导读:本文包含了桑椹胚论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:桑椹,胚胎,小鼠,乙酰,荧光,囊胚,表型。
桑椹胚论文文献综述
黄玉玲[1]（2015）在《人配子、种植前胚胎及体外成熟卵来源桑椹胚全基因组CpG岛及启动子的甲基化模式》一文中研究指出原始生殖细胞到成熟配子的产生、受精合子全基因组重新启动是人和哺乳动物的生命周期中最为重要的两个阶段。已有研究对人及哺乳动物配子及早期胚胎全基因组甲基化位点进行定量分析,证实了人及哺乳动物成熟配子的产生、受精合子及种植前胚胎发育过程中DNA甲基化呈现动态变化,该甲基化动态变化图谱,对我们了解哺乳动物早期胚胎的基因表达及其调控和转座子抑制的功能相关性提供了重要理论依据：研究采用简化代表性亚硫酸氢盐测序法(Reduced representation bisulfite sequencing RRBS)可准确的区分5-甲基胞嘧啶(5-methylcytidine,5-mC)及5-羟甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5-hmC),并定量分析全基因组的甲基化水平,但该方法的覆盖率不够。为解决覆盖率不足的问题,乔杰等人采用改良的全基因组亚硫酸氢盐测序法(Whole genome bisulfite sequencing, WGBS)检测了囊胚内细胞团(ICM)和种植后胚胎全基因组甲基化水平,但配子及囊胚前期的胚胎全基因组甲基化位点变化情况未用覆盖率高的WGBS法检测。本研究采用半定量但几乎完全覆盖全基因组启动子和CpG岛甲基化芯片法(MeDIP-Chip)1分析人精子、卵母细胞及种植前胚胎各发育阶段全基因组CpG岛及启动子区域甲基化动态变化情况,以了解CpG岛及启动子甲基化的动态变化模式、该甲基化动态变化的可能调节机制及在早期胚胎发育过程中的功能。卵母细胞在第一次减数分裂中期(prophase I,M1)开始去甲基化,出生后在始基卵泡向窦卵泡发育过程中的次级卵母细胞的粗线后期重新建立甲基化模式,受精前完成。窦卵泡期取出未成熟卵,在体外进行24-48h的培养达成熟后可受精,但研究认为这个时间不足以让卵母细胞在成熟前完成甲基化的重建,而使在后期的胚胎发育过程中出现各种异常。从体外受精胚胎移植(In vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)患者小卵泡中得到的不成熟卵,进行体外成熟培养(in vitro maturation, IVM)后获得的成熟卵受精后行胚胎移植可成功获得临床妊娠,但各研究中心妊娠率的比率相差甚远,有研究认为这部分未成熟卵来源的胚胎质量差、发育潜能低下,移植后妊娠率极低,而质疑其利用价值：由此看来对于促排卵患者中获得的未成熟卵是否有利用价值存在争议。因此,本研究通过对IVM来源的处于合子基因组启动活化的关键时期-细胞融合的桑椹胚,对比分析IVM与体内成熟(In vivo maturation IVO)来源桑椹胚全基因组CpG岛及启动子的甲基化水平,从表观遗传学的角度来评价IVM胚胎发育潜能低下的可能机制及安全性。第一部分人配子、种植前胚胎全基因组CpG岛及启动子区域甲基化动态变化图谱研究目的既往研究采用RRBS的方法证实了人及哺乳动物成熟配子的产生、受精合子及种植前胚胎发育过程中DNA甲基化呈现动态变化,但该方法覆盖率不够。本研究采用几乎完全覆盖启动子和CpG岛(大部分甲基化发生区域)甲基化芯片法(MeDIP-Chip)分析人精子、卵母细胞及种植前胚胎各发育阶段全基因组CpG岛及启动子区域甲基化动态变化情况,以了解CpG岛及启动子甲基化的动态变化模式、该甲基化动态变化的可能调节机制及在早期胚胎发育过程中的功能。