IgG1型单克隆抗体对照品的一级结构解析

论文摘要

对单克隆抗体药物对照品（IgG1型）进行了全面的结构表征。采用Exactive plus EMR质谱测定了去N糖前后抗体的精确分子量,并通过计算N糖含量得出其完整分子量为148 285.0～149 020.8,完整去糖后分子量为145 810.4,N糖含量为1.67%～2.15%。优化了全柱成像实时等电聚焦毛细管电泳（WCID-cIEF）检测方法,结果显示该抗体等电点分布在8.21～8.74之间,其中主成分等电点为8.61,相对含量为61.43%。继而使用离子交换色谱检测了电荷异质性,发现碱性峰含量为4.1%,酸性峰含量为23.9%,主峰含量为72.0%,与WCID-cIEF结果吻合,并证明了方法间良好的重现性。通过切糖前后的肽图分析,获得糖肽分布信息,识别出糖修饰位点及重轻链的互补决定区（CDR）,甲硫氨酸（M）的氧化位点及氧化率,并通过抗体还原前后的肽图解析出二硫键连接。研究结果同时提示该抗体对照品无C末端糖化修饰现象。

论文目录

• 1 实验部分
•   1.1 仪器与试剂
•   1.2 mAb的分子量分析
•   1.3 电荷异质性分析
•   1.4 肽图分析
• 2 结果与讨论
•   2.1 完整分子量分析
•   2.2 还原分子量解析
•   2.3 电荷异质性结果
•   2.4 肽图结果
• 3 结 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 崔新玲,胡志上,孟晓光,钱小红,朱涛,应万涛

关键词: 抗体对照品,分子量,等电点,电荷异质性,肽图

来源: 分析测试学报 2019年08期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,医药卫生科技

专业: 化学,药学

单位: 天津科技大学生物工程学院,军事科学院军事医学研究院生命组学研究所蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心（北京）,中国计量科学研究院,北京正旦国际科技有限责任公司,天津康希诺生物股份有限公司

基金: 国家重点研发计划(2017YFF0205400,2016YFA0501300),国家自然基金重点项目(81530021),创新基金课题(BWS14J052,16CXZ027)

分类号: R927.1;O657

页码: 939-945

总页数: 7

文件大小: 1494K

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