导读:本文包含了乳鼠心肌细胞培养论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:心肌,细胞,大鼠,胶原酶,蛋白,激酶,凋亡。
乳鼠心肌细胞培养论文文献综述
王佳南,林建安,杜苗苗[1]（2018）在《乳鼠心肌细胞原代培养方法的再改良》一文中研究指出目的探求优化的原代培养乳鼠心肌细胞方法。方法 2017年6月1日—2017年6月2日选取泉州市医学高等专科学校提供6只出生24 h内Wistar乳鼠,采用2种不同消化心肌组织的方法,对照组予0.125%胰酶+0.05%I型胶原酶+0.1%Ⅱ型胶原酶逐次消化心肌组织;试验组予0.05%I型胶原酶+0.1%Ⅱ型胶原酶消化数次后再单予0.125%胰酶快速消化心肌组织;比较两组取得的心肌细胞数量以及存活率,免疫荧光测肌钙蛋白鉴定纯度。结果 2种方法均得到心肌细胞数量多[对照组(103.3±4.4),试验组(105.8±5.0)],差异无统计学意义(t=-0.911,P=0.384);细胞即刻存活率试验组明显高于对照组,试验组达91.87%,对照组即刻存活率仅68.07%,差异有统计学意义(χ~2=81.0,P=0.025)。试验组存活率明显高于对照组。结论再改良方法提取心肌细胞,可获得存活率高、活力好的心肌细胞。(本文来源于《中外医疗》期刊2018年33期）
位庚,梁俊清,姚兵,郭志方[2]（2018）在《通心络干预的心肌微血管内皮细胞条件培养液对大鼠心肌细胞凋亡的影响》一文中研究指出目的:探讨受损的心肌微血管内皮细胞对大鼠心肌细胞凋亡的影响及通心络的干预作用。方法:制备3种心肌微血管内皮细胞条件培养液:正常心肌微血管内皮细胞(RCMECs)条件培养液,同型半胱氨酸(Hcy)诱导损伤的RCMECs条件培养液和通心络干预的RCMECs条件培养液。将大鼠胚胎H9c2心肌细胞分为4组:(1)正常对照组:弃去原培养基,换为无血清细胞培养基(DMEM);(2)N-CM组:弃去原培养基,换为正常RCMECs条件培养液;(3)H-CM组:弃去原培养基,换为Hcy诱导损伤的RCMECs条件培养液;(4)T-CM组:弃去原培养基,换为通心络干预的RCMECs条件培养液。JC-1试剂检测细胞线粒体膜电位(MMP);流式细胞仪检测细胞活性氧簇(ROS)水平;活细胞成像系统动态观察各组心肌细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞色素-C(Cyt-C)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞白血病淋巴瘤-2相关x蛋白(Bax)和B细胞白血病/淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白表达。结果:与正常对照组的心肌细胞比较,N-CM组心肌细胞MMP、ROS、Cyt-C蛋白表达及凋亡无明显变化(P>0.05);与N-CM组比较,H-CM组心肌细胞MMP降低,ROS生成增加,凋亡增加,Cyt-C、Caspase-3和Bax蛋白表达上调(P均<0.01),Bcl-2蛋白表达下调(P<0.01);与H-CM组比较,T-CM组细胞MMP升高,ROS生成减少,凋亡减少,Cyt-C、Caspase-3和Bax蛋白表达下调(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达上调(P<0.01)。结论:损伤的心肌微血管内皮细胞条件培养液可诱导心肌细胞凋亡,通心络可抑制该过程。(本文来源于《中国循环杂志》期刊2018年03期）
