牛乳源金黄色葡萄球菌EsxB蛋白的表达及免疫效应分析

论文摘要

为分析牛乳源金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）EsxB蛋白的免疫特性,扩增EsxB基因并构建了pET-28a-EsxB重组质粒,转化后的重组菌经诱导表达后用SDS-PAGE和Western blotting检测重组蛋白;以纯化的EsxB蛋白免疫小鼠,检测其抗体水平、滴度及亚型、测定攻击保护率和观察小鼠肺、肾病理组织学变化。结果显示,成功纯化了EsxB蛋白,且该蛋白具有良好的抗体反应特性。免疫小鼠的血清抗体水平与对照组相比显著升高;抗体滴度可达1∶24 300,抗体亚型以IgG1和IgG2b为主,免疫小鼠的攻击保护率可达75%;且免疫后降低了S.aureus攻击对小鼠肺脏及肾脏的病理损伤。重组EsxB蛋白具有良好的免疫原性和保护效果。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 菌株及质粒
•   1.2 主要试剂
•   1.3 实验动物
•   1.4 EsxB基因的扩增及重组表达质粒的构建
•   1.5 重组蛋白EsxB的诱导表达及纯化
•   1.6 重组蛋白EsxB的Western Blotting检测
•   1.7 小鼠免疫试验
•   1.8 免疫小鼠抗体水平的检测
•   1.9 小鼠攻击保护力试验
•   1.10 病理组织学观察
• 2 结果与分析
•   2.1 EsxB基因PCR扩增
•   2.2 重组质粒pET-28a-EsxB双酶切鉴定
•   2.3 重组蛋白EsxB的表达及纯化
•   2.4 重组蛋白EsxB的Western blotting分析
•   2.5 重组蛋白免疫后IgG抗体水平与滴度检测
•   2.6 重组蛋白免疫后抗体亚型的检测
•   2.7 免疫后的攻击保护力检测
•   2.8 病理组织学观察
• 3 讨 论
• 4 结 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张雪静,易鸳鸯,杨志荣,马晓慧,苏艳

关键词: 牛源金黄色葡萄球菌,蛋白,表达与纯化,免疫效应

来源: 新疆农业大学学报 2019年01期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 新疆农业大学动物医学学院

基金: 新疆维吾尔自治区高校科研计划项目(XJEDU2018I009)

分类号: S852.611

页码: 53-58

总页数: 6

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