研究方法经医院伦理委员会批准,收集2010年7月-2013年7月于广州医科大学附属第叁医院生殖医学中心助孕的患者,卵母细胞来自助孕患者及自愿者捐赠,精子来自助孕患者,原核及2-4cell胚胎来自自愿者捐赠获得卵子受精后所得,其余早期胚胎来自助孕妊娠成功患者的捐赠,所有标本的使用得到了捐赠者的知情同意。分组标本按发育阶段分为8组,①精子组,标本30份；②MII期卵细胞组：25枚；③2PN期合子,25枚；④4细胞期胚胎,5枚；⑤8细胞期胚胎；4枚；⑥桑椹胚胚胎；6枚；⑦5枚囊胚的ICM(内细胞团)；⑧5枚囊胚的TE(滋养层细胞)。DNA的提取①精子采用差异裂解法,并结合使用Genomic DNA urification Kit(Promega)的试剂盒提取精子DNA；②-⑥组,卵及囊胚前期胚胎使用酸性Tyrode's solution去除透明带及粘附的颗粒细胞,移入PCR管裂解细胞提取DNA；⑦和⑧囊胚的ICM(内细胞团细胞)与TE(滋养层细胞),用拉细的巴氏管钝性分离ICM与TE后,分别移入PCR管裂解细胞收集DNA。(3)甲基化芯片(MeDIP-Chip)各组DNA采用超声波将DNA碎裂成大小约200-1000 bp的随机片段,经鼠5-甲基单克隆抗体进行免疫沉淀、纯化后,采用Cy3和Cy5标记WGA试剂盒进行全基因组扩增,然后与包含了NimbleGen人DNA甲基化3x720k启动子和CpG岛的微阵列杂交,用GenePix 4000B微阵列扫描仪读取数据。(4)芯片甲基化数据的统计Peak Score:探针上峰值的-log 10 (P-value)值,反应甲基化程度(Cut off=2);PeakMvalue:探针测得峰值中位数值的log2 (IP/Input)-比值；n指Peak Score≥2的峰值数,或者每个PeakMvalue对应的峰值数。实验结果(1)提取DNA的纯度及免疫共沉淀所富集的DNA片段均符合实验要求。(2)人配子、种植前胚胎全基因组CpG岛甲基化独特的动态变化模式①精子的全基因组CpG岛的甲基化程度最高(sperm, n=15604),受精后由原核期开始逐步去甲基化(2PN, n=3744),4cell期胚胎时全基因组CpG岛的甲基化程度达最低(4cell, n=2826),8cell胚胎期(8cell, n=3073)后CpG岛甲基化水平逐步恢复重建,桑椹胚期CpG岛甲基化水平进一步升高(Morula,n=5374)直至囊胚期ICM (ICM,n=5706)的CpG岛甲基化水平接近卵母细胞水平(Oocyte,n=6062),而TE细胞CpG岛甲基化水平处于卵母细胞与精子之间(TE,n=8376)。②种植前胚胎全基因组CpG岛甲基化的动态变化主要区域在高甲基化(Peak Mvalue≥0.7)和低甲基化(Peak Mvalue≤0.4)区域。③种植前胚胎基因组CpG岛的甲基化程度的变化,存在叁个剧烈变化期。这种变化的趋势为：第一期为精子、卵母细胞受精后到2PN的转变,即精子及卵母细胞甲基化程度降低(迅速去甲基化)；第二期：桑椹胚到囊胚期的转变,甲基化的迅速重建,第叁期囊胚形成过程中细胞向ICM与TE分化阶段,且TE的甲基化重建程度大于ICM。④在Intragenic、intergenic及Promotor区域CpG岛甲基化的动态变化情况：全基因组CpG岛甲基化动态变化主要由Promotor区域CpG岛甲基化变化引起,精子甲基化信号来自Promotor区域的比例为73.7%,卵母细胞为60.8%,2PN期合子为57.9%,4cell期胚胎为52.2%,8cell期胚胎为50.3%,桑椹期胚胎为68.8%,囊胚期ICM为66.6%,滋养层细胞为66.8%,CPG岛在intergenic与Intragenic区域甲基化变化无Promotor区域明显。