沙门氏菌可视化环介导等温扩增检测方法的建立及初步应用

论文摘要

运用环介导恒温扩增技术（LAMP）建立基于颜色变化判定的快速、高效、灵敏、特异性高的沙门氏菌检测方法。根据沙门氏菌特异性靶基因肠毒素stn基因设计4条LAMP引物,应用DNA聚合酶链置换活性和羟基萘酚蓝（HNB）在LAMP反应中的颜色变化特征,建立可视化LAMP检测方法,并对原料乳中的沙门氏菌进行检测。结果表明:建立的LAMP方法仅需30 min即可得到准确结果,可视化LAMP方法对3株沙门氏菌和8株非沙门氏菌检测表现出良好的特异性;基因组灵敏度可以达到1.55×10—8ng/μL。研究建立的可视化LAMP反应为检测原料乳中的沙门氏菌提供了一种新的技术。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•     1.1.1 实验菌株
•     1.1.2培养基与试剂
•   1.2 方法
•     1.2.1 引物和扩增位点
•     1.2.2 原料乳的处理及基因组提取方法
•     1.2.3 LAMP反应的建立及优化
•     1.2.4 LAMP反应可视化方法的建立及优化
•     1.2.5 LAMP方法的特异性检测
•     1.2.6 LAMP方法的灵敏度检测
•     1.2.7 加标回收检测
•     1.2.8 实际样品检测
• 2 结果与分析
•   2.1 LAMP体系建立与优化
•   2.2 LAMP与PCR之间灵敏度比较
•   2.3 可视化LAMP检测方法的建立
•   2.4 特异性实验
•   2.5 加标样品检测
•   2.6 实际样品检测
• 3 讨论与结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 关玉婷,刘东,常江,孙宇,胡盼,李岩松,柳增善,孟宪梅

关键词: 环介导恒温扩增技术,沙门氏菌,原料乳,可视化,检测方法

来源: 食品科技 2019年11期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 吉林大学人兽共患病研究所,吉林工商学院

基金: 国家重点研发计划项目(2018YFD0500504),吉林省重点科技攻关项目(20170204021SF)

分类号: TS207.4

DOI: 10.13684/j.cnki.spkj.2019.11.062

页码: 357-361

总页数: 5

文件大小: 3839K

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