导读:本文包含了衰老相关半乳糖苷酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:线粒体靶向,荧光探针,苯硫酚,β-半乳糖苷酶
衰老相关半乳糖苷酶论文文献综述
刘琪梦[1]（2019）在《线粒体靶向的苯硫酚荧光探针、衰老相关β—半乳糖苷酶荧光探针的构建以及生物成像研究》一文中研究指出作为细胞的“能量工厂”,线粒体是高毒性环境污染物苯硫酚优先进攻的靶标,同时与痕量苯硫酚残留引起的致病活性氧(ROS)的产生有关。为了实时、准确的监测这些过程,本文开发一种能高灵敏检测线粒体内苯硫酚的荧光探针。检测衰老细胞有助于阐明衰老相关过程以及诊断衰老相关疾病等。衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)作为一种溶酶体水解酶,是目前应用最广泛的细胞衰老生物标志物。但是,在生物体中检测SA-β-gal时,非衰老相关β-gal通常会产生一定的干扰。考虑到SA-β-gal与其它非衰老相关β-gal所处的溶酶体pH有可能不同,本文开发一种能识别溶酶体pH的β-gal荧光探针。具体内容如下:(1)本文开发了一种新型半罗丹明半荧光素(rhodol)染料ROAP,并以此为荧光团、2,4-二硝基苯基为识别基团、吡啶盐为线粒体定位基团,构建了线粒体靶向的苯硫酚荧光探针ROAL。该探针对苯硫酚有高的选择性和灵敏度,且检出限低至8.1 nM。共定位实验表明探针ROAL具有良好的定位线粒体的能力,其皮尔森相关系数高达0.95,从而实现了特异性检测线粒体内苯硫酚。此外,本文还将探针ROAL应用于苯硫酚刺激的固定细胞和活细胞中进行成像研究,结果发现固定细胞显示出强荧光,而活细胞显示出弱荧光,说明苯硫酚会诱导活细胞的线粒体产生活性氧,并且产生的活性氧又能消除苯硫酚。(2)本文以pH敏感的半花菁染料CPH为骨架,β-半乳糖苷键为识别位点,构建了一种可识别溶酶体pH的β-gal荧光探针CA。由于溶酶体的pH范围为4.0-6.0,米曲霉β-半乳糖苷酶(A.oryzaeβ-gal)的活性最适pH为4.0-5.0,大肠杆菌β-半乳糖苷酶(E.coilβ-gal)的活性最适pH为7.4,所以在体外实验中,本文选择A.oryzaeβ-gal和E.coilβ-gal共同验证探针CA的pH敏感性。探针CA与A.oryzaeβ-gal反应显示出绿色荧光,与E.coilβ-gal反应显示出红色荧光,结果表明CA在不同pH下均能检测β-gal,并且呈现出不同的荧光信号,证明探针CA的确可同时检测溶酶体pH和β-gal。本文还将探针CA应用在卵巢癌细胞SKOV-3和不同衰老程度的人胚肺成纤维细胞MRC-5中成像β-gal,实验结果表明探针CA不仅能区分成像SA-β-gal和SKOV-3β-gal,而且也成功监测了细胞的衰老过程。(本文来源于《西北大学》期刊2019-05-01）
肖霞,陈泽卡,丁有权,李轩漾,齐建国[2]（2016）在《慢性失神经后衰老相关β-半乳糖苷酶在成年大鼠施万细胞的表达》一文中研究指出目的探讨成年大鼠长时程轴突缺失对大鼠施万细胞中衰老相关β-半乳糖苷酶(senescenceassociated beta galactosidase,SA-β-gal)表达的影响。方法成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、1周失神经组、2周失神经组、4周失神经组、5周失神经组、6周失神经组、7周失神经组和8周失神经组。各组动物进行右侧坐骨神经永久性横断手术或者相应的假手术,根据各组设定的远侧段失神经时间分别获取损伤神经的5mm近侧段和10mm远侧段以及假手术组同侧神经和手术组对侧神经的对应节段,采用SA-β-gal染色检测SA-β-gal的表达,并对8周失神经组大鼠获取的损伤神经标本用SA-β-gal和施万细胞特异性蛋白(S100β)双标染色分析远侧段神经中SA-β-gal表达的细胞定位。结果成年大鼠右侧坐骨神经永久横断后,近侧段神经的远端SA-β-gal表达在2周一过性增加,而远侧段神经中SA-β-gal表达在2周明显增加,并且在更长的失神经过程中保持这种高表达水平。而且,绝大部分SA-β-gal的表达出现在S100β免疫反应阳性的施万细胞中。结论长时程轴突缺失增加成年大鼠施万细胞中SA-β-gal表达。(本文来源于《四川大学学报(医学版)》期刊2016年03期）