马艳霞,郭政[3]（2017）在《去甲肾上腺素对原代培养大鼠心肌细胞的凋亡率及相关蛋白的影响》一文中研究指出目的观察去甲肾上腺素(NE)对体外培养的原代新生大鼠心肌细胞凋亡率及相关凋亡蛋白的影响。方法选用出生1-3 d的SD大鼠建立原代培养新生大鼠心肌细胞模型。将培养72 h的心肌细胞随机分为对照组(未使用任何药物)与不同浓度NE组(分别采用10~(-8),10~(-7),10~(-6),10~(-5),10~(-4)mol/L NE),每组3孔(n=3)。加药后3 h采用流式细胞术测定心肌细胞凋亡率;采用Western blot检测Cry AB及Bcl-2、Bax及Bcl-2/Bax比值的变化。结果与对照组比较,10~(-8),10~(-7),10~(-6),10~(-5),10~(-4)mol/L NE作用下心肌细胞凋亡率均出现显着升高(均P<0.05);Cry AB表达下降(均P<0.05),Bcl-2表达下降(除10-8mol/L组外均P<0.05)、Bax表达升高(除10-7mol/L组外均P<0.05),Bcl-2/Bax比值下降(均P<0.05)。结论去甲肾上腺素可能通过降低Cry AB、Bcl-2表达,升高Bax表达,降低Bcl-2/Bax比值,诱导体外原代培养大鼠心肌细胞的凋亡率增加。(本文来源于《山西医科大学学报》期刊2017年12期）
赵勇,刘晓伟,林治宇,马雷,徐振宇[4]（2017）在《新生SD大鼠心肌细胞的原代培养》一文中研究指出目的:探讨乳鼠原代心肌细胞的培养方法,简便稳定地获得高存活率和纯度的心肌细胞。方法:无菌条件下取1~3d内新生SD大鼠的心室肌组织,首先用胰蛋白酶消化心肌组织一次,再用I型胶原酶短时多次消化,然后应用差速贴壁分离法和化学试剂抑制法纯化心肌细胞。对心肌细胞进行形态学观察、存活率检测和免疫荧光鉴定。结果:台盼蓝染色检测心肌细胞存活率在95%以上。培养24h后的心肌细胞已贴壁生长,呈梭形及多边形,有自发性搏动,48h后细胞伪足相互交织成网,进而形成细胞簇,呈现同步性搏动。免疫荧光鉴定心肌细胞纯度达96%。结论:此种方法能够可靠地获得较高存活率和纯度的原代乳鼠心肌细胞。(本文来源于《黑龙江医药科学》期刊2017年06期）
孙凤杰,佟德民,卢小炎,董文斌,邓长柏[5]（2017）在《体外培养胎鼠心肌细胞方法的优化》一文中研究指出目的探讨体外培养胎鼠心肌细胞方法的优化。方法取孕19日SD胎鼠分离心肌细胞进行原代培养,采用0.8 g/L胰蛋白酶和0.4 g/L 2型胶原蛋白酶联合消化后,以多次差速分离,不同种类的动物血清(胎牛血清组、马血清组)改良心肌细胞培养条件。倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态及搏动频率、免疫荧光细胞化学染色分别检测α-横纹肌辅肌动蛋白(α-SA)与心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)鉴定胎鼠心肌细胞及培养24、48、72、96 h的心肌细胞纯度。结果心肌细胞接种24 h,可见大部分贴壁细胞和少量的悬浮细胞,亦见少许搏动的心肌细胞;48、72、96 h,马血清组心肌细胞α-肌动蛋白及cTnⅠ阳性率明显高于胎牛血清组。结论采用胰蛋白酶和2型胶原蛋白酶联合消化和马血清更易培养出胎鼠心肌细胞。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2017年11期）
胡君,熊存全,周红成,吴争鸣[6]（2016）在《新生SD大鼠心肌细胞的原代分离和培养》一文中研究指出目的:建立简便有效的心肌细胞分离和原代培养方法,获得具有理想数量和活性的原代心肌细胞。方法:无菌条件下取出生72h内的新生SD大鼠心脏,去除心肌结缔组织和心房组织,只保留左心室,采用胰酶和胶原酶Ⅰ联合消化、差速贴壁分离的方法,获得心肌细胞进行体外培养,观察细胞的形态变化,对细胞的搏动频率、搏动细胞数进行统计分析。结果:分离的原代心肌细胞生长良好,核仁清晰可见。高倍镜下观察,心肌细胞接种12h后,少数细胞贴壁生长,且贴壁的少数单个细胞出现自发搏动,之后搏动细胞数以及细胞搏动频率都逐渐增加,接种48h后细胞完全铺展开来并连接成片,自发搏动呈现同步性和岛屿状。结论:本实验方法获得的新生SD大鼠心肌细胞生长状态好,细胞存活率和自发搏动性高,操作简单,重复性好,是一种理想、可靠的原代心肌细胞培养方法。(本文来源于《健康之路》期刊2016年09期）
