导读:本文包含了产毒素多杀性巴氏杆菌论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:毒素,杆菌,巴氏,基因,白痢,沙门氏菌,菌株。
产毒素多杀性巴氏杆菌论文文献综述
钱坤[1]（2019）在《猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因的克隆与表达研究》一文中研究指出多杀性巴氏杆菌可以直接引起猪肺疫、禽霍乱、牛出血性败血症、猪萎缩性鼻炎等病症,对养殖业影响非常大。据调查研究显示,皮肤坏死外毒素是产毒素多杀性巴氏杆菌的重要因此和保护性抗原。基于此,重点研究猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因克隆与表达。(本文来源于《畜禽业》期刊2019年11期）
江涛,谭春萍,任灵芝,黄百花,刘文娟[2]（2010）在《猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌毒素基因的原核表达》一文中研究指出参照GenBank收录的产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因序列(AF240778),设计一对引物,从猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌中扩增出toxA编码区3 858 bp的片段,将其克隆至原核表达载体PET-32a,转入大肠埃希菌BL21(DE3)中进行融合表达多杀性巴氏杆菌毒素。SDS-PAGE和Western blot分析证实,该表达产物以包涵体形式存在,大小约175 ku。动物试验结果表明,重组蛋白具有良好的免疫原性、反应原性及一定的生物学活性。通过间接ELISA方法检测抗毒素的猪阳性血清,表达重组蛋白较天然蛋白具有更高的特异性,为多杀性巴氏杆菌毒素进一步应用奠定了基础。(本文来源于《动物医学进展》期刊2010年12期）
邵立明,杨桂连,王春凤[3]（2010）在《猪产毒素多杀性巴氏杆菌OmpH基因工程乳酸菌的制备》一文中研究指出利用已分离的菌株,根据NCBI上的序列(U52208)设计一对引物,PCR方法扩增猪源多杀性巴氏杆菌的外膜蛋白基因(ompH),克隆到载体Pmd18-T,用PSIP-409构建了原核表达载体PSIP-409-ompH,电转化到植物乳杆菌nc8中并诱导表达。(本文来源于《第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集（下册）》期刊2010-08-01）
黄百花,刘文娟,李志勇,谭春萍,周松峰[4]（2010）在《猪D型产毒素多杀性巴氏杆菌毒素分段基因的原核表达》一文中研究指出根据GenBank已发表的产毒素多杀性巴氏杆菌(T+Pm)toxA基因序列(AF240778)设计1对引物,从猪源D型T+Pm中扩增出toxA基因片段(3858 bp),再根据toxA基因序列设计3对引物,分别扩增出ZQ(1084 bp)、ZH(1092 bp)、HM(906 bp)3个分段基因,将其克隆至原核表达载体pET32a,转入大肠杆菌BL21中进行融合表达。经SDS-PAGE和West-ern blotting检测分析,发现ZQ、HM基因的表达产物以包涵体形式存在,大小分别为75、50 kDa,ZH基因不表达。动物试验结果表明,HM重组蛋白具有良好的免疫原性、反应原性及一定的生物学活性,而ZQ重组蛋白没有免疫原性、反应原性及生物学活性。通过间接ELISA的方法检测抗毒素的阳性猪血清,结果表明,HM重组蛋白较天然蛋白具有更高的特异性。(本文来源于《广西农业科学》期刊2010年06期）
段龙川[5]（2010）在《产毒素多杀性巴氏杆菌重组沙门氏菌基因工程疫苗的研究》一文中研究指出猪进行性萎缩性鼻炎(Swine progressive atrophic rhinitis, PAR),主要是由D型产毒素多杀性巴氏杆菌(toxigenic Pasteurella multocida, T+Pm)引起的猪的呼吸道疾病,该病给养猪业造成较大经济损失。疫苗免疫是预防该病的主要手段,随着分子生物学的发展,新型的基因工程疫苗被广泛用于动物传染病的预防。本研究以徐引弟博士构建的沙门氏菌缺失株C501为载体,将产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因C端免疫原性片段通过构建重组质粒电转化C501,获得产毒素多杀性巴氏杆菌重组沙门氏菌基因工程疫苗菌株。主要研究内容如下：1.重组菌株的构建及其生物学特性的研究参照产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因序列(NO. AY864768),设计引物扩增toxA基因C端,构建无抗性原核表达质粒pYA-toxAc,并电转沙门氏菌C501,获得重组菌株C501 (pYA-toxAc)。该重组菌株可以稳定遗传表达外源基因片段,且表达产物不影响沙门氏菌自身生长特性、表型及生化特性；重组菌株毒力较亲本株C500下降约2倍左右。2.重组菌株对小鼠的免疫保护效力研究将重组菌株C501 (pYA-toxAc)分别通过口服和皮下注射两种方式免疫小鼠,间隔14天加强免疫一次,第28天分别用猪霍乱沙门氏菌C78-1株10×LD50口服攻毒和产毒素多杀性巴氏杆菌HN-13株5×LD50腹腔攻毒。