蒋智文,陈维春,郑慧玲,袁源,刘新光[3]（2015）在《siRNA沉默COMMD1后对HEK293细胞衰老相关β-半乳糖苷酶活性的影响》一文中研究指出目的在HEK293细胞中筛选能有效沉默铜离子代谢结构域包含体1(COMMD1)基因表达的si RNA片段,并研究si RNA沉默COMMD1后对HEK293细胞衰老的影响。方法用RT-PCR初步筛选能够沉默COMMD1的si RNA干扰片段,用定量PCR和免疫印迹法进一步确认si RNA的干扰效果,然后用衰老相关β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测si RNA沉默COMMD1后对HEK293细胞衰老的影响。结果si COMMD1-1对HEK293细胞中COMMD1的沉默效率最高;但si COMMD1-1沉默COMMD1后,未见HEK293细胞的衰老相关β-半乳糖苷酶活性出现显着性改变。结论 si COMMD1-1沉默HEK293细胞中COMMD1的表达后,未能提高HEK293细胞的衰老相关β-半乳糖苷酶活性。(本文来源于《广东医学院学报》期刊2015年04期）
陶丽丽,雷燕[4]（2012）在《人参、叁七、川芎提取物对血管平滑肌细胞衰老相关β半乳糖苷酶及p16-cyclinD/CDK-Rb通路的影响》一文中研究指出目的:观察人参、叁七、川芎提取物延缓自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)衰老的作用及其可能的细胞周期调控机制。方法:取大鼠胸主动脉用于分离VMSC,采用原代细胞培养的方法建立SHR大鼠VMSC模型,实验分为Wistar-Kyoto(WKY)大鼠对照组、SHR模型组、缬沙坦组、中药低剂量组和中药高剂量组。采用衰老相关β半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色法观察细胞衰老情况,流式细胞仪分析细胞周期分布,逆转录聚合酶链式反应和蛋白质印迹法检测各组细胞p16、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase4,CDK4)和成视网膜母细胞瘤蛋白(retinoblastoma protein,Rb)的表达。结果:SA-β-gal染色显示,与WKY组比较,SHR组SA-β-gal阳性细胞数明显增多(P<0.01),人参、叁七、川芎提取物可使SHR VSMC SA-β-gal阳性细胞数明显减少(P<0.01);流式细胞仪检测显示,与WKY组比较,SHR组VSMC在G1期明显减少,S期细胞明显增加,中药干预后SHR的VSMC G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少(P<0.05);实时荧光定量聚合酶链式反应检测显示,与WKY组比较,SHR组VSMC的p16和Rb mRNA表达量明显减少,cyclin D1和CDK4mRNA表达增加;人参、叁七、川芎提取物干预后SHR VSMC p16和Rb mRNA表达量增加,cyclin D1和CDK4mRNA减少。蛋白质印迹法显示,与WKY组比较,SHR组VSMC的p16蛋白表达量明显减少,cyclin D1、CDK4和磷酸化Rb蛋白表达量明显增加(P<0.05);中药干预后SHR VSMC p16蛋白表达增加,cyclin D1、CDK4和磷酸化Rb蛋白表达量减少(P<0.05)。结论:人参、叁七、川芎提取物通过改变p16-cyclin D/CDK-Rb通路因子的表达而发挥延缓SHR VSMC衰老的作用。(本文来源于《中西医结合学报》期刊2012年01期）