孙伟夫,刘洋,康永亮,孟亚楠,于淼[7]（2016）在《心肌康注射液对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤保护作用的实验研究》一文中研究指出目的:探讨心肌康注射液对乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用。方法:实验分正常组、模型组、心肌康1.5 g/L组、心肌康3.0 g/L组4组,细胞培养3 d后,分别进行相应的处理,观察心肌细胞的搏动频率,分光光度法测定心肌细胞LDH(乳酸脱氢酶)含量,细胞化学染色观察心肌细胞LDH及SDH(琥珀酸脱氢酶)活性。结果:与正常组比较,模型组心肌细胞搏动频率明显减少;心肌康注射液2组心肌细胞搏动频率明显增加,与模型组比较,差异具统计学意义(P<0.05)。与正常组比较,模型组心肌细胞LDH及SDH活性明显降低,LDH含量明显升高;心肌康2组心肌细胞LDH及SDH活性较模型组显着增强,LDH含量明显降低,统计学处理差异显着(P<0.05)。结论:心肌康注射液对心肌细胞缺氧缺糖性损伤具有保护作用。(本文来源于《中国中医药科技》期刊2016年04期）
牛楠,宋佳卉,赵殷奇,王浩,朱明星[8]（2016）在《缺氧培养下NRF-1基因对大鼠心肌细胞线粒体膜电位的影响》一文中研究指出目的通过建立NRF-1基因过表达及shRNA干扰大鼠心肌细胞系探究NRF-1基因在缺氧条件下对线粒体膜电位的影响。方法采用RT-PCR克隆大鼠心肌细胞中的NRF-1基因并将其连接至p CDHMCS-EF1-Puro慢病毒载体,以p CDH-MCS-EF1-Puro空质粒作为对照,同时设计并合成干扰慢病毒载体;将重组质粒与包装质粒一同转染293T细胞,收集病毒颗粒后感染H9c2细胞并通过嘌呤霉素筛选获得稳定转染的细胞株;在1%O2、5%CO2、94%N2条件下培养转染的细胞株48h,使用CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测线粒体膜电位。结果获得NRF-1过表达细胞株、空载体细胞株及shRNA干扰细胞株;缺氧条件下叁组细胞存活率均减弱,与空病毒组细胞相比,NRF-1过表达组细胞活力较高,shRNA干扰组的细胞活力最弱;另外,流式细胞术检测线粒体膜电位发现缺氧培养后线粒体膜电位下降。与空病毒组细胞相比,NRF-1过表达细胞株线粒体膜电位下降较轻,shRNA干扰细胞株线粒体膜电位下降最明显。结论说明大鼠心肌细胞通过NRF-1基因的过表达可以减缓由缺氧造成的线粒体膜电位的下降,提高细胞在缺氧条件下的存活能力。(本文来源于《宁夏医科大学学报》期刊2016年06期）
张慧[9]（2016）在《β3-AR对体外培养鼠心肌细胞肥大的影响及机制研究》一文中研究指出目的体外培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,用携带β3-AR受体基因的慢病毒转染心肌细胞,在此基础上用去甲肾上腺素(NE)诱导心肌细胞,建立心肌肥厚模型:(1)观察使用携带β3-AR基因的慢病毒转染心肌细胞是否可以有效提高心肌细胞β3-AR的表达;(2)观察β3-AR对心肌肥厚的影响;(3)探讨β3-AR是否通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径影响心肌肥大,为心肌细胞的实验研究提供更多参考方法,为β3-AR对心肌肥厚的影响的研究提供更多理论基础。方法体外培养SD大鼠乳鼠心室肌细胞,细胞培养24h后,分别以转染复数(multiplicity of infection,MOI)20、50、80、100转染只携带绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)的慢病毒(空病毒),慢病毒转染心肌细胞72h后,在倒置荧光显微镜下观察细胞中绿色荧光蛋白GFP表达情况,以确定慢病毒转染心肌细胞的最佳转染复数。