一、乳腺癌中组织蛋白酶-D表达水平与预后的关系（论文文献综述）
张程鹏[1]（2021）在《超灵敏检测组织蛋白酶B活性的多重循环信号放大方法的研究》文中研究说明半胱氨酸组织蛋白酶是一类位于细胞溶酶体囊泡内的蛋白酶,其主要功能是介导蛋白质水解。作为组织蛋白酶家族的重要成员之一,组织蛋白酶B是唯一同时具有内肽酶和外肽酶活性的蛋白酶。它可以识别氨基酸特定位点肽键,使细胞粘附蛋白失活,激活其他蛋白酶（如层粘连蛋白）,降解细胞外基质,并从实体肿瘤中释放转移细胞,实现癌细胞的侵袭和转移。组织蛋白酶B与多种疾病密切相关,如关节炎,心血管疾病、肺癌、结肠癌等。组织蛋白酶B的表达模式的改变、蛋白水解活性失调及定位变化可破坏正常生物组织或细胞的稳态,参与肿瘤疾病过程的关键步骤,驱动癌症在肿瘤微环境中的进展。因此,组织蛋白酶B正成为一种有前途的肿瘤生物标志物,其浓度和分布可用于指导癌症的诊断分析。组织蛋白酶B的检测方法主要包括亲和力测定法和活性测定法,但是这些试验通常需要特异性抗体,并且存在耗时、灵敏度差、样品消耗量大等问题。因此,组织蛋白酶B的灵敏、准确检测对癌症的早期诊断和治疗至关重要。运用纳米材料如多肽-DNA偶联物、磁珠,通过多重循环信号放大技术,我们建立了一种简单的检测组织蛋白酶B活性的荧光方法。我们设计了两个具有多个结构域的DNA模板,用于DNA链的延伸与消化,通过结合核糖核酸酶H辅助扩增,将组织蛋白酶B活性转化为可测量的荧光信号。该方法操作简便,耗时短且不涉及任何热循环。该方法有以下几种特点:第一,将含有氨基酸残基的引物DNA翻译成不含氨基酸残基的新引物DNA,可以完全消除核酸扩增过程中的空间位阻效应;第二,多个链置换反应诱导循环周期信号放大;第三,核糖核酸酶H驱动的信号探针循环消化可进一步放大荧光信号。该方法可以灵敏检测组织蛋白酶B活性,检出限极低,为8.1皮克每毫升,动态范围大,从0.01到100纳克每毫升,达到4个数量级。该方法可在单细胞水平上测定人宫颈癌细胞系（HeLa细胞）中组织蛋白酶B的活性,可进一步用于组织蛋白酶B抑制剂的筛选。
李凯[2]（2021）在《异欧前胡素（ISO）通过miR-3619调控CSTB和CSTD诱导角质形成细胞黑色素降解的作用研究》文中研究说明背景:色素沉着性疾病是黑色素代谢紊乱引起的一种常见皮肤病,严重影响患者的心理和社会活动。对此类疾病的发病机制及其治疗措施成为当下研究热点。黑色素代谢包括合成、转运和降解三个步骤。当前对于黑色素合成和转运研究较多,而对黑色素降解的机理知之甚少。异欧胡前素（isoimperatorin,ISO）是伞形科植物兴安白芷根部的关键成分,具有抑制黑色素生物合成必需酶酪氨酸酶活性的作用,然而ISO是否影响黑色素降解还不明确。本课题研究了ISO对人角质细胞中黑色素降解的作用及其机制,为ISO作为降解黑色素类美白剂提供理论基础。目的:1.研究ISO对黑色素含量的调控作用;2.研究ISO对黑色素降解相关酶活力和表达的调控作用;3.研究mi R-3619靶向调控组织蛋白酶B（cathepsin B,CTSB）和组织蛋白酶D（cathepsin D,CTSD）的表达;4.阐明ISO调控mi R-3619进而影响CSTB和CSTD表达和酶活力的作用机制。方法:第一部分,1.使用黑素小体和梯度浓度（0、2、4、8、16、32μg/m L）ISO处理Ha Ca T细胞,MTT法检测处理后0h、24h、48h、72h细胞活力。2.使用黑素小体和梯度浓度（0、2、4、8μg/m L）IS O处理Ha Ca T细胞,Elisa检测细胞黑色素含量。3.使用黑素小体和梯度浓度（0、2、4、8μg/m L）ISO处理Ha Ca T细胞,Western Blot（WB）检测细胞中PMEL17蛋白表达水平。4.使用黑素小体和8μg/m L ISO处理Ha Ca T细胞,生化法和Western Blot法分别检测细胞碱性磷酸酶、组织蛋白酶B、组织蛋白酶D和组织蛋白酶L2四种重要溶酶体酶活性和蛋白表达水平。第二部分,1.构建CTSB和CTSD基因的sh-RNA干扰载体,使用sh-NC、sh-CTSB、sh-CTSD转染Ha Ca T细胞,quantitative Realtime PCR（q PCR）和WB分别检测细胞中CTSB和CTSD m RNA和蛋白表达水平,以评价sh-RNA干扰载体的效率。2.使用黑素小体和8μg/m L ISO处理Ha Ca T细胞后,使用sh-NC、sh-CTSB、sh-CTS D转染细胞,Elisa检测细胞中黑色素的含量。