导读:本文包含了对虾杆状病毒论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:杆状,对虾,病毒,南美,胰腺,幼体,苗种。
对虾杆状病毒论文文献综述
史英力[1]（2016）在《以凡纳滨对虾β-actin基因启动子为元件的重组昆虫杆状病毒表达系统的建立》一文中研究指出凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)隶属于甲壳亚纲十足目,是目前全世界对虾养殖产业中产量和产值最高的经济物种。由于病害侵袭,对虾养殖业每年面临严重的损失。目前大量的研究集中于病害防治、遗传育种和水产养殖等多方面,其中,在病害防治和基因功能研究中,基因过表达研究受制颇多,缺乏有效的表达系统便是其中之一。表达系统包括表达载体和宿主细胞,其中有效的表达载体需要高效的启动元件。目前有关对虾高效同源启动子的开发极少。β-actin启动子是目前在其他物种中常用的高效的同源启动子,本文以凡纳滨对虾为研究对象,在前期研究工作已获得凡纳滨对虾β-actin基因序列(actin T1)的基础上,首次扩增得到其β-actin5’上游序列,并对其活性、应用范围和调控元件功能进行深入研究,同时尝试将其与昆虫杆状病毒系统相结合,开发有效的表达系统。本研究的主要目的是:开发高效的对虾同源启动子和尝试建立有效的外源表达系统。本研究获得的主要进展如下:1.凡纳滨对虾β-actin基因5’上游序列的分子克隆、功能分析及应用范围研究通过反向PCR(inverse PCR,i PCR)等方法,我们获得了凡纳滨对虾β-actin基因5’上游序列,并将其命名为Sba P(Shrimp beta-actin promoter)。该序列全长1,642 bp,分别包含5’侧翼序列、第一外显子、第一内含子和第二外显子部分区域。通过生物信息学分析和启动活性检测发现,尽管5’侧翼序列对于β-actin基因表达起到非常重要的作用(该区域含有非常保守的CCAAT-box和CAr G motif),但是全长序列Sba P具有比5’侧翼序列更强的启动活性。为了评估Sba P启动活性强弱,将其与4种常用的病毒来源的组成型启动子,即巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)启动子,猴猿空泡病毒40(Simian vacuolating virus 40,SV40)启动子,昆虫杆状病毒多角体蛋白(Polyhedrin,Polh)启动子和白斑综合征病毒极早期基因1(white spot syndrome virus immediate early gene 1,WSSV ie1)启动子以及一种罗非鱼来源的β-actin启动子(Tba P)进行活性比较。由于启动子在不同细胞系中启动强度不同,活性分析在8种不同物种来源的细胞系中展开,通过检测构建的启动子-荧光素酶基因表达载体在转染的不同细胞系中的相对荧光素酶表达量,间接分析启动元件活性强弱。结果表明,在测试的8种细胞系中,Sba P能够全部启动报告基因的表达,它们分别是,sf21(昆虫),PAC2(斑马鱼),EPC(鲤鱼),CHSE-214(鲑鱼),GSTEF(绿龟),MS-1(僧海豹),293T(人类)和He La(人类)的细胞系,但是各自的表达模式不同。在除sf21昆虫细胞系外的其他细胞系中,Sba P介导的报告基因相对表达量均弱于CMV启动子10倍以上,但是显着性地高于Polh启动子(除CHSE-214细胞系),在某些细胞系与SV40,ie1和Tba P启动子活性相近。而在sf21昆虫细胞系中,Sba P介导的荧光素酶表达量显着性地高于除ie1外所有启动子,并且其荧光素酶相对表达量较其它组均高10倍以上。2.Sba P调控元件结构及功能,以及优化后启动子活性研究Sba P启动活性分析检测表明,其第一内含子区域可能存在调控元件,为检测调控元件结构及功能,我们构建了Sba P缺失突变-荧光素酶表达载体。通过检测缺失突变体启动活性发现,在第一内含子区域中存在有两个抑制子(-1140/-925,-222/-21)和至少一个增强子(-810/-223)区域。