肠道病毒71型3A蛋白肽段抗体的制备

论文摘要

目的制备肠道病毒71型（EV-A71）3A蛋白的肽段抗体。方法利用ExPasy和DNAstar软件对EV-A71 3A蛋白的跨膜结构域、二级结构、亲水性及疏水性等生物学特性进行分析,设计并合成2条14个氨基酸的多肽。用钥孔戚血蓝蛋白（keyhole limpet hemocyanin,KLH）偶联肽段作为抗原分别免疫Balb/c小鼠,免疫结束后取小鼠全血分离血清,用免疫印迹实验（Western blot）对血清中的3A蛋白抗体进行鉴定。结果 Western blot结果显示,第一条3A蛋白的多肽不能刺激小鼠产生特异性抗体,而第二条多肽能够刺激小鼠产生特异性抗体。结论成功制备特异性较好的3A肽段抗体,为进一步研究3A蛋白提供了工具。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 实验动物
•     1.1.2 主要试剂
•     1.1.3 仪器设备
•   1.2 方法
•     1.2.1 多肽的设计、合成与偶联
•     1.2.2 多肽抗体的制备
•     1.2.3 多肽抗体的免疫印迹实验（Western blot, WB）
•       1.2.3. 1 抗原及抗体准备
•       1.2.3. 2 免疫印迹实验
•     1.2.4 间接免疫荧光试验(indirect
• 2 结果
•   2.1 3A蛋白免疫用多肽的设计
•   2.2 抗原多肽的合成、纯化及鉴定
•   2.3 多肽抗体的制备与WB鉴定
•   2.4 多肽抗体的IFA鉴定
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 邹欣然,吴静,郑蔚,顾佳奇,茅凌翔

关键词: 人肠道病毒型,蛋白,多克隆抗体

来源: 中国病毒病杂志 2019年04期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 江苏大学附属人民医院检验科,江苏大学医学院

基金: 国家自然科学基金(81601751),江苏省青年医学人才计划(QNRC2016453),江苏省“333”工程科研项目(BRA2017144)

分类号: R392

DOI: 10.16505/j.2095-0136.2019.0042

页码: 263-267

总页数: 5

文件大小: 1365K

下载量: 54