(3)人种植前胚胎全基因组promoter甲基化水平的动态变化情况。①精子全基因组的promoter甲基化程度最高(Sperm,n=10634),受精后从原核期开始逐步去甲基化(2PN,n=5951),4cell胚胎期(4cell,n=6451)略微升高但低于卵母细胞(Oocyte,n=6578)基因组promoter区甲基化水平,之后又逐步去甲基化,桑椹期胚胎(Morula,n=5581)降至最低,囊胚期的ICM略升高(ICM,n=5723),而TE细胞甲基化程度最高(TE,n=7323),处于卵母细胞与精子之间。②人种植前胚胎全基因组的promoter甲基化的动态变化主要由高甲基化(Peak Mvalue≥0.7)的promoter和低甲基化(Peak Mvalue≤0.4)的promoter区域的变化引起。③HCP、LCP对人种植前胚胎全基因组promoter甲基化的动态变化的影响大于ICP:4cell期其全基因组HCP的比例最低占(40.2%),之后逐渐升高,囊胚期的ICM(58.1%)与TE(59.5%)的HCP比例处于卵母细胞(75.2%)与精子细胞(53%)之间；而promoter区LCP比例则与之相反,4cel1期胚胎的LCP比例最高(38.8%)；ICP的变化不明显。研究结论(1)人种植前胚胎全基因组CpG岛甲基化呈独特的动态变化模式：受精后由原核开始逐步去甲基化,4cell期全基因组CpG岛的甲基化程度最低,之后逐步重新建立甲基化模式：囊胚期ICM甲基化水平接近卵母细胞,而TE的甲基化水平处于卵母细胞与精子之间；而人及哺乳动物种植前胚胎在全基因组的总体甲基化水平最低点在ICM阶段。(2)基因组在不同发育阶段种植前胚胎CpG岛的甲基化存在叁个剧烈变化期,CpG岛甲基化擦除的主要阶段是4cell期,而全基因组总体的擦除则在2cell期。(3)基因组CpG岛甲基化动态变化主要由Promoter区域CpG岛甲基化动态变化引起。(4)人种植前胚胎基因组promoter甲基化同样呈现独特动态变化：受精后由原核开始逐步去甲基化,4cell期略微升高但低于卵母细胞水平,之后又逐步开始去甲基化直至桑椹胚期降至最低,而全基因组CpG岛最低点在4cell期,全基因组总的甲基化水平最低点在ICM阶段；HCP、LCP对全基因组promoter甲基化的动态变化的影响大于ICP。第二部分IVM及1VO桑椹胚CpG岛及启动子甲基化模式比较研究目的IVF-ET患者小卵泡中得到的不成熟卵,大部分可在体外培养24-48h后达成熟,成熟卵受精后行胚胎移植可成功获得临床妊娠,但各研究中心妊娠率的波动较大(0-25%),有些研究认为这部分未成熟卵获得的胚胎质量差、发育潜能低下,移植后几乎无妊娠者,而质疑其利用价值；由此看来促排卵患者获得的未成熟卵是否有利用价值存在争议。此外,窦卵泡期取出未成熟卵,在体外进行24-48h的培养达成熟后可受精,但研究认为这个时间不足以让卵母细胞在成熟前完成甲基化的重建,而使其在后期的胚胎发育过程中出现各种异常。因此,本研究通过对IVM来源处于细胞融合期,即合子基因组启动活化的关键时期一桑椹胚及体内成熟(In vivo maturation IVO)来源的桑椹胚全基因组CpG岛及启动子甲基化情况进行配比分析,从表观遗传学的角度来评价IVM胚胎发育潜能低下的可能机制及安全性。研究方法(1)实验对象实验组：收集2012年1月至2013年12月,ICSI患者和短时受精患者的MI期卵子168枚,IVM成熟的卵受精后一部分进行桑椹胚培养,提取桑椹胚DNA进行甲基化芯片实验；一部分行囊胚培养,行发育潜能观察实验。