心肌细胞以最佳MOI值转染携带β3-AR基因慢病毒24h后,用去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)诱导心肌细胞48h,建立体外心肌肥厚模型。实验分4组:(1)空白对照组(Control组):不转基因,常规培养细胞;(2)心肌肥厚组(NE组):不转基因,常规培养细胞+NE(2μmol/L)处理细胞48h;(3)β3-AR基因转染+NE组(β3-AR组):以携带β3-AR基因的慢病毒转染心肌细胞+NE(2μmol/L)处理细胞48h;(4)空病毒转染+NE组(空病毒组):用只携带GFP基因的慢病毒(空病毒)转染心肌细胞+NE(2μmol/L)处理细胞48h。用免疫荧光法鉴定心肌细胞,倒置荧光显微镜观察病毒转染组绿色荧光蛋白(GFP)表达,免疫印迹法(Western Blot)和q RT-PCR方法检测β3-AR、丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)、细胞外信号调控激酶(ERK1/2)及原癌基因c-myc、c-fos蛋白水平和RNA水平的表达。结果(1)原代心肌细胞鉴定:免疫荧光法鉴定心肌细胞,分离培养的心肌细胞纯度可达95%以上;(2)慢病毒转染效果的检测:以不同MOI的慢病毒转染心肌细胞,在倒置荧光显微镜下观察,计算荧光阳性细胞百分比,发现MOI=50时病毒转染率最高。Western Blot检测各组细胞中β3-AR蛋白表达水平,与NE组和空病毒转染组相比,病毒转染组β3-AR表达增加(P<0.05),结果说明构建的β3-AR慢病毒可以有效提高原代心肌细胞中β3-AR的表达;(3)过表达β3-AR对心肌肥厚的影响:病毒转染24h后,用NE诱导细胞48h,用Western Blot和q RT-PCR方法检测原癌基因c-myc、c-fos表达变化。与空白对照组相比,NE组、β3-AR组、空病毒组c-myc、c-fos蛋白水平和RNA水平的表达均上调(P<0.05),其中β3-AR组明显高于NE组(P<0.05),说明随β3-AR表达增加,心肌肥厚加重;(4)β3-AR表达增高影响MAPK通路的激活:Western Blot检测各组细胞p38MAPK和ERK1/2磷酸化水平,q RT-PCR检测各组细胞中p38MAPK和ERK的m RNA表达,结果显示NE组、β3-AR组、空病毒组的p38MAPK、MEK/ERK蛋白磷酸化水平和RNA表达明显高于对照组(P<0.05),其中β3-AR转染组p38MAPK、MEK、ERK1/2表达高于NE组(P<0.05),说明β3-AR表达增加可激活MAPK通路,促进心肌肥厚的病理过程,β3-AR表达影响了MAPK通路激活。结论(1)携带β3-AR基因的慢病毒转染心肌细胞可使心肌细胞有效高表达β3-AR;(2)在体外β3-AR过表达可促进NE诱导的心肌肥厚;(3)在体外β3-AR过表达可能通过激活MAPK通路介导心肌肥厚。(本文来源于《石河子大学》期刊2016-06-01）
吴丹,冯健,莫显刚,刘应才[10]（2016）在《改良的乳小鼠心肌细胞原代培养方法》一文中研究指出目的建立一种稳定而快速的乳小鼠心肌细胞的原代培养方法。方法用多聚赖氨酸预包被处理培养皿,采用两步法(0.25%胰酶4℃过夜,0.5 mg/m L-1.0 mg/m L II型胶原酶+5 mg/m L白蛋白的胶原消化液37℃短时多次消化),通过差速贴壁70 min+5-溴脱氧尿嘧啶的使用来纯化心肌细胞。倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态变化,台盼蓝染色法检测细胞存活率,α-actinin特异性免疫荧光染色鉴定心肌细胞并计算纯度。结果心肌细胞形态良好,自发搏动,细胞成活率可达到98%,纯度可达到95%。结论本方法培养的心肌细胞存活率高,纯度高,是一种理想的心肌细胞原代培养方法。(本文来源于《中国比较医学杂志》期刊2016年04期）
