导读:本文包含了重组巴斯德毕赤酵母论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:酵母,巴斯德,腺苷,蛋氨酸,曲霉,肽酶,淀粉酶。
重组巴斯德毕赤酵母论文文献综述
于平,任倩,黄星星,王欣馨,易明花[1]（2018）在《重组巴斯德毕赤酵母发酵生产内切几丁质酶的培养条件优化》一文中研究指出探讨重组巴斯德毕赤酵母发酵生产内切几丁质酶的最适培养条件,以期获得最佳的内切几丁质酶活力。以内切几丁质酶活力为指标,通过部分因子试验设计以及响应面法优化确定重组巴斯德毕赤酵母高产内切几丁质酶的最适培养条件。部分因子试验设计筛选的影响重组巴斯德毕赤酵母高产内切几丁质酶的3个关键因子为甲醇、油酸和吐温-80。响应面法优化的上述3个关键因子的最佳浓度分别为0.71%、0.086%和0.31%。重组巴斯德毕赤酵母发酵生产内切几丁质酶的最适培养条件为:酵母膏1%、酵母氮碱(YNB)1.34%、蛋白胨2%、甲醇0.71%、油酸0.086%、吐温-80 0.31%、PTM1 0.8%、pH 6.0。在上述培养条件下,重组巴斯德毕赤酵母产内切几丁质酶的活力高达30.92U/mL。与未优化前相比,酶活力提高了1.44倍。研究结果为内切几丁质酶的产业化生产和应用奠定了良好基础。(本文来源于《菌物学报》期刊2018年11期）
廖一波,于子桐,潘力,叶燕锐[2]（2017）在《巴斯德毕赤酵母表达重组人对氧磷酶1的发酵条件优化》一文中研究指出本研究采用响应面方法优化重组人对氧磷酶1(Recombinant Human Paraoxonase 1,rhPON1)在毕赤酵母中的表达。首先通过研究甲醇浓度、p H、培养基装液量3个单因素对rhPON1表达的影响,然后以rhPON1单位体积酶活力为响应值进行响应面分析。结果显示:甲醇浓度1.42%,p H值5.91,培养基装液量9.39%是最优发酵条件。在此优化条件下,rhPON1的单位体积酶活力预测值为0.737U/mL,与验证值(0.735U/mL)基本一致。人对氧磷酶1可以水解多种有机磷化合物,被认为是一种有机磷农药中毒的解毒剂。(本文来源于《食品与发酵科技》期刊2017年03期）
于平,沈晓琴[3]（2017）在《重组巴斯德毕赤酵母发酵生产S-腺苷蛋氨酸》一文中研究指出目的:考察L-甲硫氨酸、甲醇、pH值、接种量、装液量、油酸以及PTM1 7个因子对重组巴斯德毕赤酵母发酵生产S-腺苷蛋氨酸的影响。方法:首先通过部分因子试验设计,确定影响S-腺苷蛋氨酸产量的关键因子,然后通过Box-Behnken试验设计,确定其生产S-腺苷蛋氨酸的最佳条件。结果:影响重组巴斯德毕赤酵母发酵生产S-腺苷蛋氨酸的关键因子为甲醇、pH值和装液量。当甲醇添加量1.5%,pH值5.0,装液量30 mL/500 mL时,S-腺苷蛋氨酸的产量达到最高值。优化后的最佳培养基组成为:1.00%酵母膏,2.00%蛋白胨,1.34%YNB,1.0%L-met,100 mmol/L磷酸盐缓冲液,1.40%甲醇,0.10%油酸,0.4%PTM1以及4.00×10~(-5)%生物素。在优化条件下培养84 h后,S-腺苷蛋氨酸的产量达到最高值3.23 mg/mL,是优化前的1.8倍。结论:本研究结果为S-腺苷蛋氨酸的产业化生产提供了良好基础。(本文来源于《中国食品学报》期刊2017年01期）