对照组：形态学观察的对照组来自2012年1月-2013年12月期间以男性因素行ICSI治疗患者,且男方精液参数主要为少弱精且无女方因素； 共100枚MⅡ卵母细胞。甲基化芯片(MeDIP-Chip)对照组来自第一部分实验组第⑥组的桑椹胚。(2)胚胎培养： MⅠ期卵子放置低氧分压的叁气培养箱,成熟卵母细胞行ICSI受精,进行桑椹胚及囊胚培养,对照组患者的MⅡ卵母细胞受精后行全胚胎囊胚培养。(3)来自IVM与IVO的桑椹胚先使用酸性Tyrode's solution去除透明带及粘附的颗粒细胞,移入PCR管裂解细胞提取DNA进行甲基化芯片(MeDIP-Chip)实验,实验方法与第一部分实验一致。(4)芯片甲基化数据的统计Peak Score:探针上峰值的-log10 (P-value)值,反应甲基化程度(Cut off=2);PeakMvalue:探针测得峰值中位数值的Iog2(IP/Input)-比值;n指Peak Score>2的峰值数,或者PeakMvalue对应的峰值数；采用差异甲基化信号分析法(Differenttial enrichment peaks,DEP):计算“M”值研究结果1.IVM卵母细胞共168枚,体外成熟率为83.3%(140/168),40枚成熟卵受精后进行桑椹胚培养,共获得6枚碎片<20%桑椹胚进行DNA提取后进入甲基化芯片实验；其余100枚成熟卵受精后进行囊胚培养参与发育潜能评估实验,两组的2PN率、卵裂率及桑椹胚形成率无统计学差别(P>0.05),但优质囊胚形成率IVM组(11.4%)显着性低于IVO组(46.7%)(P<0.01)。2.CpG岛方面(1)IVM桑椹胚全基因组CpG岛高甲基化的比例高于IVO桑椹胚,相反低甲基化区域的比例却低于IVO桑椹胚。(2)来自IVM桑椹胚甲基化的信号总数(n=3281)多于IVO桑椹胚甲基化的信号总数(n=611)；(3)IVM桑椹胚的Intragenic、intergenic及Promotor各区域的peakMvalue平均值均高于IVO桑椹胚。3.Promotor方面：(1)IVM桑椹胚全基因组Promotor高甲基化的比例高于IVO桑椹胚,但中、低甲基化区域的比例低于对照组。(2)来自IVM桑椹胚甲基化的信号总数(n=3447)多于IVO桑椹胚甲基化的信号总数(n=2744)。研究结论1两组的2PN率、卵裂率及桑椹胚形成率无统计学差别,但优质囊胚形成率IVM组显着性低于IVO组,证实源自促排后的未成熟卵胚胎发育潜能低下。2来自体外成熟卵的桑椹胚与来自体内成熟卵的桑椹胚,在全基因组CpG岛及Promotor区甲基化表水平上均出现较大的差异： IVM桑椹胚CpG岛甲基化的水平高于IVO桑椹胚,IVM桑椹胚Promotor区甲基化的程度高于IVO桑椹胚,表观遗传学上的差异可能是导致促排后的未成熟卵胚胎发育潜能差、妊娠率低下的主要原因,因此这部分卵母细胞在临床上须谨慎运用。全文小结1、受精后由原核开始的逐步去甲基化, CpG岛4cell期最低,启动子区域在桑椹胚期降至最低；2、种植前期胚胎不同发育阶段全基因组的CpG岛及启动子的甲基化存在叁个剧烈变化期；3、全基因组CpG岛甲基化动态变化主要由Promotor区域CpG岛甲基化动态变化引起,HCP、LCP对人种植前胚胎全基因组promoter甲基化的动态变化的影响大于ICP；5、促排后的未成熟卵经体外成熟培养后获得的胚胎发育潜能低下；6、源自体外成熟卵与体内成熟卵的桑椹胚,在全基因组CpG岛及Promotor区甲基化水平上均出现较大的差异：该差异可能是导致IVM胚胎发育潜能差、妊娠率低下的主要原因。(本文来源于《南方医科大学》期刊2015-05-12）
