论文摘要
猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒（PRV）引起猪的一种繁殖障碍性疫病,近年生产上该病发生有病毒变异的报道。为了解四川地区伪狂犬病毒流行野毒株生物学特性,首先,本研究从四川地区发病猪场采取病料,经过PK-15细胞稳定传代,分离获得一株疑似伪狂犬病毒毒株（命名为CHN-DJY2017）。其次,PCR鉴定能扩增出约288bp大小基因片段;负染电镜鉴定可见直径约100nm病毒粒子;家兔感染实验表现奇痒症状和急性死亡;感染小鼠呈急性经过,有明显病理学变化,致病力高;PRV阳性血清中和效价为1:47;TCID50高达10-9.23/ml;初步证明分离获得毒株为PRV。对该PRV毒株gC基因的氨基酸序列进行比对,发现与国内外分离株序列比较,其gC基因在第64位有7个连续的氨基酸序列（AAASTPA）插入;通过对TK、gC、gE、gB基因进行分析,发现分离株与国外分离株进行比对关系较远。最后,通过对该分离株的生物学特性鉴定结果表明,该毒株对外界抵抗力强,对热、紫外、甲醛等都有一定的抵抗力,对氯仿等脂溶剂敏感,属于有囊膜病毒。本研究对四川地区PRV流行毒株的生物学特性进行了鉴定和分析,对养猪生产的猪伪狂犬病防控具有重要的病原学指导意义。
论文目录
摘要abstract缩略词表第一部分 文献综述 1 伪狂犬病的病原特点 2 伪狂犬病的临床症状 3 狂犬病的流行情况 4 伪狂犬病的诊断与防治 5 PRV重要基因研究进展 6 研究目的与意义第二部分 实验研究 1 材料 1.1 生物材料 1.2 主要试剂 1.3 主要仪器设备 1.4 试剂的配制 2 方法 2.1 临床病料采集 2.2 疑似阳性病料检测 2.3 PK-15细胞的复苏与传代培养 2.4 病毒分离培养 2.5 病毒的纯化 2.6 PCR鉴定 2.7 负染透射电镜检测 2.8 细胞病变 2.9 家兔接种鉴定试验 2.10 伪狂犬病毒分离株重要基因序列分析 2.11血清中和实验 2.12 PRV病毒分离株噬斑检测50的测定'> 2.13 PRV病毒分离株TCID50的测定 2.14 PRV病毒分离株生长曲线的测定 2.15 PRV分离株耐热性实验 2.16 PRV分离株氯仿敏感性实验 2.17 PRV分离株甲醛灭活实验 2.18 PRV分离株紫外线照射实验 2.19 PRV分离株胰蛋白酶敏感实验 2.20 PRV病毒分离株致病力研究 3 结果 3.1 疑似病料PCR检测结果 3.2 gE保守区基因测序结果 3.3 分离株的致细胞病变作用 3.4 负染透射电镜观察结果 3.5 家兔感染实验 3.6 PRV部分基因测序结果 3.7 噬斑减少中和实验结果 3.8 噬斑检测结果50检测结果'> 3.9 TCID50检测结果 3.10 生长曲线结果 3.11 热灭活实验结果 3.12 紫外照射实验结果 3.13 胰酶敏感性实验结果 3.14 氯仿敏感性实验结果 3.15 甲醛灭活实验结果 3.16 病理切片观察结果50实验结果'> 3.17 小鼠LD50实验结果 4 讨论 5 小结第三部分 全文结论 1 结论 2 创新点致谢参考文献附录 1 gC基因测序结果 2 TK基因测序结果 3 gE基因测序结果 4 gG基因测序结果 5 gB基因测序结果 6 gC基因氨基酸序列分析结果作者简历
文章来源
类型: 硕士论文
作者: 姚子璇
导师: 曹三杰,常建辉
关键词: 猪伪狂犬病毒,病毒分离,生物学特性,鉴定
来源: 四川农业大学
年度: 2019
分类: 基础科学,农业科技
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 四川农业大学
分类号: S852.651
DOI: 10.27345/d.cnki.gsnyu.2019.000946
总页数: 71
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标签：猪伪狂犬病毒论文; 病毒分离论文; 生物学特性论文; 鉴定论文;
