大肠杆菌过量表达论文_刘大丽,马龙彪,鲁振强

导读:本文包含了大肠杆菌过量表达论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:大肠杆菌,丙酮酸,磷酸,激酶,烟酸,丁二酸,蛋白。

大肠杆菌过量表达论文文献综述

刘大丽,马龙彪,鲁振强^[1]（2018）在《过量表达OsCATb提高大肠杆菌对不同重金属逆境胁迫的耐受性》一文中研究指出为了进一步研究水稻Catalase b (OsCATb)在重金属逆境胁迫下的作用机制,笔者将外源表达重组质粒pGEX-6p-3-OsCATb转化到大肠杆菌BL21中。SDS-PAGE表明,通过IPTG的诱导表达,在53 k Da的位置获得了与推测分子量大小相一致的可溶性目的蛋白。在1 mmol/L Cd、Zn和Cu的重金属逆境胁迫下,过量表达GST-OsCATb的重组菌表现出优于对照菌株(BL21)以及过量表达标签蛋白GST的空载体菌株的耐受性;同时,目的基因重组菌体内的过氧化氢酶活性也要远高于实验对照组。研究结果也进一步暗示了水稻OsCATb作为重要的抗氧化剂,能够参与到细胞的重金属逆境胁迫应答、解毒和耐受机制过程中。(本文来源于《中国农学通报》期刊2018年34期）

卢潇,杨海泉,沈微,许菲^[2]（2018）在《DacD过量表达对大肠杆菌胞外蛋白生产的影响》一文中研究指出大肠杆菌(Escherichia coli)是广泛用于重组蛋白表达的宿主之一,但缺乏高效的蛋白胞外分泌机制,为提高其胞外蛋白生产水平,分析D,D-羧肽酶DacD过量表达对E. coli胞外蛋白生产水平的影响.结果表明,与对照株相比,过量表达DacD时重组E. coli BL21(DE3)的重组绿色荧光蛋白(GFP)的胞外生产水平提高了1.6倍.同时,当过量表达DacD时,E. coli BL21的重组淀粉酶胞外生产水平较对照株提高了2.6倍.进一步研究发现,DacD的过量表达可促进E.coli BL21细胞内可溶性肽聚糖的积累.过量表达DacD也增强了E. coli BL21细胞内膜的通透性. DacD过量表达导致了E.coli BL21细胞形态的变化,重组菌株细胞两端形成了透明的球状囊泡结构.因此,通过过量DacD提高E. coli胞外蛋白生产水平是可行的.(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2018年05期）

Cimini,D,许俊^[3]（2014）在《IS2介导大肠杆菌K4过量表达kfoC提高类软骨素荚膜多糖产量》一文中研究指出转座子是一种可移动的遗传因子,其特征是在两个重复插入序列中有一个或多个编码框编码的特异性转座酶,可使这些序列转移到其他DNA位点。本研究对大肠杆菌K4的IS2转座子进行体外修饰,以编码软骨素聚合酶基因kfoC替代编码转座酶的序列。KfoC与细菌荚膜多糖的聚合作用有关,其结构与硫酸软骨素相似。利用大肠杆菌染色体上IS2内源性拷贝上的(本文来源于《中国医药工业杂志》期刊2014年08期）

罗璇,许丽媛,王永泽,赵锦芳,赵筱^[4]（2014）在《乳酸片球菌L-乳酸脱氢酶基因的克隆及在重组大肠杆菌JH12中的过量表达》一文中研究指出以工程菌Escherichia coli SZ85基因组为模板,克隆得到乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)的L-乳酸脱氢酶基因(ldhL),连接到pUcm-T载体后,双酶切然后将其连接到表达载体pET-28a上,重组质粒经筛选后转入染色体上含有ldhL基因(来源P.acidilactici)的工程菌Escherichia coli JH12。P.acidilactici的ldhL基因过量表达体系E.coli JH12(pET-28a-ldhL)能利用浓度7%的木糖为碳源进行厌氧发酵,过量表达ldhL使L-乳酸产量提高了10 g/L,达64.86 g/L,糖酸转化率高达96%。(本文来源于《生物技术通报》期刊2014年04期）

屈更思,郭谦,方芳,堵国成,陈坚^[5]（2013）在《过量表达蛋氨酸合成途径基因对重组大肠杆菌产蛋氨酸的影响》一文中研究指出微生物发酵法生产蛋氨酸具有原料价格便宜,环境污染小,产物纯度高等诸多优点。本研究通过使用双T_7启动子质粒,在大肠杆菌BL21中同时过量表达蛋氨酸代谢途径中metA、metB、metC叁个基因与编码转运蛋氨酸蛋白基因yeaS,促进了蛋氨酸在胞内的积累和其向胞外的运输。通过代谢工程改造大肠杆菌蛋氨酸合成途径,蛋氨酸产量达到0.34 g/L。(本文来源于《工业微生物》期刊2013年05期）

