外层致密纤维在Akap4基因缺陷致小鼠精子尾部多种形态异常中的作用

论文摘要

目的:探讨外层致密纤维（outer dense fobres,ODF）在Akap4基因缺陷引起小鼠精子尾部多种形态异常中的作用。方法:通过基因编辑技术构建Akap4基因缺陷小鼠模型。实验分为2组:成年Akap4基因缺陷雄鼠为实验组（n=7）,成年野生型雄鼠为对照组（n=7）,比较2组小鼠的体重和睾丸重量;采用计算机辅助精液分析（computer aided sperm analysis,CASA）检测精子活动力,改良巴氏染色（modified pap staining）检测精子形态学,扫描及透射电镜观察精子超微结构,免疫荧光检测精子尾部蛋白表达及定位,睾丸切片HE及PAS染色检测睾丸生精功能,透射电镜观察曲精细管超微结构。结果:Akap4基因缺陷小鼠精子总活动力为8.81%,明显低于野生型小鼠（P<0.01）,且无正常形态精子,尾部缩短与尾部卷曲比例达91.18%,明显高于野生型小鼠（P<0.01）,睾丸重量、睾丸生精功能、精子数量2组比较差异无统计学意义（P>0.01）;Akap4基因缺陷精子的纤维鞘纵柱缺失,横肋柱结构部分残留,主段的3和8号ODF排列紊乱,与ODF2蛋白定位结果相符;睾丸中精子纤维鞘发育障碍,无正常纤维鞘结构形成,但未见异常膨大的精子尾部。结论:Akap4基因缺陷使纤维鞘横肋发育不良,纵肋的缺失引起3和8号ODF分离,"9+2"微管结构紊乱,使主段管腔异常膨大,导致小鼠精子尾部多种形态异常。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 动物
•   1.2 仪器和试剂
•   1.3 方法
•     1.3.1 Akap4基因缺陷小鼠的构建
•     1.3.2 Akap4基因缺陷雄性小鼠基因型鉴定
•     1.3.3 小鼠精子活动力检测
•     1.3.4 改良巴氏染色法检测精子形态
•     1.3.5 免疫荧光检测
•     1.3.6 HE和PAS染色
•     1.3.7 电镜包埋块的制作
•     1.3.8 扫描电镜样品制备
•   1.4 统计学处理
• 2 结 果
•   2.1 Akap4基因缺陷小鼠精子活力
•   2.2 小鼠精子形态学分析
•   2.3 小鼠睾丸超微结构分析
• 3 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 黄凌龙,黄鹏

关键词: 外层致密纤维,精子尾部多种形态异常,雄性不育,纤维鞘

来源: 中南大学学报(医学版) 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 基础医学,泌尿科学

单位: 南方医科大学珠江医院泌尿外科

分类号: R698.2;R-332

页码: 1367-1375

总页数: 9

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