3.使用黑素小体和8μg/m L ISO处理Ha Ca T细胞后,使用sh-NC、sh-CTSB、sh-CTS D转染细胞,WB检测细胞中PMEL17的表达。第三部分,1.利用在线工具Target Scan预测可能同时以CSTB和CSTD为靶点的mi RNAs。2.使用黑素小体和8μg/m L ISO处理Ha Ca T细胞,q PCR检测上述预测mi RNA的表达水平。3.使用mimics NC、mi R-3619 mimics、inhibitor NC、mi R-3619 inhibitor转染Ha Ca T细胞,q PCR检测细胞中mi R-3619的表达水平,以评价mimics和inhibitor效率。4.使用mimics NC、mi R-3619 mimics、inhibitor NC、mi R-3619 inhibitor转染Ha Ca T细胞,WB检测CSTB和CTSD蛋白的表达水平。5.使用黑素小体和8μg/m L ISO处理Ha Ca T细胞后,使用mimics NC、mi R-3619 mimics、inhibitor NC、mi R-3619 inhibito r转染细胞,Elisa检测细胞中黑色素含量。6.使用黑素小体和8μg/m L IS O处理Ha Ca T细胞后,使用mimics NC、mi R-3619 mimics、inhibitor NC、mi R-3619 inhibitor转染细胞,WB检测细胞中PMEL17的表达。7.构建CTS B和CTS D基因3’UT R萤光素酶报告基因载体（wt-CTSB,wt-CTSD）,使用点突变法构建突变型萤光素酶报告基因载体（mut-CTSB,mut-CTSD）。将mimics NC、mi R-3619 mimics、inhibitor NC、mi R-3619 inhibitor分别与wt-CTSB或mut-CTSB共转染293 T细胞,检测萤光素酶活性;将mimics NC、mi R-3619 mimics、inhibitor NC、mi R-3619 inhibitor分别与wt-CTSD或mut-CTSD共转染293 T细胞,检测萤光素酶活性。结果:第一部分,1.1、2、4、8μg/m L ISO对Ha Ca T细胞活力无影响,16、32μg/m L IS O在48 h和72 h使细胞活力降低,表明16、32μg/m L ISO影响细胞生长,不适合使用该浓度开展后续研究。2.1、2μg/m L ISO对Ha Ca T细胞黑色素含量无影响,4、8μg/m L ISO使细胞黑色素含量减少。3.1、2μg/m L ISO对Ha Ca T细胞PMEL17蛋白表达量无影响,4、8μg/m L ISO使细胞PMEL17蛋白表达量降低,表明4、8μg/m L ISO是较为合适的浓度。4.8μg/m L ISO对Ha Ca T细胞AP C和CTSL2酶活力无影响,使CTSB和CTSD酶活力升高。5.8μg/m L IS O对Ha Ca T细胞AP C和CTSL 2蛋白表达无影响,使CTS B和CTS D蛋白表达升高。第二部分,1.sh-CTSB和sh-CTSD分别使Ha Ca T细胞中CTS B和CTSD的m RNA和蛋白表达降低,表明sh-CTSB和sh-CTSD可以用于后续实验。2.sh-CTSB和sh-CTSD分别使Ha Ca T细胞中黑色素含量增加。3.sh-CTSB和sh-CTSD分别使Ha Ca T细胞中PMEL1 7蛋白表达升高。第三部分,1.预测到可能靶向CTSB的mi RNA 202个,可能靶向CTSD的mi RNA 49个,同时靶向CTSB和CTSD的mi RNA有16个。2.ISO使Ha Ca T细胞中mi R-24-3p、mi R-96-5p、mi R-149-5p、mi R-892b、mi R-661表达升高,mi R-940、mi R-3619、mi R-140表达降低,其中mi R-3619降低幅度最大。3.mi R-3619 mimics使Ha Ca T细胞中mi R-3619表达升高,mi R-3619 inhibitor使Ha Ca T细胞中mi R-3619表达降低,表明mi R-3619 mimics和mi R-3619 inhibitor可以用于后续实验。4.mi R-3619 mimics使Ha Ca T细胞中CTSB和CTSD蛋白表达降低,mi R-3619 inhibitor使Ha Ca T细胞中CTSB和CTSD蛋白表达升高,表明mi R-361 9可以调控CTS B和CTS D表达。