而缺少抑制子的突变体Sba PΔ-222/+1Δ-1325/-925(命名为Sba P(ENX)),在昆虫细胞中表现出了更强的启动活性,其报告基因相对表达量显着性高于ie1启动子组8倍以上。DNA注射实验进一步证实,Sba P(ENX)在凡纳滨对虾体内也具有显着性高于ie1启动子的启动活性。为检测Sba P(ENX)是否在其他细胞系中也具有较Sba P更强的启动活性,我们检测了其在其他几种不同物种细胞系中的启动活性。有趣的是,与Sba P相比,Sba P(ENX)在EPC和PAC2细胞系中也表现出较强的活性,但是在哺乳动物细胞系中其启动活性却显着性降低,介导的荧光素酶相对表达量在293T细胞系中仅为Sba P启动子的5%,He La细胞系中,也仅有16%。3.以Sba P(ENX)为启动元件的重组昆虫杆状病毒表达系统的建立及应用研究为进一步建立有效的表达系统,我们尝试构建以Sba P(ENX)为启动元件,以RFP为报告基因的重组昆虫杆状病毒Bac-Sba P(ENX)-RFP。结果表明,在表达能力和稳定性方面,构建的重组杆状病毒能够高效地在sf21昆虫细胞中启动报告基因RFP的表达,同时,在海水及半海水的条件下,在12 h内具有很好的稳定性。随后,通过将该重组杆状病毒体外转导原代血细胞和体内注射转导对虾组织以及浸泡感染的结果表明,Bac-Sba P(ENX)-RFP能够通过注射的方式在肝胰脏和肌肉中启动报告基因RFP的过表达。本研究获得了凡纳滨对虾β-actin基因5’上游序列,并对其结构、活性和调控元件功能进行了较为深入的研究,这有助于加深对对虾同源启动子的结构和功能的了解;此外,我们还开发了高效的对虾同源启动元件Sba P(ENX),并且尝试了将其与昆虫杆状病毒系统相结合应用于对虾外源基因表达系统的研究,为开发高效对虾外源基因过表达系统提供了一种新的可能。(本文来源于《中国科学院研究生院(海洋研究所)》期刊2016-05-01）
雷燕,肖洋,张会军,张翔,王娟[2]（2015）在《凡纳滨对虾对虾杆状病毒PCR检测方法的建立及初步应用》一文中研究指出根据Gen Bank中公布的对虾杆状病毒(Baculovirus penaei,BP)基因片段序列,设计1对特异性检测引物,建立快速检测凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)对虾杆状病毒的PCR方法。用该方法对BP阳性虾进行PCR扩增,结果得到380 bp的特异性扩增条带,与实验设计相符,而对白斑综合征病毒(WSSV)、桃拉病毒(TSV)、传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)阳性虾和健康虾的扩增结果为阴性。测序比对结果证实,该PCR方法检测结果准确,最低可检测出约1 pg的病毒DNA。利用建立的PCR方法对来自广东、广西、福建、海南和浙江的2 722份临床病料进行检测,共检出阳性病料133份,表明该PCR方法可用于对虾杆状病毒的临床快速检测。(本文来源于《广东海洋大学学报》期刊2015年04期）
雷燕,肖洋,戚瑞荣,张会军[3]（2015）在《南美白对虾对虾杆状病毒病的防治技术》一文中研究指出近年来,南美白对虾的养殖在我国得到了很大的发展,但是,随着南美白对虾养殖规模的迅速扩大以及南美白对虾种质的急剧下降,病害也越来越严重,不但常见的病毒病如白斑综合征、桃拉病毒病和传染性及皮下造血组织坏死病毒病对南美白对虾的养殖造成了严重影响,就连被我国列为二类传染性水生动物疾病的对虾杆状病毒病也逐渐增多。(本文来源于《科学养鱼》期刊2015年02期）
