岳军
湖南省邵阳市疾病预防控制中心湖南邵阳422000
【摘要】熊果酸是一种广泛存在于天然植物中的一种三萜类化合物，大量的研究发现，该物质具有抗癌、诱导癌细胞分化、抗血管生成的作用，它不仅能够有效抑制HL-60细胞增殖分化，诱导其凋亡，小鼠体内实验也表明熊果酸具有增强免疫的功能，因此，熊果酸的抗肿瘤作用是十分广泛的，极有可能成为一种新型低毒有效的抗癌药物推广使用。
【关键词】熊果酸；抗肿瘤；诱导凋亡；抑制增殖
【中图分类号】R979.1【文献标识码】B【文章编号】1764-8999（2015）7-0554-01
熊果酸是在抗炎性植物中提取出的一种三萜类化合物，广泛分布于自然界中，山楂中的熊果酸含量尤其高。熊果酸不仅对多种致癌物有抵抗作用，而且还可以抑制恶性肿瘤细胞的生长繁殖，因此，熊果酸的抗肿瘤作用逐渐受到人们的重视并成为临床研究的热点话题[1]。为进一步探讨熊果酸的抗肿瘤活性和作用效果，相关学者从山楂中提取熊果酸，以人体肝癌细胞和肉瘤细胞为作用对象，研究分析熊果酸对这恶性肿瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用，实验结果表明熊果酸对抑制肿瘤细胞和诱导凋亡具有显著作用。
1熊果酸抗肿瘤作用概述
熊果酸别名乌苏酸，是一种弱碱性化合物，存在于多种天然产物中，纯品熊果酸为白色针状结晶物质，味略苦，基本化学骨架为五环母核，易溶于吡啶和醇类物质中。熊果酸在自然界中分布广泛，山楂、熊果、枇杷叶、车前草、夏枯草、女贞子中都可见游离的熊果酸成分，其在上述天然植物中主要与糖结合，具有多种天然活性，日本已将其作为一种天然抗氧化物广泛应用于产品生产中。长期以来，熊果酸起初之所以受到广泛的关注和研究，是因为人们发现其具有明显的抗炎和抗血脂药物，并在临床动物实验中证实了其显著的抗肿瘤作用。熊果酸的抗肿瘤作用不仅体现在多种致肿瘤物的抵抗作用，更体现在恶性肿瘤细胞的抑制生长方面，因此，熊果酸的药理活性逐渐成为其研究重点。
2相关实验研究
肿瘤的形成受到多种因素的共同作用，已知多种成分均参与了肿瘤的诱发，因此，需要通过具体的实验才能更加全面的了解熊果酸的抗肿瘤活性作用。关于熊果酸的抗肿瘤活性和作用效果研究，一个重要的实验就是小鼠HepG2和S180肿瘤细胞实验，相关学者曾选取小鼠进行实验研究，采用比色法测定熊果酸体外抑制肿瘤细胞HepG2和S180的增殖作用，采用电泳法测定熊果酸对HepG2的诱导凋亡作用，研究结果证实熊果酸对HepG2和S180具有良好的体外增殖抑制作用，可诱导HepG2凋亡。小鼠实验中选用的实验材料有小鼠和胎牛血清，从山楂中提取纯化熊果酸，在pH为11的水中溶解稀释，采用分光光度法选取0.35mg/mL的溶液，冷藏无菌处理，并用生理盐水配制成所需浓度溶液。整个实验分为三个部分，一是增殖抑制实验，二是诱导凋亡实验，三是实体瘤作用研究。增殖抑制实验中需将肿瘤细胞置于胎牛血清中制成单细胞悬液，加入不同浓度的1640培养液中，依次加入5-二苯基四氮唑溴盐溶液和十二烷基硫酸钠，采用酶联免疫检测仪测定吸光值，结果发现与生理盐水对照组、白藜芦醇阳性对照组相比，熊果酸具有良好的肿瘤抑制作用，HepG224h半抑制浓度为16.5μg/mL，48h半抑制浓度为12.5μg/mL，S18024h半抑制浓度为16.2μg/mL，48h半抑制浓度为13.8μg/mL。诱导凋亡实验中需采用不同浓度的熊果酸分别处理HepG2细胞，紫外光下观察摄影琼脂凝胶上的电泳结果，结果表明熊果酸浓度越大，HepG2实体瘤抑制率越高，熊果酸用于小鼠实体瘤抑制，效果显著，具有量性关系。