李良军,雷光华,涂敏,程超,陈霞光[5]（2011）在《骨关节炎软骨中衰老相关β-半乳糖苷酶和c-Fos蛋白的表达》一文中研究指出背景:文献在对软骨细胞衰老的研究中,常以衰老相关β-半乳糖苷酶的表达作为其细胞老化的一个指标,而c-Fos在骨关节炎软骨中表达情况罕见报道。目的:观察β-半乳糖苷酶、c-Fos蛋白在正常关节软骨和骨关节炎不同退变程度关节软骨中表达水平的差异。方法:选取正常关节软骨标本10个,骨关节炎软骨标本26个,根据大体观察凿取正常和骨关节炎不同退变严重程度软骨块50个,再根据关节软骨改良Mankin病理评分法分为正常关节软骨组、轻度退变组、中度退变组、重度退变组。采用免疫组织化学SABC法,计算各组标本中软骨细胞β-半乳糖苷酶、c-Fos蛋白染色阳性细胞率,比较各组中二者阳性细胞率的差异性并分析其与关节软骨不同退变程度之间的相关性。结果与结论:随着衰老软骨细胞阳性率逐渐增加,软骨退变程度逐渐加重,提示软骨细胞衰老与骨关节炎病程进展有关,软骨细胞衰老是骨关节炎可能的发病机制之一。c-Fos蛋白与骨关节炎软骨退变严重程度和软骨细胞衰老均无直接相关性,但可能在软骨退变早中期促进软骨细胞代偿性分裂增殖活跃。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2011年02期）
莫显刚,罗兴林,严斌[6]（2009）在《不同年龄大鼠VSMCs培养及衰老相关β-半乳糖苷酶的表达》一文中研究指出目的:培养出不同年龄组SD大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs),探讨VSMCs复制衰老过程。方法:取出主动脉,0.2%Ⅱ型胶原酶溶液消化分离细胞,培养,按比例1:3传代。免疫细胞化学鉴定平滑肌细胞α-actin。制备老年组、年轻组的第2、6、11代细胞爬片,用SA-β-gal工作液染色,显微镜下计数蓝染细胞阳性,计算衰老细胞率。结果:免疫细胞化学染色显示细胞纯度在95%以上。细胞衰老β-半乳糖苷酶染色显示随代龄增加,衰老细胞数量增加(P<0.05);第6、11代龄,老年组衰老细胞率较年轻组高。结论:1.单纯Ⅱ型胶原酶消化法可以成功培养出不同年龄组大鼠主动脉VSMCs。2.培养的SD大鼠VSMCs表现出复制衰老过程,这可能为探讨细胞衰老及其与年龄相关的疾病机制提供新的视角。(本文来源于《泸州医学院学报》期刊2009年02期）
邢文英,金辉,丁一[7]（2008）在《衰老相关-β-半乳糖苷酶和P16在老年大鼠脾内的表达及意义》一文中研究指出目的:研究衰老相关-β-半乳糖苷酶和P16在老年大鼠脾内的表达及意义。方法:采用组织化学及SABC免疫组织化学检测成年及老年Wistar大鼠脾组织内衰老相关-β-半乳糖甘酶及P16蛋白的表达。结果:衰老相关-β-半乳糖苷酶阳性细胞主要分布于脾内的边缘区及脾索,老年大鼠较成年大鼠阳性细胞数量显着增多。P16阳性细胞也主要分布于脾内的边缘区及脾索;与成年鼠相比,老年大鼠P16阳性细胞显着增多。结论:P16和衰老相关-β-半乳糖苷酶在大鼠脾内高表达,可能与脾的衰老相关。(本文来源于《解剖学杂志》期刊2008年04期）
李良军[8]（2008）在《骨关节炎关节软骨中衰老相关β-半乳糖苷酶和c-Fos蛋白的表达及意义》一文中研究指出目的:研究SA-beta-gal、c-Fos蛋白在正常关节软骨和骨关节炎不同退变程度关节软骨中表达水平的差异,探讨SA-beta-gal、c-Fos蛋白与OA软骨退变程度的相关性及其在骨关节炎发病过程中的可能作用,为进一步明确骨关节炎的发病机制提供线索。方法:选取正常关节软骨标本10个,骨关节炎软骨标本26个,根据大体观察凿取正常和OA不同退变严重程度软骨块50个,再根据关节软骨改良Mankin病理评分法进行分组,正常关节软骨标本9个(A组),OA软骨轻度退变标本10个(B组),OA软骨中度退变标本15个(C组),OA软骨重度退变标本13个(D组)(有3个标本因脱片或取材失误予以排除)。采用免疫组化SABC法,计算各组标本中软骨细胞SA-beta-gal、c-Fos蛋白染色阳性细胞率,比较各组中二者阳性细胞率的差异性并分析其与关节软骨不同退变程度之间的相关性。结果:1.A组无SA-beta-gal染色阳性软骨细胞,B组SA-beta-gal染色阳性细胞率为13.00±5.77%,C组SA-beta-gal染色阳性细胞率为31.65±6.91%,D组SA-beta-gal染色阳性细胞率为51.95±6.21%,各组之间SA-beta-gal染色阳性细胞率差异具有显着性(P＜0.05)。2.A组c-Fos蛋白染色阳性细胞率为1.08±1.39%,B组c-Fos蛋白染色阳性细胞率为25.76±8.81%,C组c-Fos蛋白染色阳性细胞率为36.70±4.22%,D组c-Fos蛋白染色阳性细胞率为12.37±8.85%,各组之间c-Fos蛋白染色阳性细胞率差异具有显着性(P＜0.05)。