5.mi R-3619 mimics使Ha Ca T细胞中黑色素含量增加,mi R-3619inhibitor使Ha Ca T细胞中黑色素含量减少。6.mi R-3619 mimics使Ha Ca T细胞中PMEL17蛋白表达升高,mi R-3619 inhibitor使Ha Ca T细胞中PMEL17蛋白表达降低。7.mi R-3619 mimics使wt-CTSB萤光素酶活性降低,对mut-CTSB无影响;mi R-3619 inhibitor使wt-CTSB萤光素酶活性升高,对mut-CTSB无影响,表明mi R-361 9靶向调控CTSB基因表达。mi R-3619 mimics使wt-CTSD萤光素酶活性降低,对mut-CTSD无影响;mi R-3619 inhibitor使wt-CTSD萤光素酶活性升高,对mut-CTSD无影响,表明mi R-3619靶向调控CTSD基因表达。结论:1.异欧前胡素显着减少Ha Ca T细胞中黑色素的含量,抑制黑素小体特异性蛋白PMEL17的表达,促进溶酶体中组织蛋白酶B和组织蛋白酶D的活力和表达。2.组织蛋白酶B和组织蛋白酶D能够显着减少Ha Ca T细胞中黑色素的含量,抑制黑素小体特异性蛋白PMEL17的表达。3.异欧前胡素显着抑制mi R-3619的表达。4.mi R-3619显着抑制增加Ha Ca T细胞中黑色素的含量,促进黑素小体特异性蛋白PMEL17的表达,抑制溶酶体中组织蛋白酶B和组织蛋白酶D的活力和表达。5.异欧前胡素通过降低mi R-3619表达,促进组织蛋白酶B和组织蛋白酶D表达,从而减少Ha Ca T细胞中黑色素的含量,抑制黑素小体特异性蛋白PMEL17的表达。
陆攀[3]（2019）在《西格列汀通过激活Hippo通路及调控组织蛋白酶B的表达抑制膀胱癌细胞增殖的研究》文中研究指明目的:西格列汀（Sitagliptin,Sita）是二肽基肽酶4（DPP4）抑制剂,在2型糖尿病患者中可通过抑制胰高血糖素样肽-1（GLP-1）的降解而改善血糖控制。有文献报道,西格列汀能抑制乳腺癌的发生及上皮细胞转化,对结肠癌也具有抑制作用,但是,目前还没有西格列汀对膀胱癌影响的相关报道。本研究采用不同浓度的西格列汀处理人膀胱癌细胞T24与5637,检测细胞生存力的变化;明确在西格列汀影响膀胱癌增殖的过程中,Hippo通路的作用;解释在西格列汀抑制膀胱癌细胞增殖过程中组织蛋白酶B（CTSB）的变化,以及组织蛋白酶B的表达对细胞增殖的影响。研究方法:1.体外培养T24与5637细胞,T24细胞给与0、0.3m M、0.6m M、1.2m M的西格列汀,5637给与0、0.5m M、1.0m M、1.5m M的西格列汀,分别处理24h、48h、72h,MTS以及平板克隆检测细胞活力。2.Western blot检测西格列汀处理后Hippo通路关键蛋白以及组织蛋白酶B的变化,包括p-LATS909、p-YAP127、CTSB。3.免疫荧光对比西格列汀处理后YAP的核定位变化。4.RT-PCR检测西格列汀处理后YAP下游靶基因变化以及CTSB的m RNA变化。5.使用YAP抑制剂verteporfin或者si RNA降低膀胱癌细胞YAP的活性后,检测CTSB的m RNA以及蛋白水平变化。6.敲低细胞CTSB表达后,CCK8检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:1.给与不同浓度西格列汀处理T24与5637后,与对照组相比,处理组降低了细胞活力,且与对照组之间的差异有统计学意义（P<0.05）。2.西格列汀处理T24与5637后,分别在不同时间点收取细胞,western blot发现p-LATS909一过性增高,p-YAP127持续增高。给与不同浓度西格列汀处理后,p-YAP127蛋白也增加,而组织蛋白酶B的蛋白表达降低。3.西格列汀处理T24与5637后,免疫荧光结果显示,与对照组相比,处理组YAP核定位减少。4.西格列汀处理T24与5637后,RT-PCR结果显示YAP下游靶基因表达减少,CTSB的m RNA表达也降低。5.抑制YAP活性或者敲低YAP后,CTSB的m RNA与蛋白水平均降低。6.敲低细胞CTSB表达后,T24及5637细胞的增殖活力明显降低,流式细胞术结果显示细胞凋亡明显增加。结论:1.西格列汀抑制了膀胱癌细胞的增殖。2.Hippo通路在西格列汀抑制膀胱癌细胞增殖过程中被激活了。3.西格列汀在抑制膀胱癌细胞增殖过程中降低了组织蛋白酶B的表达。4.YAP调控组织蛋白酶B的m RNA及蛋白表达。5.组织蛋白酶B的表达降低,增加了细胞凋亡。