山楂中熊果酸的含量高达0.46%，而且从山楂中提取熊果酸的工艺已相当纯熟，熊果酸浓度也较高。以往的熊果酸抗肿瘤性实验中，都是将其溶于二甲亚砜中，二甲亚砜毒性较强，会直接影响熊果酸正常发挥作用。本次实验以pH值为11的水代替二甲亚砜，可进一步提高实验精准度[2-4]。白藜芦醇是一种多酚类化合物，是继紫杉醇之后人们发现的有一种全新抗肿瘤药物[5-6]。白藜芦醇是通过抑制DNA增殖来发挥抗肿瘤作用，本次实验中特意将白藜芦醇作为阳性对照，从实验结果中可以明显的看出，熊果酸的抗肿瘤性要远远大于白藜芦醇。
从该实验研究结果可以看出，熊果酸对于恶性肿瘤细胞株HepG2和S180的细胞增殖具有明显抑制作用，而且还可以抑制实体瘤增殖，表明熊果酸在体内、体外均可正常发挥抗肿瘤作用。熊果酸的抑制作用可能与mRNA的转录表达有关。肿瘤细胞消退过程中，细胞凋亡具有重要地位，细胞凋亡的最显著变化是细胞内Ca2+、Mg2+等依赖性核酸内切酶的激活，内切酶被激活后可促使DNA双链迅速降解，形成核小体。目前的研究成果认为，判断细胞凋亡的主要指标是DNA琼脂上的核小体梯带。该研究结果充分说明熊果酸具有显著的抗肿瘤性，可通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡发生作用，由于该物质提取方式简单、来源广泛，有希望成为一种新型的抗肿瘤药物，并在临床实践中发挥巨大作用。
3熊果酸的抗肿瘤作用总结
熊果酸除了具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用，还具有抑制血管形成、抗侵袭、抗突变作用。肿瘤发生的一个重要标志是血管形成，这也是恶性肿瘤得以生长和转移的基础，因此，针对肿瘤的治疗，临床上一直在寻找能够有效抑制新血管形成的药物，研究发现，熊果酸的体外抑制血管发生作用经过了以下三个环节：内皮细胞增殖、迁移、分化，通过这三个环节能够达到抑制血管，发挥抗肿瘤的作用。肿瘤对人体的侵袭是一个多步骤的过程，其关键一步是侵袭基底膜，而熊果酸可以通过抑制NF-KB激活，下调MMP-9来发挥抗侵袭作用，此外，熊果酸还能够抑制与肿瘤侵袭转移相关尿激酶的活性。肿瘤细胞的发生与基因突变有直接关系，致癌物质是基因突变的诱发因素，有实验研究表明，熊果酸能够抑制畸变隐窝灶的形成，这种物质则是结肠癌的元凶，因此，熊果酸能够抗击结肠癌相关的突变诱因。熊果酸抗肿瘤的根本在于其抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡、抑制血管形成、抗侵袭、抗突变作用，除了上述原因外，还有一些辅助作用同样起到了抗肿瘤作用，如抗氧化作用，熊果酸的化学成分决定了其良好的抗氧化作用，作为一种氧化剂，其能捕获自由基，减少因自由基引起的基因突变，从而降低肿瘤的发生率。
4小结
从熊果酸的活性作用研究可以看出，熊果酸主要是通过抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡来发挥作用的，其在抗肿瘤方面的作用广泛，极有可能成为一种新型抗癌药物在临床中得到广泛应用。
参考文献
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[2]孙雅楠,李桂荣.熊果酸抗肿瘤机制及其在抗妇科恶性肿瘤中的研究进展[J].中国综合临床,2010,26(8):891-893.
[3]徐伟英,张敏丽,梁山武,等.熊果酸及其衍生物抗肿瘤作用的研究进展[J].中国药师,2012,15(12):1794-1796.
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基金项目：
湖南省教育厅青年项目资助（10B099）