MDGPV PT株E-box缺失感染性克隆的构建及生物学特性分析

论文摘要

为获得含有缺失突变体病毒全基因组的番鸭小鹅瘟病毒（MDGPV）PT株缺失病毒并分析其生物学特性,本试验以含有MDGPV PT株全长感染性DNA克隆的质粒pMDGPVPT为模板,通过重叠延伸PCR方法将5′末端倒置重复序列（5′-ITR）第287位E盒基序（E-box）缺失,获得感染性重组质粒pPT△E287。pPT△E287经卵黄囊接种转染9日龄番鸭胚后拯救出缺失病毒rPT△E287。生物学特性试验显示,rPT△E287感染番鸭胚后能够引起特征性病变,与其亲本病毒株PT相比,rPT△E287的毒价及其在番鸭胚中增殖能力有所下降。本试验为进一步了解5′-ITR中E-box的缺失与MDGPV致病力之间的关系奠定基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 引物设计与合成
•   1.3 缺失E287的重组质粒pPT△E287的构建
•   1.4 感染性克隆DNA的转染与间接免疫荧光 （IFA） 检测
•   1.5 拯救病毒生物特性分析
•     1.5.1 拯救病毒基因E287缺失处转录因子结合位点的预测
•     1.5.2 病毒ELD50的测定
•     1.5.3 亲本病毒与拯救病毒复制能力的比较
• 2 结果
•   2.1 E287缺失全长DNA质粒的鉴定
•   2.2 拯救病毒的鉴定
•   2.3 拯救病毒基因△E287处转录因子结合位点预测
•   2.4 亲本病毒与拯救病毒半数致死量 （ELD50） 测定及其生长曲线的比较
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王劭,肖世峰,程晓霞,江丹丹,林锋强,朱小丽,陈仕龙,陈少莺

关键词: 番鸭,小鹅瘟病毒,盒基序,感染性克隆

来源: 中国兽医学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心

基金: 国家自然科学基金青年基金资助项目(31402236),福建省自然科学基金资助项目(2016J01138)

分类号: S852.65

DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.06.10

页码: 1099-1103

总页数: 5

文件大小: 951K

下载量: 96