试验结果表明,皮下免疫重组菌可以刺激小鼠产生针对沙门氏菌和toxAc较高的IgG抗体和较低的IgA抗体；口服免疫获得较高的IgA抗体,而IgG抗体较低。无论口服或皮下免疫小鼠均可以对猪霍乱沙门氏菌的攻击提供100%保护,皮下方式免疫小鼠对产毒巴氏杆菌的攻击为80%的保护,口服组为60%的保护,对照组80%死亡。3.重组菌株对猪的免疫试验选取10头产毒素多杀性巴氏杆菌与沙门氏菌血清学和病原学均为阴性的断奶仔猪，随机分为2组,每组5头。以3×109CFU/头的剂量颈部肌肉注射免疫,间隔14天进行第二次免疫,对照组采用20%氢氧化铝作为空白对照。首免、二免后14天,分别采血,检测血清中沙门氏菌和产生针对toxAc的IgG抗体水平。试验结果表明免疫猪可以产生针对沙门氏菌和toxAc外源抗原的IgG抗体,OD(630)值分别为2.135和1.351。(本文来源于《华中农业大学》期刊2010-06-01）
李伟杰,赵耘,杜昕波,康凯,陈敏[6]（2010）在《产毒素多杀性巴氏杆菌菌落双重PCR检测方法的建立》一文中研究指出为建立快速特异的PCR方法以及同时检测并区分产毒素与非产毒素多杀性巴氏杆菌,本研究根据GenBank登录的多杀性巴氏杆菌KMT1基因和toxA毒素基因序列,设计合成了2对特异引物。特异性试验表明产毒素多杀性巴氏杆菌C51-6扩增出了460bp和1854bp的2条目的片段,而不产毒素多杀性巴氏杆菌、大肠埃希菌、胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌、支气管败血波氏杆菌、副猪嗜血杆菌和鸡白痢沙门菌的扩增均为阴性;敏感性试验表明该PCR方法能从含450CFU的菌液中扩增出相应的目的片段。同时用豚鼠皮肤坏死试验和小鼠致死试验对该PCR方法进行了验证。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2010年04期）
李伟杰,赵耘,杜昕波,康凯,陈敏[7]（2010）在《产毒素多杀性巴氏杆菌的鉴定》一文中研究指出采用菌落多重PCR方法对分离保存的28株多杀性巴氏杆菌进行种型和毒素基因的检测,结果表明,菌株C51-6、M-4和P-2237为产毒素多杀性巴氏杆菌,菌株C51-6和P-2237为荚膜血清D型,菌株M-4为荚膜血清A型。同时用金黄色葡萄球菌抑制试验、中性吖啶黄沉淀试验和豚鼠皮肤坏死试验对PCR方法进行了验证。基于对甘露醇、卫茅醇、山梨醇、海藻糖的发酵能力和产生鸟氨酸脱羧酶的特性,3株菌株鉴定为多杀性巴氏杆菌多杀亚种。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2010年01期）
李伟杰,赵耘,杜昕波,康凯,陈敏[8]（2009）在《产毒素多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立》一文中研究指出引言产毒素多杀性巴氏杆菌分泌产生一种由toxA基因编码,约146 ku的皮肤坏死毒素DNT,该毒素由1285个氨基酸组成。目前该菌临床感染的诊断还没有合适的血清学方法。细菌形态观察、生化试验及毒素的豚鼠皮肤坏死试验、小鼠致死试验、细胞毒性试验操作繁琐、费时耗材。本研究旨在建立快速特异的PCR方法,以同时检测并区分产毒素多杀性巴氏杆菌与不产毒素多杀性巴氏杆菌。(本文来源于《中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集（下册）》期刊2009-10-11）
汤细彪,吴斌,刘国平,杨明柳,罗勇[9]（2007）在《应用巢氏PCR方法快速检测猪鼻拭子样品中产毒素多杀性巴氏杆菌》一文中研究指出根据产毒素多杀性巴氏杆菌的toxA基因序列,设计了2对特异性引物,扩增的片段大小分别为864和447 bp,从而建立了一种能直接从猪鼻拭子中快速检测产毒素多杀性巴氏杆菌的巢氏PCR方法。该方法能检出26CFU菌量以上的模板DNA,且不能从猪的其它7种常见病原菌扩增到特异性条带。通过对5个不同地区阳性猪群中采集的146份临床鼻拭子样品进行巢氏PCR检测和细菌分离鉴定,结果2种方法同时为阳性的样品有44份,同时为阴性的样品有97份,另有5份样品只有巢氏PCR检测为阳性,巢氏PCR检测与细菌分离鉴定的符合率为96.58%。试验表明:巢氏PCR方法能快速、灵敏地从猪鼻拭子样品中检出产毒素多杀性巴氏杆菌,适合临床进行大规模病原学检测,具有良好的应用前景。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2007年10期）
梁媛[10]（2007）在《猪萎缩性鼻炎A型产毒素多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及其单克隆抗体的制备和初步鉴定》一文中研究指出本试验采用传统的细菌分离方法及生化鉴定从我区的5个规模化猪场采集来的266份断奶仔猪的鼻拭子中，分离到80株多杀性巴氏杆菌(Pm)，并且运用豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验检测出其中产毒素多杀性巴氏杆菌(DNT~+Pm)9株，分别命名为DNT~+Pm—A、DNT~+Pm—B、DNT~+Pm—C、DNT~+Pm—D、DNT~+Pm—E、DNT~+Pm—F、DNT~+Pm—G、DNT~+Pm—H、DNT~+Pm—Ⅰ。并通过对9株DNT~+Pm所对应的9头猪的鼻部横断面检查证实这9株DNT~+Pm确为引起萎鼻的病原菌。