苟冬梅,梁丽亚,刘嵘明,张常青,吴明科^[6]（2012）在《过量表达烟酸单核苷酸腺苷酰转移酶对大肠杆菌NZN111产丁二酸的影响》一文中研究指出大肠杆菌NZN111是敲除了乳酸脱氢酶的编码基因(ldhA)和丙酮酸-甲酸裂解酶的编码基因(pflB)的发酵生产丁二酸的潜力菌株。厌氧条件下NADH不能及时再生为NAD+,引起胞内辅酶NAD(H)的不平衡,最终导致厌氧条件下菌株不能利用葡萄糖生长代谢。nadD为催化NAD(H)合成途径中烟酸单核苷酸(NaMN)生成烟酸腺嘌呤二核苷酸(NaAD)的烟酸单核苷酸腺苷酰转移酶(Nicotinic acid mononucleotide adenylyltransferase,NAMNAT)的编码基因,通过过量表达nadD基因能够提高NAD(H)总量与维持合适的NADH/NAD+比例。文中构建了重组菌E.coli NZN111/pTrc99a-nadD,在厌氧摇瓶发酵过程中通过添加终浓度为1.0 mmol/L的IPTG诱导表达,重组菌E.coli NZN111/pTrc99a-nadD中NAD+和NADH的浓度分别比宿主菌E.coli NZN111提高了3.21倍和1.67倍,NAD(H)总量提高了2.63倍,NADH/NAD+从0.64降低为0.41,使重组菌株恢复了厌氧条件下生长和代谢葡萄糖的能力。重组菌与对照菌相比,72 h内可以消耗14.0 g/L的葡萄糖产6.23 g/L的丁二酸,丁二酸产量增加了19倍。(本文来源于《生物工程学报》期刊2012年09期）

刘嵘明,马江锋,梁丽亚,徐冰,王光明^[7]（2011）在《过量表达烟酸转磷酸核糖激酶对大肠杆菌NZN111产丁二酸的影响》一文中研究指出大肠杆菌NZN111厌氧发酵的主要产物为丁二酸,是发酵生产丁二酸的潜力菌株。但是由于敲除了乳酸脱氢酶的编码基因(ldhA)和丙酮酸甲酸裂解酶的编码基因(pflB),导致辅酶NADH/NAD+不平衡,厌氧条件下不能利用葡萄糖生长代谢。构建烟酸转磷酸核糖激酶的重组菌Escherichia coli NZN111/pTrc99a-pncB,在厌氧摇瓶发酵过程中通过添加0.5 mmol/L的烟酸、0.3 mmol/L的IPTG诱导后重组菌的烟酸转磷酸核糖激酶(Nicotinic acid phosphoribosyl transferase)酶活较出发菌株提高了11倍,辅酶NAD(H)的总量提高了3.85倍,特别是NAD+的浓度提高了5.17倍,NADH/NAD+的比例从0.640下降到0.125,使重组菌株在厌氧条件下具有生长和代谢葡萄糖的能力。(本文来源于《生物工程学报》期刊2011年10期）

梁丽亚,马江锋,刘嵘明,王光明,徐冰^[8]（2011）在《过量表达苹果酸脱氢酶对大肠杆菌NZN111产丁二酸的影响》一文中研究指出大肠杆菌NZN111是敲除了乳酸脱氢酶的编码基因(ldhA)和丙酮酸-甲酸裂解酶的编码基因(pflB)的工程菌,厌氧条件下由于辅酶NAD(H)的不平衡导致其丧失了代谢葡萄糖的能力。构建了苹果酸脱氢酶的重组菌大肠杆菌NZN111/pTrc99a-mdh,在厌氧摇瓶发酵过程中通过0.3 mmol/L的IPTG诱导后重组菌的苹果酸脱氢酶(Malate dehydrogenase,MDH)酶活较出发菌株提高了14.8倍,NADH/NAD+的比例从0.64下降到0.26,同时NAD+和NADH浓度分别提高了1.5倍和0.2倍,厌氧条件下重组菌株具有生长和代谢葡萄糖的能力。采取两阶段发酵,有氧培养至细胞干重6.4 g/L,转厌氧后15 h,葡萄糖消耗14.75 g/L,丁二酸浓度达到15.18 g/L,丁二酸的得率为1.03 g/g葡萄糖,丁二酸的生产强度为1.012 g/(L.h)。(本文来源于《生物工程学报》期刊2011年07期）

