白桦反义CCoAOMT基因调控木质素生物合成

白桦反义CCoAOMT基因调控木质素生物合成

论文摘要

白桦是我国北方重要的造林树种,但其中的高木质素含量严重制约了它作为造纸资源植物的开发利用。本文利用RACE技术获得了白桦咖啡酰辅酶A-3-O-甲基转移酶(CCoAOMT)基因全长ORF序列,并构建了白桦CCoAOMT基因的反义表达载体,通过农杆菌介导法将其导入到白桦中。PCR检测表明反义CCoAOMT基因已整合到白桦的基因组中。对转化植株的半定量PCR检测显示转基因株系的CCoAOMT基因表达量下降;Wiesner染色发现,与野生型相比,转基因植株木质素含量有所下降。对七年生的转基因白桦和野生型对照进行了化学成分分析,结果表明转基因白桦的苯醇抽提物和Klason木质素显著减少,聚戊糖含量升高。上述结果暗示BpCCoAOMT基因参与白桦木质素的合成,反义表达该基因后木质素含量减少,更易于去除。白桦CCoAOMT基因对木质素的合成起重要作用,这为培育低木质素含量的制浆新品种白桦奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 基因克隆
  •   1.3 植物反义表达载体构建
  •     1.3.1 农杆菌介导的遗传转化和转基因白桦的再生
  •   1.4 转化植株的分子检测
  •   1.5 转基因白桦的组织化学检测
  •   1.6 转基因白桦的原料化学组分测定
  • 2 实验结果
  •   2.1 白桦CCo AOMT基因c DNA全长序列的获得
  •   2.2 反义表达载体的构建
  •   2.3 抗性转基因植株的获得
  •   2.4 转化白桦的检测和分析
  •     2.4.1 转基因白桦DNA水平的PCR检测结果
  •     2.4.2 转基因白桦的RT-PCR检测结果
  •   2.5 木质素的组织化学染色
  •   2.6 化学成分分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 姚连梅,胡晓晴,周菲,郑要强,王国东,刘雪梅

    关键词: 基因,反义,白桦,木质素,染色,转基因

    来源: 植物研究 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,林业

    单位: 东北林业大学,黑龙江省农业科学院经济作物所

    基金: 中央高校基本科研业务费专项基金E类项目(2572015EA05)~~

    分类号: Q943.2;S792.153

    页码: 123-130

    总页数: 8

    文件大小: 3616K

    下载量: 212

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