雷燕,唐绍林,戚瑞荣,胡壮涛,陈超[4]（2013）在《凡纳滨对虾对虾杆状病毒PCR检测方法的建立及初步应用》一文中研究指出参照NCBI中已发布的对虾杆状病毒(Baculovirus penaei,BP)的基因设计合成1对引物,预扩增片段长380bp,对其扩增条件进行了摸索优化,建立了检测凡纳滨对虾的PCR方法,利用该方法对BP感染凡纳滨对虾、WSSV感染凡纳滨对虾、IHHNV感染凡纳滨对虾、TSV感染凡纳滨对虾、正常凡纳滨对虾进行检测,发现只有BP感染凡纳滨对虾为阳性,其余为阴性,说明该方法具有较高的特异性。对检出的阳性PCR扩增片段连接pMD19-Tsimple vector进行测序分析,结果与预期相符。因此,本实验所建立的的PCR检测方法可以对凡纳滨对虾是否感染对虾杆状病毒作出快速准确地诊断。利用此方法对2013年3月~8月从广东、广西、福建、海南采集的668尾虾病料进行了检测,其中广东364尾,检出46尾阳性,广西168尾,检出2尾阳性,福建94尾,检出1尾阳性;海南42尾,检出6尾阳性。部分阳性PCR扩增片段经过测序比对为对虾杆状病毒的基因序列,进一步证实了该方法快速、特异、敏感且重复性好,可满足凡纳滨对虾对虾杆状病毒快速诊断的需要。本研究首次建立了凡纳滨对虾对虾杆状病毒的PCR检测方法,为凡纳滨对虾对虾杆状病毒的流行病学调查奠定了基础。(本文来源于《中国水产学会鱼病专业委员会2013年学术研讨会论文摘要汇编》期刊2013-11-05）
[5]（2011）在《斑节对虾杆状病毒病》一文中研究指出2008年农业部兽医局委托动物流行病学中组织专家编写动物疫病释义,为便于解读水生动物的疫病,本刊现将《一、二、叁类动物疫病病种名录》中水生动物疫病种类的分类及各病的释义分期进行刊登。(本文来源于《中国水产》期刊2011年11期）
刘鸿玲,刘敏,闫冬春[6]（2011）在《肝胰腺细小病毒和斑节对虾杆状病毒的PCR复合检测》一文中研究指出肝胰腺细小病毒和斑节对虾杆状病毒是常见的2种DNA对虾病毒,在虾类养殖业中经常会出现混合感染。因此,建立这2种病毒的复合检测方法显得尤为重要。根据基因库中肝胰腺细小病毒和斑节对虾杆状病毒的保守序列,设计了肝胰腺细小病毒和斑节对虾杆状病毒的特异性引物,对这2种病毒PCR复合检测的反应条件和试剂浓度进行优化,退火温度55℃,主要试剂Mg2+终浓度为3mmol/L,dNTP终浓度为0.4 mmol/L,引物终浓度为0.8μmol/L。进一步比较了在优化后的PCR反应体系下,检测单种病毒和同时检测这2种病毒的灵敏度差异。(本文来源于《水产科学》期刊2011年08期）
[7]（2011）在《对虾杆状病毒病》一文中研究指出对虾杆状病毒病是由对虾杆状病毒引起的病毒性疾病,主要危害对虾幼体、仔虾和幼虾。我国将其列为二类疫病。一、病原学病原是对虾杆状病毒(Baculovirus Penaei,BP),又名PvSNPV,属杆状病毒科(Baculoviridae),属地位未定成员。(本文来源于《中国水产》期刊2011年05期）
吕利群,徐鸿绪,王浩[8]（2009）在《基于对虾白斑综合症病毒极早期启动子的新型杆状病毒表达载体的构建与分析》一文中研究指出【目的】构建携带有受杆状病毒多角体启动子控制的疱疹性口腔炎病毒糖蛋白(vesicular stomatitis virus glycoprotein,VSVG)和受白斑综合症病毒极早期基因(immediately-early gene1,ie1)启动子控制的绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)两个表达阅读框的新型重组病毒vAc-G-EGFP,分析其在无脊椎动物和脊椎动物细胞系中表达报道基因的能力。【方法】利用Bac-To-Bac系统构建重组杆状病毒,利用病毒感染或转导实验介导报道基因在待测细胞系中的表达,用荧光显微镜和免疫印迹技术分析报道基因在待测细胞系中的实时表达情况。【结果】成功构建了分别含VSVG和ie1启动子两个阅读框的重组杆状病毒vAc-G-EGFP,发现vAc-G-EGFP可以在无脊椎和脊椎动物细胞系中有效表达报道基因EGFP,免疫印迹实验显示,在不同时间点EGFP于这两类细胞中的表达存在差异。【结论】基于白斑综合症病毒ie1启动子并携带有VSVG表达框的单一杆状病毒载体可以实现同时在不同种类细胞系中有效表达外源基因。本文构建的新型杆状病毒表达载体有希望普遍应用于基础和应用生物学研究。(本文来源于《微生物学报》期刊2009年09期）