黄玉玲,陈士岭,龙晓林,唐祥锦[2]（2015）在《IVM及IVO桑椹胚全基因组CpG岛甲基化模式比较》一文中研究指出目的:比较来自体外成熟(IVM)和体内成熟(IVO)卵子的桑椹胚全基因组Cp G岛甲基化模式,从表观遗传学角度分析IVM胚胎发育潜能低下的机制。方法:收集2012年1月至2013年11月单精子显微注射(ICSI)患者和短时受精患者的未成熟MⅠ期卵子168枚进行IVM,成熟MⅡ卵行ICSI受精后继续培养至桑椹胚作为试验组,对照组来自助孕患者成功后捐赠的D3丢弃胚胎,继续培养至桑椹胚,两组来源桑椹胚提取DNA后进行甲基化芯片分析。结果:IVM和IVO的桑椹胚,在形态学上无差异,但在全基因组Cp G岛甲基化模式上两组存在差异,IVM桑椹胚的甲基化程度相比IVO桑椹胚更高;IVM桑椹胚甲基化的信号总数(n=3 281)多于IVO桑椹胚甲基化的信号总数(n=611);IVM桑椹胚Cp G岛高中甲基化的比例高于IVO桑椹胚,相反低甲基化区域却低于对照组;IVM桑椹胚的Cp G岛甲基化水平相对值在Intragenic、intergenic及Promotor各区域均高于IVO桑椹胚。结论:来自体外成熟卵与来自体内成熟卵的桑椹胚,在表观遗传学甲基化方面表现出了较大的差异,这个差异可能与之后发育潜能差、妊娠率低下有关。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2015年09期）
陈小兵,包春莹,李德红[3]（2013）在《对“桑椹胚”和“肌酐”等专业名词的讨论》一文中研究指出1"桑椹胚"与"桑葚胚"1.1疑问陈小兵[江西省瑞金第一中学(342500)]《生物学》[(美)拉弗、约翰逊编.谢莉萍,张荣庆,张贵友译,第6版]一书中出现的是"桑葚胚",人教版高中生物选修3《现代生物科技专题》使用的是"桑椹胚"。究竟是"桑葚胚"还是"桑椹胚"?1.2讨论王彬翻阅现代汉语词典,"椹"与"葚"是同(本文来源于《中学生物教学》期刊2013年05期）
周光斌,郭将,曾艳,程柯仁,傅祥伟[4]（2013）在《超低温冷冻对小鼠桑椹胚多能性因子Oct-4表达的影响》一文中研究指出本实验旨在探讨昆明白小鼠桑椹胚超低温冷冻后Oct-4表达的变化与胚胎发育潜力的关系。胚胎采用OPS法冷冻,即胚胎于10%EG+10%DMSO溶液中预处理30 s,然后再移入玻璃化溶液(EDFS30)中处理25 s,以OPS为承载器投入液氮中。毒性组胚胎未投入液氮,其他过程与冷冻组相同,新鲜胚胎为对照组。胚胎解冻后,检测Oct-4 mRNA与蛋白的表达,通过观察其形态正常率、囊胚发育率和囊胚细胞数来综合判断其体外发育能力。结果表明:冷冻组和毒性组较桑椹胚中Oct-4 mRNA的表达量对照组相比显着降低(P<0.05),蛋白表达量3组间无显着差异。桑椹胚处理后的形态正常率以及桑椹胚培养48 h后的囊胚发育率(96.67%～100%)和囊胚细胞数(89.67～92.33)3组间无显着差异。结果显示,玻璃化冷冻保存小鼠桑椹胚后多能性基因Oct-4 mRNA表达的变化并未影响其体外发育潜力。(本文来源于《中国畜牧杂志》期刊2013年09期）
姜万录[5]（2012）在《卵裂期包括桑椹胚阶段吗?》一文中研究指出1问题夏焦兵[安徽省宣城市第叁中学(242000)]卵裂期究竟指哪一阶段?人教版高中《生物·选修3·现代生物科技专题》认为:胚胎发育的早期有一段时间是在透明带内进行的,这一时期称为卵裂期。其可(本文来源于《中学生物教学》期刊2012年07期）