马丽娜[4]（2013）在《皮肤鳞状细胞癌中组织蛋白酶D的表达对Ki67和PCNA表达阳性细胞的增殖作用》文中进行了进一步梳理目的检测皮肤鳞状细胞癌中组织蛋白酶D、Ki67和PCNA的表达关系及在不同临床病理特征中的差别。方法以72例皮肤鳞状细胞癌标本作为观察组,以50例正常皮肤组织作为对照组,采用免疫组织化学方法检测两组中组织蛋白酶D、Ki67和PCNA的表达,探讨组织蛋白酶D、Ki67和PCNA在不同临床病理特征中的表达差别,关注组织蛋白酶D对Ki67和PCNA表达阳性细胞的增殖作用。结果观察组中组织蛋白酶D、Ki67和PCNA表达的阳性率明显高于对照组,观察组中组织蛋白酶D、Ki67和PCNA表达的阳性率与肿瘤的最大直径、分化程度、淋巴道转移及脉管浸润密切相关。相关性分析显示观察组中组织蛋白酶D和Ki67、组织蛋白酶D和PCNA、Ki67和PCNA的表达均呈正相关性。结论皮肤鳞状细胞癌中组织蛋白酶D、Ki67和PCNA高表达,在肿瘤进展中具有重要的促进作用,组织蛋白酶D可能对肿瘤细胞中Ki67和PCNA阳性细胞的增殖有促进作用。
侯艳芳[5]（2012）在《食管鳞癌中多肿瘤标记物表达的临床意义》文中研究指明背景恶性肿瘤是目前严重威胁人类健康的主要疾病之一，我国恶性肿瘤的发病人数约占全球20%，死亡人数约占全球24%。而食管癌（Esophageal carcinoma, EC）是世界上六大恶性肿瘤之一，其主要的流行病学特征是显着的地区分布差异，高低发区EC的发病率最大可相差500倍。河南省林州市是世界EC发病率及死亡率最高的地区之一，包括与其相邻的辉县及安阳等地。EC预后极差，中晚期病人的5年生存率仅为10%左右。大多的EC病人在临床确诊后平均生存时间不到一年，死亡率相当高。尽管近年来对EC进行了多学科的综合性研究，并提出EC的发生发展是一个多阶段多因素参与的复杂过程，但是，高发区的EC发病率及死亡率仍未得到明显的改善，到目前为止仍然是这些地区肿瘤相关死亡的主要原因之一。因此，阐明EC多阶段演变的分子机制，筛选及鉴定与EC癌变关系密切的预警分子，寻找高敏感、高特异的诊断标志物，寻找与鉴定新的治疗靶点，具有重要的理论意义，并为EC高发区高危人群提供重要的筛查、早期诊断、预后及治疗监测的生物标志物，以期降低EC发病率及病死率。我们课题组利用系统的蛋白质组学技术，包括二维电泳、稳定同位素标记（SILAC、iTRAQ）、二维液相色谱、ESI串联质谱、MALDI-TOF-TOF质谱等技术，全面鉴定了食管癌鳞癌（Esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）蛋白差异表达谱。目前，我们已经鉴定了156个与ESCC发生发展密切相关的差异表达的蛋白质分子，如MIF（Macrophage migration inhibitory factor）、prohibitin、HSP27（Heat shock protein27）、annexin A2、GRP94（Glucoseregulated protein）、stratifin、CD（Cathepsin D）等。热休克蛋白HSP27是小分子热休克蛋白（Small heatshock protein，sHSP）亚家族中的主要成员之一，它的主要生物学功能是在各种应激因素下避免细胞受到损伤，并参与细胞的增殖分化、诱导细胞凋亡。近年的研究发现HSP广泛的参与了肿瘤细胞的细胞周期调控、增殖及凋亡、分化，并与肿瘤免疫、多药耐药等有密切关系。在多种肿瘤中HSP27高表达与肿瘤预后有关，但在不同的肿瘤中生物学功能及临床意义不同。GRP94是分子量为94的葡萄糖调节蛋白（Glucoseregulated protein, GRPs）,是HSP90家族的成员，作为分子伴侣之一，其主要功能是协助蛋白折叠、伸展、组装和表达，抑制错误折叠蛋白的分泌。GRP94与肿瘤细胞的分化和侵袭有关，还可以促使肿瘤细胞的增殖、转移、耐药性获得等，在肿瘤治疗及预后中具重要意义。巨噬细胞游走抑制因子MIF是在T淋巴细胞中发现的一种可溶性、多功能细胞因子，与免疫细胞的活化有关，具有抑制巨噬细胞移动的功能，还可促进肿瘤细胞的分离及移动，有利于肿瘤细胞的组织侵袭过程，且表达水平与患者的预后关系密切。