基,而且含有相同无色多肽.这些结果表明,R-PEI和R-PEII来自于多肽链的结构特性变化,没有对R-藻红蛋白各亚基的发色团构象及其微环境产生明显影响.

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 藻胆蛋白样品提取[13]
•   1.2 2种藻红蛋白的分离纯化
•     1.2.1 S-300凝胶过滤层析[14]
•     1.2.2 离子交换层析
•     1.2.3 疏水作用层析
•   1.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳
•     1.3.1 Native-PAGE
•     1.3.2 非变性等电聚焦
•     1.3.3 SDS-PAGE
•   1.4 光谱测定
•   1.5 荧光光谱测定
• 2 实验结果分析
•   2.1 藻胆蛋白提取液的S-300凝胶过滤分离
•   2.2 R-PE组分的离子交换层析
•   2.3 R-PEI和R-PEII的疏水层析
•   2.4 R-PEI和R-PEII荧光光谱特性
•   2.5 非变性PAGE和IEF
•   2.6 SDS-PAGE
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刁海平,侯翠英,赵明日,孙力

关键词: 多管藻,藻红蛋白,离子交换层析,疏水作用层析,凝胶电泳,等电聚焦

来源: 烟台大学学报(自然科学与工程版) 2019年03期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅱ辑,基础科学

专业: 生物学

单位: 烟台大学生命科学学院

基金: 山东省自然科学基金资助项目(ZR2018LD009),国家自然科学基金资助项目(40976083)

分类号: Q946.1

DOI: 10.13951/j.cnki.37-1213/n.2019.03.007

页码: 238-245

总页数: 8

文件大小: 753K

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