乳鼠心肌细胞培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨受损的心肌微血管内皮细胞对大鼠心肌细胞凋亡的影响及通心络的干预作用。方法:制备3种心肌微血管内皮细胞条件培养液:正常心肌微血管内皮细胞(RCMECs)条件培养液,同型半胱氨酸(Hcy)诱导损伤的RCMECs条件培养液和通心络干预的RCMECs条件培养液。将大鼠胚胎H9c2心肌细胞分为4组:(1)正常对照组:弃去原培养基,换为无血清细胞培养基(DMEM);(2)N-CM组:弃去原培养基,换为正常RCMECs条件培养液;(3)H-CM组:弃去原培养基,换为Hcy诱导损伤的RCMECs条件培养液;(4)T-CM组:弃去原培养基,换为通心络干预的RCMECs条件培养液。JC-1试剂检测细胞线粒体膜电位(MMP);流式细胞仪检测细胞活性氧簇(ROS)水平;活细胞成像系统动态观察各组心肌细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞色素-C(Cyt-C)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞白血病淋巴瘤-2相关x蛋白(Bax)和B细胞白血病/淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白表达。结果:与正常对照组的心肌细胞比较,N-CM组心肌细胞MMP、ROS、Cyt-C蛋白表达及凋亡无明显变化(P>0.05);与N-CM组比较,H-CM组心肌细胞MMP降低,ROS生成增加,凋亡增加,Cyt-C、Caspase-3和Bax蛋白表达上调(P均<0.01),Bcl-2蛋白表达下调(P<0.01);与H-CM组比较,T-CM组细胞MMP升高,ROS生成减少,凋亡减少,Cyt-C、Caspase-3和Bax蛋白表达下调(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达上调(P<0.01)。结论:损伤的心肌微血管内皮细胞条件培养液可诱导心肌细胞凋亡,通心络可抑制该过程。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
乳鼠心肌细胞培养论文参考文献
[1].王佳南,林建安,杜苗苗.乳鼠心肌细胞原代培养方法的再改良[J].中外医疗.2018
[2].位庚,梁俊清,姚兵,郭志方.通心络干预的心肌微血管内皮细胞条件培养液对大鼠心肌细胞凋亡的影响[J].中国循环杂志.2018
[3].马艳霞,郭政.去甲肾上腺素对原代培养大鼠心肌细胞的凋亡率及相关蛋白的影响[J].山西医科大学学报.2017
[4].赵勇,刘晓伟,林治宇,马雷,徐振宇.新生SD大鼠心肌细胞的原代培养[J].黑龙江医药科学.2017
[5].孙凤杰,佟德民,卢小炎,董文斌,邓长柏.体外培养胎鼠心肌细胞方法的优化[J].细胞与分子免疫学杂志.2017
[6].胡君,熊存全,周红成,吴争鸣.新生SD大鼠心肌细胞的原代分离和培养[J].健康之路.2016
[7].孙伟夫,刘洋,康永亮,孟亚楠,于淼.心肌康注射液对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤保护作用的实验研究[J].中国中医药科技.2016
[8].牛楠,宋佳卉,赵殷奇,王浩,朱明星.缺氧培养下NRF-1基因对大鼠心肌细胞线粒体膜电位的影响[J].宁夏医科大学学报.2016
[9].张慧.β3-AR对体外培养鼠心肌细胞肥大的影响及机制研究[D].石河子大学.2016
[10].吴丹,冯健,莫显刚,刘应才.改良的乳小鼠心肌细胞原代培养方法[J].中国比较医学杂志.2016
论文知识图