韩瑞祥[4]（2017）在《来自嗜热子囊菌的耐热重组木聚糖酶在巴斯德毕赤酵母中的异源表达》一文中研究指出目的通过在巴斯德毕赤酵母中异源表达进一步提高嗜热子囊菌木聚糖酶的热稳定性。方法基于巴斯德毕赤酵母的密码子使用偏倚优化原嗜热子囊菌木聚糖酶基因xyn A的基因序列。构建重组质粒p GAPZαA-xyn A、p PIC9K-xyn A,经线性化处理后电击转化入表达宿主毕赤酵母GS115中,构建重组菌株。经过含博莱霉素(zeocin)的YPD琼脂板初筛后,抽提基因组筛选阳性转化子。使用博来霉素浓度梯度YPD琼脂平板复筛转化子。采用硫酸铵沉淀、有机溶剂沉淀、离子交换柱层析、分子筛层析等方法分离、纯化重组木聚糖酶。通过SDS-PAGE凝胶电泳和酶谱实验确定重组木聚糖酶大小,利用高碘酸硝酸银染色和Endo H酶处理检测重组酶是否为糖蛋白及糖蛋白的类型。以失活的重组木聚糖酶Xyn A作对照,与重组木聚糖酶Xyn A同样在Tris-HCl缓冲液(p H8.0)中42°C处理激光打印纸72h,检测其脱墨效果。在Tris-HCl缓冲液(p H8.0)中高温(70~80°C)酶解未处理的玉米芯,温育36h后测定其糖化效果。结果密码子优化后的xyn A基因通过设计、合成,并且在巴斯德毕赤酵母中表达。筛选出在木聚糖琼脂板中形成最大水解透明圈的菌株RX8,用于摇瓶发酵,并产生40U/ml的木聚糖酶活性。S-75型葡聚糖凝胶层析纯化后的重组木聚糖酶比酶活最高,达到1053U/mg的木聚糖活性。通过SDS-PAGE凝胶电泳和酶谱实验确定重组木聚糖酶大小为75k Da。高碘酸-硝酸银染色法显示该重组木聚糖酶为糖蛋白,其表观分子量显着高于其蛋白理论值,表明该重组木聚糖酶在表达的过程中发生了高度糖基化。重组木聚糖酶Xyn A的最适反应条件为75°C和p H 8.0。该酶在100°C下保温8h仍保持高于80%的酶活性。重组木聚糖酶在Tris-HCl缓冲液(p H8.0)中42°C处理激光打印纸72h的脱墨效果(247%)高于报道的芽孢杆菌木聚糖酶CKBx1D(200%)。其在高温酶解过程(70~80°C)中对未处理的玉米芯保温36h后的糖化效率7.44%。此外,该重组木聚糖酶在较宽的p H(4.0~10.0)范围内具有较好的酸碱耐受性和稳定性。结论重组木聚糖酶Xyn A首次在毕赤酵母中实现了异源表达,其重组木聚糖酶的耐热性较原始木聚糖酶得到较大提高。较高的比酶活力和良好的热稳定性使该重组木聚糖酶具有较大的工业化应用潜力及经济价值,也为其它耐热木聚糖酶的研究奠定了理论基础。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2017-03-01）
吕晓锋[5]（2014）在《利用巴斯德毕赤酵母表达重组中国水仙凝集素的发酵工艺研究》一文中研究指出中国水仙凝集素(NTL)具有很高的药用价值,据研究发现,植物凝集素具有多种药理活性,如对真菌、哺乳动物细胞的免疫调节活性、抗HIV-1型病毒活性、抗单纯疱疹病毒和巨细胞病毒等活性。但是,受原材料来源的限制,中国水仙凝集素产量不高。而利用原核生物表达中国水仙凝集素,重组蛋白多以包涵体形式存在,无生物活性,故本课题采用毕赤酵母表达重组中国水仙凝集素。本课题前期曾采用巴斯德毕赤酵母分泌表达NTL,虽然经过分离纯化后具有一定的凝血活性,但目的蛋白的产量也不能有效的测定,此外,与天然产物相比其凝血活性无明显差别。因此,不利于进行大规模的生产。本研究首先利用Balb/C小鼠自制了中国水仙凝集素的多克隆抗体以建立高效、快速的检测发酵液中重组中国水仙凝集素ELISA法。同时,确定了抗原包被量为每孔10μg,一抗稀释比例为1：1600,二抗稀释比例为1：150的这一最佳检测条件。