枯草芽孢杆菌MX-6产纳豆激酶特性分析

论文摘要

分离鉴定溶栓酶高产菌株,对其所产溶栓酶的类型、相对分子质量及发酵曲线进行特性分析。从中国豆豉中分离一株纤溶酶高产菌株MX-6,经个体形态、菌落形态及16S r DNA基因同源性比对,确定该菌株为枯草芽孢杆菌。应用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）克隆到1 473 bp的纤溶酶编码基因apr N,根据推测氨基酸序列与同源序列的多序列比对及系统进化树结果显示该纤溶酶为纳豆激酶。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（SDS-polyacrylamide gels electrophoresis,SDS-PAGE）确定枯草芽孢杆菌MX-6所产纳豆激酶的相对分子质量约28 ku,与预测的相对分子质量27 712. 72 u相吻合。枯草芽孢杆菌MX-6所产纳豆激酶的发酵曲线结果显示在72 h达到纳豆激酶最大合成量,在纤维蛋白平板上的溶圈直径高达21. 60 mm。为更好地实现纳豆激酶的开发及应用提供一定的理论依据和方法参考。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 供试样品及模式菌株
•     1.1.2 试剂与培养基
•     1.1.3 仪器与设备
•   1.2 方法
•     1.2.1 培养及发酵方法
•     1.2.2 纳豆激酶活力的测定
•     1.2.3 纳豆激酶高产菌株的筛选及鉴定
•       1.2.3. 1 菌种的分离及筛选
•       1.2.3. 2 纳豆激酶高产菌株的鉴定
•     1.2.4 纳豆激酶编码基因aprN的克隆
•     1.2.5 纳豆激酶的分子质量测定
•     1.2.6 枯草芽孢杆菌MX-6产纳豆激酶的发酵曲线
•     1.2.7 数据分析
• 2 结果与分析
•   2.1 菌株的筛选与鉴定
•     2.1.1 菌株的分离及筛选
•     2.1.2 菌落形态及菌体形态鉴定
•     2.1.3 生理生化鉴定
•     2.1.4 菌株的16S r DNA基因序列分析
•   2.2 纳豆激酶编码基因aprN的克隆及序列分析
•   2.3 纳豆激酶的相对分子质量测定
•   2.4 枯草芽孢杆菌MX-6产纳豆激酶的发酵曲线
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 满丽莉,向殿军

关键词: 纳豆激酶,筛选鉴定,枯草芽孢杆菌,特性分析

来源: 食品与发酵工业 2019年06期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学,轻工业手工业

单位: 内蒙古民族大学生命科学学院,内蒙古民族大学农学院

基金: 内蒙古自治区自然科学基金资助(2018MS03060),内蒙古民族大学博士科研启动基金资助(BS403),内蒙古民族大学实验室开放项目

分类号: TS201.3

DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019194

页码: 42-47

总页数: 6

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