CD（组织蛋白酶D）是一种天冬氨酸肽链内切酶，包括前体（Pro-cathepsin D, pCD，MW52kDa）、中间体（MW48kDa）以及成熟体（MW，34kDa）。CD的生理功能是在溶酶体的酸性环境中降解蛋白质，但在病理状态下，CD可降解细胞外基质及基底膜，促进恶性肿瘤的侵袭和迁移等生物学过程。近年的研究发现，CD的高表达与肿瘤早期复发相关，并提示预后不良。本研究首先应用免疫印迹（Western blot）技术验证了上述蛋白质分子CD、pCD、MIF、GRP94、 HSP27在ESCC及癌旁组织中的差异表达；然后应用免疫组化（Immunohistochemistry, IHC）技术探讨了HSP27、GRP94、MIF在具有5年生存期随访资料ESCC蜡块组织标本中的表达规律和特征，进而分析HSP27、GRP94、MIF表达与ESCC临床病理资料的相关性及在预后中的作用，为食管癌的分子诊断及预后评估的分子标志物的筛选及鉴定提供实验证据。目的通过研究CD、pCD、MIF、GRP94、HSP27等多个肿瘤标志物在各TNM分期的ESCC组织的表达特征及规律，确定其与ESCC患者临床病理资料相关性，评价多个肿瘤标志物在ESCC术后风险预警作用；进一步明确食管鳞癌多阶段、多分子演进的分子机制，为建立高危人群筛查、早期诊断和预后评估的生物指标及手段奠定良好的工作基础。方法1. Western blot检测CD、pCD、MIF、GRP94、HSP27等蛋白质分子在ESCC及癌旁手术切除标本组织中的差异表达；2. IHC检测HSP27、GRP94和MIF在各TNM分期的ESCC组织的表达特征及规律，分析其与ESCC患者临床病理资料相关性及ESCC术后风险预警作用。结果1. Western blot验证了CD、pCD、MIF、GRP94在ESCC组织中表达明显升高，而HSP27的表达降低；2. ESCC组织中GRP94的高表达与分化程度呈正相关（P=0.002），MIF、GRP94的表达增高与淋巴结转移（P=0.047，P=0.016）、TNM分期（P=0.008，P=0.002）、ESCC患者术后5年生存期缩短（P=0.01，P=0.001）呈正相关；3. HSP27的表达与淋巴结转移（P=0.004）、TNM分期（P=0.008）、ESCC患者术后5年生存期缩短（P=0.007）呈负相关；4. Cox多因素分析表明：MIF、GRP94是ESCC术后风险评估中独立因素（P=0.026，P=0.007）。结论1. CD、pCD、MIF、GRP94、HSP27可能是食管癌变多阶段演进过程中的重要变化分子；2. MIF、GRP94、HSP27的表达状态与ESCC的恶性生物学行为相关，是ESCC预后风险评估新的分子标志物。
李伟汉[6]（2012）在《乳腺癌患者癌组织中组织蛋白酶D和基质金属蛋白酶-2的表达及其判断预后的价值》文中进行了进一步梳理目的检测乳腺癌患者术后癌组织中组织蛋白酶D（Cath-D）和基质金属蛋白酶（MMP）-2表达及对预后判断的价值。方法应用免疫组织化学技术检测85例乳腺癌术后癌组织及40例乳腺组织Cath-D和MMP-2表达,探讨二者在不同临床特征中的表达意义。结果乳腺癌组织Cath-D和MMP-2阳性表达率明显高于正常乳腺组织,二者的表达与乳腺癌临床分期、淋巴结转移、肿瘤体积、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）表达密切相关。乳腺癌组织中Cath-D和MMP-2的表达呈正相关性。生存分析显示Cath-D和MMP-2的表达与患者预后密切相关。结论乳腺癌组织Cath-D和MMP-2高表达,二者共同促进肿瘤发生发展,联合检测Cath-D和MMP-2表达水平可能预测患者预后。
赵广文,赵容杰,赵正林,金相赞,梁在夏,李宗录[7]（2010）在《nm23基因蛋白及组织蛋白酶D与乳腺癌转移的关系》文中指出[目的]探讨nm23基因蛋白及组织蛋白酶D（Cath-D）在人乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌转移的关系.[方法]应用免疫组织化学染色方法观察43例乳腺癌组织的nm23基因蛋白及Cath-D的表达.[结果]nm23蛋白和Cath-D的表达与乳腺癌患者的年龄、绝经前后、肿瘤大小、组织学类型及临床病理分期无关,而与组织学分级、淋巴结转移、复发及转移、生存期有相关性.[结论]检测nm23基因蛋白与Cath-D的表达可作为乳腺癌研究的重要指标,对乳腺癌的转移与预后判定有重要意义.