刘瑞玲,刘美芹,史军娜,陈玉珍,卢存福^[9]（2010）在《过量表达沙冬青巯基蛋白酶抑制剂基因AmPI提高大肠杆菌低温与热胁迫抗性》一文中研究指出沙冬青是我国北方内蒙古荒漠地区特有的常绿阔叶灌木,具有很强的抗低温、干旱、盐碱能力,是重要的抗逆基因资源植物.将从低温诱导的沙冬青幼苗中克隆获得的巯基蛋白酶抑制剂基因AmPI亚克隆后构建到原核表达载体pTWIN1上,得到重组表达载体pT-PI,双酶切及测序结果证明pT-PI已经构建成功.将pT-PI转入大肠杆菌ER2566中,经异丙基β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,SDS-PAGE电泳检测发现有Mr35×103的目的融合蛋白表达,与预测结果一致,其中以在37℃诱导3～4h条件下表达量最高,表明目的基因AmPI在大肠杆菌中得到了成功表达.分别测定了低温(0℃)和热胁迫(50℃)条件下AmPI宿主菌的生存能力,结果表明AmPI的表达能提高宿主菌的存活率,可能是AmPI对细胞具有保护功能.(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2010年03期）

于丽,姜岷,马江锋,岳方方,刘树文^[10]（2010）在《过量表达Bacillus subtilis磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶对大肠杆菌产琥珀酸的影响》一文中研究指出在大肠杆菌厌氧混合酸发酵途径中,磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PPC)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶(PCK)皆可催化由磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)到草酰乙酸(OAA)的反应。鉴于经由PCK催化的反应伴有ATP的生成,理论上更有利于菌体生长和产酸,本研究以大肠杆菌W3110(△pfl,△ldh)为出发菌株,利用λ-Red同源重组系统构建了其ppc缺陷菌株并在此基础上过量表达了Bacillus subtilispck基因。初步的厌氧发酵实验表明:过量表达pck可在一定程度上恢复初始菌株厌氧代谢葡萄糖的能力。其中又以ppc缺陷株更为明显,其耗糖能力和产酸能力分别为对照菌株的4.2和15.3倍。(本文来源于《微生物学通报》期刊2010年03期）

大肠杆菌过量表达论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

大肠杆菌(Escherichia coli)是广泛用于重组蛋白表达的宿主之一,但缺乏高效的蛋白胞外分泌机制,为提高其胞外蛋白生产水平,分析D,D-羧肽酶DacD过量表达对E. coli胞外蛋白生产水平的影响.结果表明,与对照株相比,过量表达DacD时重组E. coli BL21(DE3)的重组绿色荧光蛋白(GFP)的胞外生产水平提高了1.6倍.同时,当过量表达DacD时,E. coli BL21的重组淀粉酶胞外生产水平较对照株提高了2.6倍.进一步研究发现,DacD的过量表达可促进E.coli BL21细胞内可溶性肽聚糖的积累.过量表达DacD也增强了E. coli BL21细胞内膜的通透性. DacD过量表达导致了E.coli BL21细胞形态的变化,重组菌株细胞两端形成了透明的球状囊泡结构.因此,通过过量DacD提高E. coli胞外蛋白生产水平是可行的.

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

大肠杆菌过量表达论文参考文献

[1].刘大丽,马龙彪,鲁振强.过量表达OsCATb提高大肠杆菌对不同重金属逆境胁迫的耐受性[J].中国农学通报.2018

[2].卢潇,杨海泉,沈微,许菲.DacD过量表达对大肠杆菌胞外蛋白生产的影响[J].应用与环境生物学报.2018

[3].Cimini,D,许俊.IS2介导大肠杆菌K4过量表达kfoC提高类软骨素荚膜多糖产量[J].中国医药工业杂志.2014

[4].罗璇,许丽媛,王永泽,赵锦芳,赵筱.乳酸片球菌L-乳酸脱氢酶基因的克隆及在重组大肠杆菌JH12中的过量表达[J].生物技术通报.2014

[5].屈更思,郭谦,方芳,堵国成,陈坚.过量表达蛋氨酸合成途径基因对重组大肠杆菌产蛋氨酸的影响[J].工业微生物.2013

[6].苟冬梅,梁丽亚,刘嵘明,张常青,吴明科.过量表达烟酸单核苷酸腺苷酰转移酶对大肠杆菌NZN111产丁二酸的影响[J].生物工程学报.2012

[7].刘嵘明,马江锋,梁丽亚,徐冰,王光明.过量表达烟酸转磷酸核糖激酶对大肠杆菌NZN111产丁二酸的影响[J].生物工程学报.2011

[8].梁丽亚,马江锋,刘嵘明,王光明,徐冰.过量表达苹果酸脱氢酶对大肠杆菌NZN111产丁二酸的影响[J].生物工程学报.2011

[9].刘瑞玲,刘美芹,史军娜,陈玉珍,卢存福.过量表达沙冬青巯基蛋白酶抑制剂基因AmPI提高大肠杆菌低温与热胁迫抗性[J].应用与环境生物学报.2010

[10].于丽,姜岷,马江锋,岳方方,刘树文.过量表达Bacillussubtilis磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶对大肠杆菌产琥珀酸的影响[J].微生物学通报.2010

论文知识图

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