白桦BpZFP4基因启动子克隆和逆境响应元件功能分析

白桦BpZFP4基因启动子克隆和逆境响应元件功能分析

论文摘要

前期研究发现白桦锌指蛋白Bp ZFP4基因响应多种非生物逆境胁迫。为了深入研究其调控机制,本研究利用染色体步移技术克隆了该基因上游1 360 bp的启动子区域,序列分析结果表明该区域含有多个逆境响应顺式作用元件、激素响应元件、光响应以及病原菌和损伤响应元件等。在此基础上,构建了Bp ZFP4启动子5’-端一系列缺失片段融合GUS报告基因的表达载体。通过对系列缺失突变体在正常条件以及渗透胁迫、盐胁迫和脱落酸(ABA)处理条件下的GUS基因表达分析,鉴定得到Bp ZFP4启动子对干旱、盐和ABA应答响应的主要调节区域及可能的顺式作用元件。本研究结果为进一步探究Bp ZFP4基因应答非生物胁迫和信号分子刺激的调控机理提供了重要的理论依据。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验材料
  •   1.2 白桦Bp ZFP4基因启动子的克隆
  •   1.3 BpZFP4基因启动子顺式作用元件预测
  •   1.4 Bp ZFP4基因启动子5'-缺失片段融合GUS基因的植物表达载体构建
  •   1.5 农杆菌介导的烟草瞬时转化
  •   1.6 非生物胁迫处理烟草叶盘的GUS组织化学染色分析
  •   1.7 非生物胁迫处理烟草叶盘的GUS活性定量分析
  •   1.8 数据处理
  • 2 结果与分析
  •   2.1 白桦Bp ZFP4基因启动子的克隆
  •   2.2 BpZFP4基因启动子顺式作用元件预测分析
  •   2.3 BpZFP4启动子元件缺失突变分析
  •   2.4 Bp ZFP4启动子5'-缺失片段的表达载体构建
  •   2.5 BpZFP4启动子不同缺失片段对非生物胁迫和激素胁迫响应分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 秦琳琳,张曦,姜骋,李莉

    关键词: 白桦,启动子,顺式作用元件,功能分析,非生物胁迫

    来源: 植物研究 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,林业

    单位: 林木遗传育种国家重点实验室东北林业大学

    基金: 国家自然科学基金(31470676)~~

    分类号: Q943.2;S792.153

    页码: 917-926

    总页数: 10

    文件大小: 2098K

    下载量: 250

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