徐晓艳,师永红,于慧玲[8]（2010）在《胃癌组织中组织蛋白酶D和层黏连蛋白受体的表达及意义》文中指出目的研究组织蛋白酶D、层黏连蛋白受体在胃癌中的表达,探讨其与胃癌侵袭及淋巴结转移的关系。方法采用免疫组织化学SP法,检测96例胃腺癌组织中组织蛋白酶D和层黏连蛋白受体的表达情况。结果组织蛋白酶D在浆膜层、有淋巴结转移及低分化胃癌组织中的表达明显高于浸润肌层以下、无淋巴结转移及高、中分化的胃癌（分别为P<0.01,P<0.01,P<0.05）。经四格表x2检验,层黏连蛋白受体在胃癌组织中的高表达与浸润深度、分化程度密切相关（分别为P<0.05和P<0.01）,与淋巴结转移无关（P>0.05）。胃癌组织中层黏连蛋白受体和组织蛋白酶D之间的相关性分析显示,组织蛋白酶D阳性表达与层黏连蛋白受体阳性表达之间呈正相关（P<0.05）。结论胃癌组织中层黏连蛋白受体高表达、组织蛋白酶D高表达与胃癌侵袭转移密切相关。
马春林,罗开元[9]（2009）在《乳腺癌标志物的研究》文中进行了进一步梳理乳腺癌是危害妇女健康主要的恶性肿瘤之一,近年来发病率上升速度最快的恶性肿瘤之一。众所周知,乳腺癌属于全身性疾病,即使是早期乳腺癌,也会发生隐匿性转移。目前乳腺癌标志物已成为研究的一个热点。肿瘤标志物是指与肿瘤发生相关的物质,主要包括两部分:大分子蛋白质肿瘤标志物和基因肿瘤标志物,通过对乳腺癌相关肿瘤标志物的综合研究分析,可以对其发生、恶性程度、预后等作出及时判断,指导治疗,提高患者的生活质量和生存期。
徐晓艳,范鹏程,马秀梅[10]（2008）在《E-钙黏附素、组织蛋白酶D与胃癌侵袭转移的关系》文中研究指明目的研究E-钙黏附素（E-cadherin）、组织蛋白酶D在胃癌中的表达,探讨其与胃癌侵袭及淋巴结转移的关系。方法采用免疫组化S-P法,检测96例胃腺癌组织中E-钙黏附素、组织蛋白酶D的表达情况;应用图像分析技术来分析这两个指标在胃癌中的阳性表达率。结果在浸润肌层及肌层以上、无淋巴结转移及高-中分化的胃癌组织中E-钙黏附素低表达及IRS（免疫反应分值）显着高于超过肌层、有淋巴结转移及低分化者（P<0.05）;组织蛋白酶D在超过肌层、有淋巴结转移及低分化胃癌组织中的高表达及IRS明显高于浸润肌层及肌层以上、无淋巴结转移及高-中分化的胃癌（P<0.05）。胃癌组织中E-钙黏附素阳性表达与组织蛋白酶D阳性表达之间有明显负相关（P<0.05）。结论胃癌组织中E-钙黏附素低表达或失表达、组织蛋白酶D高表达与胃癌侵袭转移密切相关。在胃癌侵袭转移中E-钙黏附素与组织蛋白酶D可能相互影响,相互制约。
二、乳腺癌中组织蛋白酶-D表达水平与预后的关系（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、乳腺癌中组织蛋白酶-D表达水平与预后的关系（论文提纲范文）
（1）超灵敏检测组织蛋白酶B活性的多重循环信号放大方法的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 组织蛋白酶 |
| 1.1.1 组织蛋白酶简介 |
| 1.1.2 组织蛋白酶分类 |
| 1.2 组织蛋白酶B(CTB) |
| 1.2.1 CTB的生理学特性及生物功能 |
| 1.2.2 CTB的作用机制 |
| 1.2.3 CTB作为生物标志物 |
| 1.3 CTB的检测方法 |
| 1.3.1 比色法 |
| 1.3.2 化学发光和生物发光 |
| 1.3.3 电化学分析 |
| 1.3.4 荧光方法 |
| 1.4 本文的主要研究内容 |
| 1.4.1 磁珠(MBs) |
| 1.4.2 核糖核酸酶H(RNase H) |
| 1.4.3 肽裂解介导的信号扩增技术 |
| 第二章 基于肽-DNA偶联物多重循环信号扩增技术超灵敏检测组织蛋白酶B活性 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 实验试剂、仪器与序列 |
| 2.2.2 实验方法 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 组织蛋白酶B检测的实验原理 |
| 2.3.2 实验的可行性验证 |
| 2.3.3 实验条件的优化 |
| 2.3.4 灵敏度检测 |
| 2.3.5 特异性检测 |
| 2.3.6 实验的整步反应分析 |
| 2.3.7 抑制剂分析 |
| 2.3.8 实际样品的分析检测 |
| 2.4 总结和展望 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（2）异欧前胡素（ISO）通过miR-3619调控CSTB和CSTD诱导角质形成细胞黑色素降解的作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词 |
| 前言 |
| 第一章 ISO调控HaCaT细胞黑色素降解的研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验试剂和仪器 |
| 2.3 试剂配置 |
| 3 方法 |
| 3.1 细胞体外培养 |
| 3.2 黑素小体分离纯化 |
| 3.3 MTT法细胞活力检测 |
| 3.4 蛋白质样品制备 |
| 3.5 BC A法蛋白质含量测定 |
| 3.6 Elisa法细胞黑色素含量测定 |
| 3.7 Western Blot |
| 3.8 溶酶体酶活力检测 |