在软骨细胞增多、紊乱、细胞成簇的区域c-Fos蛋白表达增多。3.软骨中SA-beta-gal阳性细胞率与改良Mankin病理评分呈正相关(r=0.940,p＜0.05),c-Fos蛋白阳性细胞率与改良Mankin病理评分无明显相关性(r=0.275,P＞0.05),SA-beta-gal阳性细胞率与c-Fos蛋白阳性细胞率无明显相关性(r=0.164,P＞0.05)。结论:1.软骨细胞衰老是OA可能的发病机理之一。2.随着衰老软骨细胞阳性率逐渐增加,软骨退变程度逐渐加重,软骨细胞衰老与OA病程进展有关。3.c-Fos蛋白与OA软骨退变严重程度和软骨细胞衰老均无直接相关性,但可能在软骨退变早中期促进软骨细胞代偿性分裂增殖活跃。(本文来源于《中南大学》期刊2008-05-01）
张静,丁一,史学义,邢文英[9]（2000）在《不同类型标本的衰老相关β-半乳糖苷酶染色方法》一文中研究指出目的 :研究衰老相关 β 半乳糖苷酶 (SA β Gal)组化染色在不同类型组织切片中的应用。方法 :比较血涂片、冰冻切片及石蜡切片在不同条件下SA β Gal的显色效果。结果与结论 :冰冻切片结果良好 ;石蜡切片经抗原修复后 ,结果不及未经抗原修复者 ;血涂片以 40g/L多聚甲醛固定 45min者效果最佳。SA β Gal可用于不同类型的组织标本。(本文来源于《河南医科大学学报》期刊2000年04期）
衰老相关半乳糖苷酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨成年大鼠长时程轴突缺失对大鼠施万细胞中衰老相关β-半乳糖苷酶(senescenceassociated beta galactosidase,SA-β-gal)表达的影响。方法成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、1周失神经组、2周失神经组、4周失神经组、5周失神经组、6周失神经组、7周失神经组和8周失神经组。各组动物进行右侧坐骨神经永久性横断手术或者相应的假手术,根据各组设定的远侧段失神经时间分别获取损伤神经的5mm近侧段和10mm远侧段以及假手术组同侧神经和手术组对侧神经的对应节段,采用SA-β-gal染色检测SA-β-gal的表达,并对8周失神经组大鼠获取的损伤神经标本用SA-β-gal和施万细胞特异性蛋白(S100β)双标染色分析远侧段神经中SA-β-gal表达的细胞定位。结果成年大鼠右侧坐骨神经永久横断后,近侧段神经的远端SA-β-gal表达在2周一过性增加,而远侧段神经中SA-β-gal表达在2周明显增加,并且在更长的失神经过程中保持这种高表达水平。而且,绝大部分SA-β-gal的表达出现在S100β免疫反应阳性的施万细胞中。结论长时程轴突缺失增加成年大鼠施万细胞中SA-β-gal表达。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
衰老相关半乳糖苷酶论文参考文献
[1].刘琪梦.线粒体靶向的苯硫酚荧光探针、衰老相关β—半乳糖苷酶荧光探针的构建以及生物成像研究[D].西北大学.2019
[2].肖霞,陈泽卡,丁有权,李轩漾,齐建国.慢性失神经后衰老相关β-半乳糖苷酶在成年大鼠施万细胞的表达[J].四川大学学报(医学版).2016
[3].蒋智文,陈维春,郑慧玲,袁源,刘新光.siRNA沉默COMMD1后对HEK293细胞衰老相关β-半乳糖苷酶活性的影响[J].广东医学院学报.2015
[4].陶丽丽,雷燕.人参、叁七、川芎提取物对血管平滑肌细胞衰老相关β半乳糖苷酶及p16-cyclinD/CDK-Rb通路的影响[J].中西医结合学报.2012
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[6].莫显刚,罗兴林,严斌.不同年龄大鼠VSMCs培养及衰老相关β-半乳糖苷酶的表达[J].泸州医学院学报.2009
[7].邢文英,金辉,丁一.衰老相关-β-半乳糖苷酶和P16在老年大鼠脾内的表达及意义[J].解剖学杂志.2008
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[9].张静,丁一,史学义,邢文英.不同类型标本的衰老相关β-半乳糖苷酶染色方法[J].河南医科大学学报.2000