然后,从实验室前期构建的GS115/pPIC9K-NTL1和GS115/pPIC9K-NTL2两株菌株中筛选出表达产量高、凝血效果好的GS115/pPIC9K-NTL2菌种作为基因工程菌株。利用摇瓶实验优化了毕赤酵母表达条件,使用无机盐培养基,在菌体生长阶段摇瓶装液比例控制在10%,初始接种量为5%,最适温度为30℃,最适pH值为4.5；在菌体诱导表达阶段最适温度为28℃,最适pH值为5.0,甲醇浓度为1%。同时,对比了叁种诱导方式对目的蛋白表达量的影响,实验结果表明,双碳源交替刺激法可获得更高的目的蛋白产量和凝血活性。利用5L发酵罐进行发酵表达体系研究,基本条件选取摇瓶考察中的最适条件,研究了发酵过程中的菌体干重、甘油浓度、铵盐浓度的变化、重组中国水仙凝集素的浓度及凝血活性的变化。实验还比较了两种诱导策略在重组蛋白的表达量及凝血活性。最后,分别用中空纤维膜超滤和超滤浓缩对发酵液进行前期浓缩,倍数分别为10倍和58倍。同时,分别用分子筛层析和甘露聚糖亲和层析介质对浓缩产物进行进一步的分离纯化,获得的纯化倍数分别是13倍和30倍。最后,用Western-Blot对纯化蛋白进行了特异性鉴定,结果证实纯化产物即为重组中国水仙凝集素。(本文来源于《北京化工大学》期刊2014-05-30）
杨建花,李娓,王德正,李志敏,叶勤[6]（2013）在《表达双功能谷胱甘肽合成酶的重组巴斯德毕赤酵母的构建与鉴定》一文中研究指出通过PCR获得来自于嗜热链球菌中的双功能谷胱甘肽合成酶基因gshF,插入表达载体pGAPZA,转化巴斯德毕赤酵母GS115,成功构建了表达外源双功能谷胱甘肽合成酶基因的重组毕赤酵母。重组茵经摇瓶发酵,并在培养过程中添加前体半胱氨酸,96 h后生成的GSH是宿主茵的2.23倍。(本文来源于《工业微生物》期刊2013年05期）
张齐,李松,沈微,王正祥[7]（2013）在《重组巴斯德毕赤酵母Mut~s型与Mut~+型菌株产真菌α-淀粉酶发酵性能的比较》一文中研究指出筛选了一株产真菌α-淀粉酶重组毕赤酵母甲醇慢速利用型菌株(Mut~s)KM71/pPIC9KRoAmy,然后在摇瓶水平较系统地比较了其与本实验室先前构建的甲醇快速利用型(Mut~+)GS115/pPIC9K-RoAmy之间发酵性能的区别,包括生长阶段和产酶阶段菌体生长情况以及最适pH,不同装液量、混合碳源流加对诱导产酶的影响,最后在15 L发酵罐上进行放大试验。通过对比发现,Mut~s表现出了较好的应用潜力。(本文来源于《工业微生物》期刊2013年03期）
李宁环,仝征,沈微,陈献忠,樊游[8]（2013）在《烟曲霉脯氨酰内肽酶在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达与重组酶性质》一文中研究指出【目的】研究烟曲霉脯氨酰内肽酶cDNA基因的异源表达及重组酶性质。【方法】以烟曲霉CICIM F0044总RNA为模板,反转录合成cDNA;再以cDNA为模板,通过PCR扩增去除自身信号肽的脯氨酰内肽酶基因,构建表达载体pPIC9K-PEP;电转化酵母宿主菌Pichia pastoris GS115,获得重组菌PEP-09;纯化并分析重组酶性质。【结果】重组菌摇瓶发酵酶活力最高可达647.3 U/L。表达产物纯化后的分子量为63 kD左右。重组酶最适反应温度为65°C,有较好的温度稳定性,在55°C保温8 h能保留90%以上的酶活力。该酶最适pH为5.5,在pH 3.0 9.0范围内有很好稳定性,在pH 6.0 8.0的缓冲液中37°C保温10 d酶活没有明显变化。【结论】烟曲霉脯氨酰内肽酶cDNA基因在巴斯德毕赤酵母中实现了分泌表达,重组酶活性稳定,有一定的应用潜力。(本文来源于《微生物学通报》期刊2013年03期）