高辉[9]（2007）在《含对虾白斑综合症病毒ie1启动子的重组杆状病毒介导的哺乳动物细胞基因转移》一文中研究指出随着携带哺乳动物细胞启动子的重组杆状病毒逐渐成为基因功能研究、非复制型载体疫苗研制以及开发基因治疗策略的一个非常有效的工具,寻找一种在昆虫细胞和哺乳动物细胞之间的穿梭启动子对于杆状病毒介导的基因转移方面的研究非常必要。在本研究中,我们利用对虾白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)的ie1启动子和杆状病毒ETL启动子以及杆状病毒多角体启动子,分别构建了含有不同启动子调控下的EGFP报告基因表达盒的重组杆状病毒,然后转导不同哺乳动物细胞,以检测不同启动子在细胞中的转导和表达效率。结果显示,WSSV的ie1启动子在昆虫细胞sf9中具有很强的启动子活性,能够控制报告基因的高效表达,同时在哺乳动物细胞中,ie1启动子与ETL启动子一样在不同哺乳动物细胞中均有活性,能够介导EGFP不同水平的表达,并且丁酸钠能够提高ie1启动子在哺乳动物细胞中的转导和表达效率。转移载体瞬时转染结果证实,ie1启动子能够直接启动外源基因在哺乳动物细胞中的表达,而不依赖于杆状病毒基因表达。本研究首次发现ie1是一种杆状病毒非依赖性、在昆虫细胞和哺乳动物细胞之间的新型穿梭启动子,该穿梭启动子对于杆状病毒表达载体在基因治疗和非复制型载体疫苗方面的研究将具有重要应用价值。(本文来源于《新疆农业大学》期刊2007-06-01）
张井增[10]（2006）在《南美白对虾对虾杆状病毒病的诊断与防治》一文中研究指出本文对对虾杆状病毒病的病原、流行情况、症状、诊断作了综述,对南美白对虾感染对虾杆状病毒病的预防提出了实用措施,对其治疗提出了原则措施。(本文来源于《北京水产》期刊2006年04期）
对虾杆状病毒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
根据Gen Bank中公布的对虾杆状病毒(Baculovirus penaei,BP)基因片段序列,设计1对特异性检测引物,建立快速检测凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)对虾杆状病毒的PCR方法。用该方法对BP阳性虾进行PCR扩增,结果得到380 bp的特异性扩增条带,与实验设计相符,而对白斑综合征病毒(WSSV)、桃拉病毒(TSV)、传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)阳性虾和健康虾的扩增结果为阴性。测序比对结果证实,该PCR方法检测结果准确,最低可检测出约1 pg的病毒DNA。利用建立的PCR方法对来自广东、广西、福建、海南和浙江的2 722份临床病料进行检测,共检出阳性病料133份,表明该PCR方法可用于对虾杆状病毒的临床快速检测。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
对虾杆状病毒论文参考文献
[1].史英力.以凡纳滨对虾β-actin基因启动子为元件的重组昆虫杆状病毒表达系统的建立[D].中国科学院研究生院(海洋研究所).2016
[2].雷燕,肖洋,张会军,张翔,王娟.凡纳滨对虾对虾杆状病毒PCR检测方法的建立及初步应用[J].广东海洋大学学报.2015
[3].雷燕,肖洋,戚瑞荣,张会军.南美白对虾对虾杆状病毒病的防治技术[J].科学养鱼.2015
[4].雷燕,唐绍林,戚瑞荣,胡壮涛,陈超.凡纳滨对虾对虾杆状病毒PCR检测方法的建立及初步应用[C].中国水产学会鱼病专业委员会2013年学术研讨会论文摘要汇编.2013
[5]..斑节对虾杆状病毒病[J].中国水产.2011
[6].刘鸿玲,刘敏,闫冬春.肝胰腺细小病毒和斑节对虾杆状病毒的PCR复合检测[J].水产科学.2011
[7]..对虾杆状病毒病[J].中国水产.2011
[8].吕利群,徐鸿绪,王浩.基于对虾白斑综合症病毒极早期启动子的新型杆状病毒表达载体的构建与分析[J].微生物学报.2009
[9].高辉.含对虾白斑综合症病毒ie1启动子的重组杆状病毒介导的哺乳动物细胞基因转移[D].新疆农业大学.2007
[10].张井增.南美白对虾对虾杆状病毒病的诊断与防治[J].北京水产.2006
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