agrB/D/C对Agr系统活性及金黄色葡萄球菌毒力的影响

论文摘要

目的:构建金黄色葡萄球菌（金葡菌）ΔagrB/D/C/Newman敲除株,分析agrB/D/C对Agr系统活性及金葡菌毒力的影响,为深入研究不同型别Agr系统对金黄色葡萄球菌的致病作用提供依据.方法:利用同源重组技术,以pBT2为敲除载体,构建ΔagrB/D/C/Newman敲除株,检测野生株和敲除株的溶血能力,色素形成能力,生物膜形成能力及毒力基因表达.结果:成功构建了ΔagrB/D/C/Newman敲除株,与野生株Newman相比,敲除株溶血能力显著降低,色素形成能力显著降低,生物膜形成能力显著增加;敲除株培养上清中的蛋白种类和数量较野生株显著减少;实时荧光定量PCR（RT-PCR）结果显示ΔagrB/D/C/Newman敲除株毒力因子的转录水平较野生株显著降低.结论:agrB/D/C能够影响AgrA的表达从而影响Agr系统的功能,agrB/D/C基因敲除后显著改变毒力因子的表达水平.

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验材料
•     1.1.1 细菌
•     1.1.2 主要试剂和实验仪器
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 引物设计
•     1.2.2 ΔagrB/D/C/Newman敲除株的构建
•     1.2.3 生物学特性分析
•     1.2.4 SDS-PAGE分析
•     1.2.5 实时荧光定量PCR（RT-PCR）
•   1.3 统计学方法
• 2 结果
•   2.1 ΔagrB/D/C/Newman敲除株的筛选与鉴定
•   2.2 ΔagrB/D/C/Newman敲除株生物学特性
•   2.3 ΔagrB/D/C/Newman敲除株培养上清蛋白
•   2.4 qRT-PCR测定毒力因子转录水平
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王海连,姜北,喻胜鹏,黎庶,胡晓梅,谭利

关键词: 金黄色葡萄球菌,毒力因子,蛋白水平

来源: 暨南大学学报(自然科学与医学版) 2019年06期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 基础医学

单位: 清华大学玉泉医院保健科,陆军军医大学西南医院烧伤科,陆军军医大学西南医院骨科,陆军军医大学微生物学教研室

基金: 国家自然科学基金项目(31470241,31570127,31900118)

分类号: R378

页码: 486-493

总页数: 8

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