刘俊丽,宋淑军,司少艳,吴继功,周学慧[9]（2012）在《巴斯德毕赤酵母菌株分泌表达的重组骨保护素融合蛋白生物学活性的研究》一文中研究指出目的探讨巴斯德毕赤酵母菌株分泌表达的重组骨保护素融合蛋白(recombiant humanosteoprogerin-human serum album,rhOPG-HSA)对破骨细胞的抑制效应。方法利用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)以及破骨细胞分化因子(receptor activator ofnuclear factor-kβligand,RANKL)诱导骨髓单核细胞Raw264.7分化为破骨细胞,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色和甲苯胺蓝染色法鉴定rhOPG-HSA抑制破骨细胞及其骨吸收能力。结果 rhOPG-HSA组与阴性对照组相比,Raw264.7细胞诱导3d,4d,5d后,TRAP阳性染色的破骨细胞明显减少;Raw264.7细胞与骨薄片共培养诱导10d后,骨吸收陷窝明显减少。结论 rhOPG-HSA能够抑制破骨细胞的分化及骨吸收。(本文来源于《中国骨质疏松杂志》期刊2012年02期）
沈晓琴[10]（2011）在《利用重组巴斯德毕赤酵母高效生产S—腺苷蛋氨酸的研究》一文中研究指出S腺苷蛋氨酸,又名S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,简称SAM)。它是一种广泛存在于植物、动物、微生物体内的重要生理活性物质,具有转甲基、转硫基、转氨丙基等作用,参与了40多种生化反应,紧密联系着蛋白质、核酸、神经递质、磷脂质以及维生素的合成,而且还与多胺和谷胱甘肽的转化密切相关。研究表明,S-腺苷蛋氨酸对肝病、抑郁症、关节炎、纤维性肌痛、偏头痛等疾病具有治疗作用。此外,SAM还可以治疗阿尔茨海默氏症、癫痫、帕金森氏病、亚急性脊髓变性以及HIV引起的神经性并发症等。基于SAM的重要生理功能和广泛应用,研究大规模高产量制备SAM的关键工程技术成为迫切需要解决的问题。目前,SAM的生产制备方法主要有化学合成法、酶促转化法、发酵法和全细胞催化法四种。利用重组酵母细胞在培养基中加入前体L-甲硫氨酸进行发酵是目前工业规模生产SAM的主要方法。本研究首先通过在巴斯德毕赤酵母GS115中导入SAM合成酶基因sam2以及敲除胱硫醚合成酶基因cbs这两条途径,对菌株进行改造,共得到GS115、ZJGSU1、ZJGSU2和ZJGSU3四种菌株。通过高效液相色谱分析,其摇瓶产量分别达到了0.010g/L、0.804g/L、0.131g/L、1.152g/L,为大量制备SAM奠定重要基础。在摇瓶水平上考察了L-甲硫氨酸、甲醇、pH值、接种量、装液量、油酸以及PTM1这7个因素对高产菌株ZJGSU3中SAM产量的影响。在此基础上通过2-level Factorial实验设计,确定影响SAM产量的关键因子为甲醇、pH值和装液量。选取这叁个因子进行Box-Behnken实验设计,确定其产SAM的最佳条件。结果表明：当甲醇添加量为1.5%,pH为5.0,装瓶量为30mL/500mL时,SAM产量可达到最高值。