| 3.9 统计学方法 |
| 4 结果 |
| 4.1 ISO对 HaCaT细胞增殖的影响 |
| 4.2 ISO对 HaCaT细胞黑色素含量的影响 |
| 4.3 ISO对 HaCaT细胞PMEL17蛋白表达的影响 |
| 4.4 ISO对 HaCaT细胞溶酶 体酶 活力的影响 |
| 4.5 ISO对 HaCaT细胞溶酶 体酶 表达的影响 |
| 5 讨论 |
| 6 小结 |
| 第二章 CTSB和 CTSD调控HaCaT细胞黑色素降解的研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验试剂和仪器 |
| 2.3 试剂配置 |
| 3 方法 |
| 3.1 干扰载体构建 |
| 3.2 质粒提取 |
| 3.3 细胞转染 |
| 3.4 qPCR |
| 3.5 统计学方法 |
| 4 结果 |
| 4.1 CTSB基因干扰效率检测 |
| 4.2 干扰CTSB基因对HaCaT细胞黑色素含量的影响 |
| 4.3 干扰CTSB基因对HaCaT细胞PMEL17蛋白表达的影响 |
| 4.4 CTSD基因干扰效率检测 |
| 4.5 干扰CTSD基因对HaCaT细胞黑色素含量的影响 |
| 4.6 干扰CTSD基因对HaCaT细胞PMEL17蛋白表达的影响 |
| 5 讨论 |
| 6 小结 |
| 第三章 miR-3619调控HaCaT细胞黑色素降解的分子机制研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验试剂 |
| 3 方法 |
| 3.1 miRNAs预测 |
| 3.2 miRNAs表达检测 |
| 3.3 萤光素酶载体构建 |
| 3.4 突变型载体构建 |
| 3.5 萤光素酶活性检测 |
| 3.6 统计学方法 |
| 4 结果 |
| 4.1 CTSB和 CTSD基因上游调控miRNAs预测与筛选结果 |
| 4.2 ISO对 HaCaT细胞中候选miRNA表达的影响 |
| 4.3 miR-3 619 过表达和沉默效果检测 |
| 4.4 miR-3 619对HaCaT细胞CSTB和 CSTD蛋白表达的影响 |
| 4.5 miR-3 619对HaCaT细胞黑色素含量的影响 |
| 4.6 miR-3 6 19对HaCaT细胞PMEL 17蛋白表达的影响 |
| 4.7 miR-3 619对CTSB和 CTSD萤光素酶报告基因活性的影响 |
| 5 讨论 |
| 6 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 A: 异欧前胡素结构示意图 |
| 附录 B: psi- CHECK-2载体结构示意图 |
| 附录 C: pLVX- ShRNA2 -Puro载体结构示意图 |
| 综述:黑色素代谢及中医药美白剂研究进展 |
| 参考文献 |
（3）西格列汀通过激活Hippo通路及调控组织蛋白酶B的表达抑制膀胱癌细胞增殖的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 主要试剂和仪器 |
| 2.1.1 主要试剂 |
| 2.1.2 主要仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细胞系 |
| 2.2.2 平板克隆 |
| 2.2.3 MTS增殖实验 |
| 2.2.4 Cell Counting Kit-8(CCK8)增殖实验 |
| 2.2.5 Western blot |
| 2.2.6 免疫荧光 |
| 2.2.7 RNA提取和实时定量PCR |
| 2.2.8 SiRNA瞬时转染 |
| 2.2.9 统计学分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 西格列汀抑制膀胱癌细胞的增殖 |
| 3.2 西格列汀激活Hippo通路 |
| 3.3 西格列汀抑制 CTSB 的表达 |
| 3.4 YAP调控CTSB的表达 |
| 3.5 抑制CTSB表达促进膀胱癌细胞凋亡 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 组织蛋白酶B在膀胱癌中的作用 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）皮肤鳞状细胞癌中组织蛋白酶D的表达对Ki67和PCNA表达阳性细胞的增殖作用（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 临床资料 |
| 1.2 免疫组化检测组织蛋白酶D、Ki67和PCNA蛋白的表达 |
| 1.3 组织蛋白酶D、Ki67和PCNA蛋白检测结果的判定方法 |
| 1.4 统计学处理 |
| 2 结 果 |
| 2.1 观察组与对照组中组织蛋白酶D、Ki67和PCNA蛋白表达阳性率的比较 |
| 2.2 观察组中不同临床特征患者组织蛋白酶D、Ki67和PCNA蛋白表达阳性率的比较 |
| 2.3 观察组中组织蛋白酶D、Ki67和PCNA表达的相关性分析 |
| 3 讨 论 |
（5）食管鳞癌中多肿瘤标记物表达的临床意义（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 引言 |
| 2 材料、试剂与仪器 |