高源[6]（2012）在《慢病毒感染mWOW法培养去透明带桑椹胚实验研究》一文中研究指出目的通过研究小鼠去透明带胚胎体外培养方法的选择对慢病毒感染法制备转基因小鼠效率的影响，探索最适于慢病毒与去透明带胚胎共培养的体外培养方式，初步建立慢病毒感染去透明带胚胎技术平台，为下一阶段通过慢病毒感染法制备转基因小鼠奠定基础。方法供卵母鼠发现阴道栓当天，无菌条件下，剪取输精管，0.1mlFHM操作液冲洗输精管，收集合子，透明质酸酶去除卵丘细胞，0.5%链酶蛋白酶去除透明带，将收集的去透明带合子按mWOW培养法、微滴单卵+群卵法、微滴单卵法、微滴群卵法随机分为四组，KSOM-AA培养液培养4天，每24h半量换液，以早期胚胎各阶段发育率、囊胚率和囊胚细胞数作为衡量指标，探讨四种体外培养方法对去透明带胚胎发育的影响。在此基础上，携带EGFP的慢病毒感染去透明带桑椹胚，48h后随机抽取感染囊胚，单细胞巢式PCR检测外源基因在胚胎内的整合情况。荧光显微镜下统计荧光胚胎个数，以此计算慢病毒感染效率。结果mWOW法、微滴单卵+群卵法、微滴单卵法叁种方法之间囊胚发育率差异有统计学意义（p<0.05）。比较mWOW法、微滴单卵+群卵法、微滴单卵法、微滴群卵法4种方法的2-细胞发育率、mWOW法、微滴单卵+群卵法、微滴单卵法叁种方法的4-细胞发育率差异无统计学意义（p>0.05）。微滴单卵+群卵法和微滴单卵法的8-细胞发育率差异无统计学意义（p>0.05）,均高于mWOW法的8-细胞发育率（p<0.05）。mWOW法、微滴单卵+群卵法的桑椹胚发育率差异无统计学意义（p>0.05）,均高于微滴单卵法的桑椹胚发育率（p<0.05）。微滴单卵+群卵法、微滴单卵法的囊胚回收率都是100%，均高于mWOW法的囊胚回收率（p<0.05）。mWOW法、微滴单卵+群卵法、微滴单卵法得到的囊胚的细胞数均低于体内囊胚的细胞数（p<0.05）。微滴单卵+群卵法和微滴单卵法得到的囊胚的细胞数差异无统计学意义（p>0.05），均低于mWOW法得到的囊胚的细胞数（p<0.05）。随机抽取的7个囊胚进行单细胞巢式PCR检测，7个样品经外引物与内引物两次扩增，均为PCR阳性。慢病毒感染mWOW培养的无透明带桑椹胚48h，囊胚率90.1%（72/80），慢病毒感染率78.8%（63/80）。结论1、mWOW培养法与微滴单卵法、微滴群卵法及微滴单卵+群卵法比较，mWOW培养法更适于作为慢病毒与桑椹胚共培养方法。2、通过mWOW法共培养慢病毒与去透明桑椹胚成功将EGFP外源基因导入小鼠胚胎。(本文来源于《辽宁医学院》期刊2012-03-01）
王志伟,胡勇策,马晓玲,刘文强,殷吉庆[7]（2010）在《牛去核卵母细胞能够被孤雌激活并发育到桑椹胚》一文中研究指出为了探讨实验牛去核卵母细胞能否被激活,及其激活后的发育能力,本研究利用化学激活法对牛去核卵母细胞进行孤雌激活,然后在体外颗粒细胞饲养层上进行培养,同时在不同的时间采用免疫荧光技术对α-微管蛋白(α-tubulin)进行染色,以观察去核卵母细胞与正常卵母细胞中微管分布动态变化的差别。结果表明去核卵母细胞经激活后在体外培养能够发育到桑椹胚,去核卵母细胞内α-tubulin的分布在分裂初期没有分区现象,对照组未去核卵母细胞内的α-tubulin抗体出现了分区现象。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2010年01期）
庄丽伟,许厚强,隋世燕,王海娜,张勇[8]（2009）在《FDA-PI荧光双色法快速评价小鼠桑椹胚活力》一文中研究指出胚胎移植成功与否关键取决于胚胎的存活力和发育能力,但是胚胎的存活力很难预知。本实验以小鼠桑椹胚为材料,研究荧光物质二乙酰荧光素(Fluorescein diacetate,FDA)-碘化丙啶(Propidium iodide,PI)在胚胎活力检测上的应用,同时检测两种荧光物质FDA和PI对小鼠桑椹胚的毒负作用,再通过胚胎移植来最终证明荧光标记的可靠性。实验结果表明,荧光物质FDA和PI能分别标记强活力胚胎、弱活力胚胎和死胚胎,且FDA对胚胎无毒负作用,PI对透明带完整的胚胎也无毒负作用,所以FDA-PI荧光双色法是一种简捷、安全而有效的的小鼠胚胎活力评价方法。(本文来源于《四川动物》期刊2009年02期）
