氯倍他索促进鼻粘膜间充质干细胞成神经样细胞分化

氯倍他索促进鼻粘膜间充质干细胞成神经样细胞分化

论文摘要

目的:研究氯倍他索(Clo)对鼻粘膜外胚层间充质干细胞(EMSCs)向神经样细胞分化的影响。方法:贴壁筛选法分离培养EMSCs,免疫荧光法鉴定体外扩增的EMSCs;MTT法检测Clo对EMSCs增殖能力的影响;成神经样细胞诱导实验分为Clo组、音猬因子(SHH)组和空白对照组,采用全反式维甲酸(ATRA)诱导各组细胞向神经样细胞分化;倒置显微镜观察细胞形态的变化;免疫荧光和免疫印迹方法检测神经元细胞相关蛋白。结果:体外分离培养的EMSCs高表达间充质干细胞和神经嵴源干细胞标志物Vimentin和Nestin。各组EMSCs成神经样细胞诱导7 d后,Clo组和SHH组EMSCs呈现双极和多极的典型神经样细胞形态并且高表达神经元细胞相关蛋白。Clo组EMSCs表达SHH和SMO的水平明显高于空白对照组,与SHH组比较差异无统计学意义(P>0.05);Clo可促进EMSCs分泌内源性脑神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)。结论:Clo可通过激活SHH信号通路和上调内源性神经营养因子水平促进EMSCs向神经样细胞分化。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 实验动物
  •     1.1.2 主要试剂和材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 鼻粘膜EMSCs的分离、原代培养及传代
  •     1.2.2 EMSCs表面标志鉴定
  •     1.2.3 MTT实验
  •     1.2.4 EMSCs向神经样细胞分化的诱导方法
  •     1.2.5 成神经样细胞诱导分化
  •     1.2.6 Clo作用EMSCs实验
  •   1.3 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 EMSCs的鉴定
  •   2.2 MTT实验结果
  •   2.3 免疫荧光结果
  •   2.4 Western-blot结果
  •   2.5 Clo促进EMSCs表达神经营养因子
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 史文涛,戴瑶,毕士奇,陆浩,吕德民,张志坚

    关键词: 鼻粘膜外胚层间充质干细胞,氯倍他索,神经样细胞,音猬因子

    来源: 神经损伤与功能重建 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 南京市高淳人民医院骨科,江苏大学医学院组织学与胚胎学教研室

    基金: 国家自然科学基金地区科学基金(No.81571830),镇江市科技局发展项目(No.SH2008044)

    分类号: R329.2

    DOI: 10.16780/j.cnki.sjssgncj.2019.01.001

    页码: 1-5

    总页数: 5

    文件大小: 2408K

    下载量: 61

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