经改良Carter氏法初步鉴定其中的DNT~+Pm—C株为荚膜A型DNT~+Pm。最后将DNT~+Pm—C株送广西区防检站用API细菌自动化生化鉴定仪鉴定后确为Pm。应用单克隆抗体(McAb)技术，将灭活后荚膜A型的DNT~+Pm—C株免疫BALB／C小鼠，取免疫鼠脾细胞与SP2／0进行细胞融合，经间接ELISA法筛选，有限稀释法克隆3次，最终获得3株稳定分泌抗DNT~+Pm—C抗体的McAb杂交瘤细胞株，分别命名为2D_1E_8、4A_(11)B_2、7E_3G_9，并接种小鼠腹腔生产McAb腹水，间接ELISA测其效价为1∶1600至1∶12800不等。这3株McAb在-80℃超低温下保存3个月后复苏仍然能够稳定分泌抗体。用免疫荧光(IFA)、Dot—ELISA、ACI—ELISA等试验方法对3株McAb进行了初步鉴定。IFA试验对McAb的特异性检测结果表明，2D_1E_8、4A_(11)B_2、7E_3G_9均能与DNT~+Pm—C株产生特异性荧光，尤以7E_3G_9荧光最强，效价最高，达1∶1280；Dot—ELISA检测3株McAb与金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌、链球菌不同菌种间的抗原交叉性反应，以及与9株DNT~+Pm间的抗原交叉性反应，结果显示3株McAb与DNT~+Pm发生反应，而与金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌、链球菌不同菌种的细菌不发生反应；其中以7E_3G_9的特异性最强。用3株McAb(2D_1E_8、4A_(11)B_2、7E_3G_9)分别包被酶标板，通过ACI—ELISA检测了9份鼻腔分泌物中的DNT~+Pm抗原，与临床剖检的符合率达到100％，说明3株McAb均能有效的识别猪只鼻腔内的DNT~+Pm抗原；各株McAb与SDS处理前后的DNT~+Pm—C株抗原均有反应，推测3株McAb针对的抗原表位可能都是线性表位。有望用作萎鼻的快速诊断试剂盒。(本文来源于《广西大学》期刊2007-06-01）
产毒素多杀性巴氏杆菌论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
参照GenBank收录的产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因序列(AF240778),设计一对引物,从猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌中扩增出toxA编码区3 858 bp的片段,将其克隆至原核表达载体PET-32a,转入大肠埃希菌BL21(DE3)中进行融合表达多杀性巴氏杆菌毒素。SDS-PAGE和Western blot分析证实,该表达产物以包涵体形式存在,大小约175 ku。动物试验结果表明,重组蛋白具有良好的免疫原性、反应原性及一定的生物学活性。通过间接ELISA方法检测抗毒素的猪阳性血清,表达重组蛋白较天然蛋白具有更高的特异性,为多杀性巴氏杆菌毒素进一步应用奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
产毒素多杀性巴氏杆菌论文参考文献
[1].钱坤.猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因的克隆与表达研究[J].畜禽业.2019
[2].江涛,谭春萍,任灵芝,黄百花,刘文娟.猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌毒素基因的原核表达[J].动物医学进展.2010
[3].邵立明,杨桂连,王春凤.猪产毒素多杀性巴氏杆菌OmpH基因工程乳酸菌的制备[C].第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集（下册）.2010
[4].黄百花,刘文娟,李志勇,谭春萍,周松峰.猪D型产毒素多杀性巴氏杆菌毒素分段基因的原核表达[J].广西农业科学.2010
[5].段龙川.产毒素多杀性巴氏杆菌重组沙门氏菌基因工程疫苗的研究[D].华中农业大学.2010
[6].李伟杰,赵耘,杜昕波,康凯,陈敏.产毒素多杀性巴氏杆菌菌落双重PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报.2010
[7].李伟杰,赵耘,杜昕波,康凯,陈敏.产毒素多杀性巴氏杆菌的鉴定[J].中国畜牧兽医.2010
[8].李伟杰,赵耘,杜昕波,康凯,陈敏.产毒素多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立[C].中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集（下册）.2009
[9].汤细彪,吴斌,刘国平,杨明柳,罗勇.应用巢氏PCR方法快速检测猪鼻拭子样品中产毒素多杀性巴氏杆菌[J].畜牧兽医学报.2007
[10].梁媛.猪萎缩性鼻炎A型产毒素多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及其单克隆抗体的制备和初步鉴定[D].广西大学.2007
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