庄丽伟,许厚强,隋世燕,王海娜[9]（2008）在《FDA-PI荧光双色法快速检测小鼠桑椹胚活力》一文中研究指出本文建立了应用FDA和PI两种荧光物质评价小鼠桑葚胚活力的新方法,此方法简单、可靠。可准确鉴别小鼠桑葚胚活力的强、弱,及胚胎凋亡和死亡。也为客观评价其它动物胚胎活力提供科学依据。(本文来源于《中国畜禽种业》期刊2008年09期）
许义新,何志颖,朱海英,陈雪松,李建秀[10]（2007）在《小鼠受精卵、卵裂球和桑椹胚细胞无SP表型》一文中研究指出SP(side population)表型的概念在干细胞研究中用来表示某些细胞具有的将进入细胞的荧光染料如Hoechst 33342排出细胞的特性,这种表型的形成与ABCG2蛋白有关.近年研究报告某些干细胞及某些前体细胞具有SP表型,并提出SP表型可能是干细胞或前体细胞的筛选标志.在本研究中通过分离了小鼠受精卵、2细胞期及8细胞期卵裂球、桑椹胚和囊胚并直接进行Hoechst 33342染色,结果发现小鼠受精卵、卵裂球、桑椹胚细胞都不具有SP表型,但是处于其分化下游的囊胚中的内细胞团细胞却具有明显的SP表型,而同一囊胚中的滋养层细胞却不具有SP表型.该结果表明来源于内细胞团的胚胎干细胞具有的SP表型是内在的,与体外培养条件无关;另一方面该结果也提示SP表型至少是多能干细胞所具有的独特表型之一,但并不存在于更早期的全能干细胞.当在培养液中加入ABCG2蛋白抑制剂后直接导致囊胚中的内细胞团细胞SP表型消失,提示囊胚内细胞团细胞SP表型的形成与ABCG2蛋白具有密切相关性.以上结果表明并不是所有的干细胞都具有SP表型,SP表型可能可以作为某些种类的干细胞,如胚胎干细胞及某些成体组织干细胞的分选标志,但并不具有普遍性.(本文来源于《中国科学(C辑:生命科学)》期刊2007年05期）
桑椹胚论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:比较来自体外成熟(IVM)和体内成熟(IVO)卵子的桑椹胚全基因组Cp G岛甲基化模式,从表观遗传学角度分析IVM胚胎发育潜能低下的机制。方法:收集2012年1月至2013年11月单精子显微注射(ICSI)患者和短时受精患者的未成熟MⅠ期卵子168枚进行IVM,成熟MⅡ卵行ICSI受精后继续培养至桑椹胚作为试验组,对照组来自助孕患者成功后捐赠的D3丢弃胚胎,继续培养至桑椹胚,两组来源桑椹胚提取DNA后进行甲基化芯片分析。结果:IVM和IVO的桑椹胚,在形态学上无差异,但在全基因组Cp G岛甲基化模式上两组存在差异,IVM桑椹胚的甲基化程度相比IVO桑椹胚更高;IVM桑椹胚甲基化的信号总数(n=3 281)多于IVO桑椹胚甲基化的信号总数(n=611);IVM桑椹胚Cp G岛高中甲基化的比例高于IVO桑椹胚,相反低甲基化区域却低于对照组;IVM桑椹胚的Cp G岛甲基化水平相对值在Intragenic、intergenic及Promotor各区域均高于IVO桑椹胚。结论:来自体外成熟卵与来自体内成熟卵的桑椹胚,在表观遗传学甲基化方面表现出了较大的差异,这个差异可能与之后发育潜能差、妊娠率低下有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
桑椹胚论文参考文献
[1].黄玉玲.人配子、种植前胚胎及体外成熟卵来源桑椹胚全基因组CpG岛及启动子的甲基化模式[D].南方医科大学.2015
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