采用Design-expert7.0软件进行设计和分析后,得到最佳诱导培养基配方为：1.00%酵母膏,2.00%蛋白胨,1.34%YNB,1.0%L-met,100mM磷酸盐缓冲液,1.40%甲醇,0.10%油酸,0.4%PTM1以及4.00×105%生物素；最佳培养条件为：pH5.0,接种量5%,装瓶量30mL/500mL。在此培养条件下培养84h后,SAM产量达到最高值3.23g/L,对比优化前的1.15g/L,增加了1.8倍；与原始菌相比,其产量增加了300多倍。最后,对重组高产菌株ZJGSU3进行上罐扩大培养。通过重组菌ZJGSU35L发酵罐四个阶段(预培养、甘油流加、碳源饥饿、甲醇诱导)的高密度培养,研究了发酵生产SAM的过程,确定了其发酵工艺。诱导96h后达到最高值,整个发酵周期为120个小时。SAM终产量达到了4.37g/L,生物量达到了247g/L,发酵时间延长了24个小时,已达到工业化生产水平。(本文来源于《浙江工商大学》期刊2011-12-01）
重组巴斯德毕赤酵母论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本研究采用响应面方法优化重组人对氧磷酶1(Recombinant Human Paraoxonase 1,rhPON1)在毕赤酵母中的表达。首先通过研究甲醇浓度、p H、培养基装液量3个单因素对rhPON1表达的影响,然后以rhPON1单位体积酶活力为响应值进行响应面分析。结果显示:甲醇浓度1.42%,p H值5.91,培养基装液量9.39%是最优发酵条件。在此优化条件下,rhPON1的单位体积酶活力预测值为0.737U/mL,与验证值(0.735U/mL)基本一致。人对氧磷酶1可以水解多种有机磷化合物,被认为是一种有机磷农药中毒的解毒剂。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
重组巴斯德毕赤酵母论文参考文献
[1].于平,任倩,黄星星,王欣馨,易明花.重组巴斯德毕赤酵母发酵生产内切几丁质酶的培养条件优化[J].菌物学报.2018
[2].廖一波,于子桐,潘力,叶燕锐.巴斯德毕赤酵母表达重组人对氧磷酶1的发酵条件优化[J].食品与发酵科技.2017
[3].于平,沈晓琴.重组巴斯德毕赤酵母发酵生产S-腺苷蛋氨酸[J].中国食品学报.2017
[4].韩瑞祥.来自嗜热子囊菌的耐热重组木聚糖酶在巴斯德毕赤酵母中的异源表达[D].安徽医科大学.2017
[5].吕晓锋.利用巴斯德毕赤酵母表达重组中国水仙凝集素的发酵工艺研究[D].北京化工大学.2014
[6].杨建花,李娓,王德正,李志敏,叶勤.表达双功能谷胱甘肽合成酶的重组巴斯德毕赤酵母的构建与鉴定[J].工业微生物.2013
[7].张齐,李松,沈微,王正祥.重组巴斯德毕赤酵母Mut~s型与Mut~+型菌株产真菌α-淀粉酶发酵性能的比较[J].工业微生物.2013
[8].李宁环,仝征,沈微,陈献忠,樊游.烟曲霉脯氨酰内肽酶在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达与重组酶性质[J].微生物学通报.2013
[9].刘俊丽,宋淑军,司少艳,吴继功,周学慧.巴斯德毕赤酵母菌株分泌表达的重组骨保护素融合蛋白生物学活性的研究[J].中国骨质疏松杂志.2012
[10].沈晓琴.利用重组巴斯德毕赤酵母高效生产S—腺苷蛋氨酸的研究[D].浙江工商大学.2011
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