| 2.1 Western blot 蛋白电泳材料及试剂 |
| 2.2 免疫组化所需试剂、材料（对象） |
| 2.2.1 实验对象及处理 |
| 2.2.2 试剂 |
| 2.3 主要仪器 |
| 3 方法 |
| 3.1 Western blot |
| 3.1.1 食管鳞癌及癌旁组织标本处理并提取蛋白 |
| 3.1.2 BCA 法测定各组织总蛋白浓度 |
| 3.1.3 蛋白质凝胶电泳 |
| 3.2 免疫组化 |
| 4 结果 |
| 4.1 Western blot 结果 |
| 4.2 IHC 结果 |
| 4.2.1 GRP94 在食管鳞癌中的表达特征 |
| 4.2.2 MIF 在食管鳞癌中的表达特征 |
| 4.2.3 HSP27 在食管鳞癌中的表达特征 |
| 4.3 Cox 模型多因素分析 |
| 5 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 组织蛋白酶 D 与恶性肿瘤的侵袭、转移及预后关系的研究进展 |
| 1. cath-D 的生物学特点 |
| 1.1 分子结构与理化性质 |
| 1.2 合成、转运和定位 |
| 1.3 cath-D 的生物学作用 |
| 2. cath-D 的检测方法 |
| 2.1 定性的检测方法 |
| 2.2 定量的检测方法 |
| 3. cath-D 在恶性肿瘤中表达的机制 |
| 4. cath-D 和肿瘤的分期及分级的相互关系 |
| 5. cath-D 表达与各种恶性肿瘤的关系 |
| 5.1 cath-D 与乳腺癌 |
| 5.2 cath-D 与宫颈癌 |
| 5.3 cath-D 与消化道肿瘤 |
| 5.4 cath-D 与肺癌 |
| 6. cath-D 的其它相关因素 |
| 6.1 cath-D 与 ER、PR 的关系 |
| 6.2 cath-D 与 cath-B 和 cath-L 对恶性肿瘤的影响 |
| 6.3 cath-D 与 P53 的关系 |
| 6.4 cath-D 与 VEGF、c-erbB-2 及 CD15 等因子对肿瘤的影响 |
| 7. cath-D 在恶性肿瘤中的研究展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 |
（6）乳腺癌患者癌组织中组织蛋白酶D和基质金属蛋白酶-2的表达及其判断预后的价值（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 免疫组织化学方法 |
| 1.3 结果判定标准 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结 果 |
| 2.1 Cath-D和MMP-2表达在乳腺癌及正常乳腺组织中的表达 |
| 2.2 Cath-D和MMP-2阳性表达与乳腺癌临床病理特征的关系 |
| 2.3 乳腺癌中Cath-D和MMP-2表达的相关性 |
| 2.4 乳腺癌中Cath-D和MMP-2的表达与患者生存的关系 |
| 3 讨 论 |
（7）nm23基因蛋白及组织蛋白酶D与乳腺癌转移的关系（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 免疫组织化学染色 |
| 1.3 结果判定 |
| 1.4 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 nm23基因蛋白及Cath-D在乳腺癌中的表达 |
| 2.2 nm23基因蛋白及Cath-D表达与组织学分级、组织学类型和临床病理分期的关系 |
| 2.3 nm23基因蛋白及Cath-D表达与腋淋巴结转移、生存期、复发和转移的关系 |
| 2.4 nm23蛋白和Cath-D表达与患者的年龄、绝经前后及肿瘤大小的关系 |
| 3 讨论 |
四、乳腺癌中组织蛋白酶-D表达水平与预后的关系（论文参考文献）
- [1]超灵敏检测组织蛋白酶B活性的多重循环信号放大方法的研究[D]. 张程鹏. 山东师范大学, 2021(12)
- [2]异欧前胡素（ISO）通过miR-3619调控CSTB和CSTD诱导角质形成细胞黑色素降解的作用研究[D]. 李凯. 湖南中医药大学, 2021
- [3]西格列汀通过激活Hippo通路及调控组织蛋白酶B的表达抑制膀胱癌细胞增殖的研究[D]. 陆攀. 中国医科大学, 2019(02)
- [4]皮肤鳞状细胞癌中组织蛋白酶D的表达对Ki67和PCNA表达阳性细胞的增殖作用[J]. 马丽娜. 中国老年学杂志, 2013(03)
- [5]食管鳞癌中多肿瘤标记物表达的临床意义[D]. 侯艳芳. 河南大学, 2012(10)
- [6]乳腺癌患者癌组织中组织蛋白酶D和基质金属蛋白酶-2的表达及其判断预后的价值[J]. 李伟汉. 中国老年学杂志, 2012(04)
- [7]nm23基因蛋白及组织蛋白酶D与乳腺癌转移的关系[J]. 赵广文,赵容杰,赵正林,金相赞,梁在夏,李宗录. 延边大学医学学报, 2010(03)
- [8]胃癌组织中组织蛋白酶D和层黏连蛋白受体的表达及意义[J]. 徐晓艳,师永红,于慧玲. 肿瘤研究与临床, 2010(02)
- [9]乳腺癌标志物的研究[J]. 马春林,罗开元. 医学综述, 2009(08)
- [10]E-钙黏附素、组织蛋白酶D与胃癌侵袭转移的关系[J]. 徐晓艳,范鹏程,马秀梅. 山西医科大学学报, 2008(03)