导读:本文包含了酶性质论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:纳米,性质,蛋白酶,染料,曲霉,芽孢,特性。
酶性质论文文献综述
柳萌,刘瑞玲,郜海燕,吴伟杰,孙健[1]（2019）在《蓝莓采后病原菌胞外脂肪酶的提取及粗酶性质研究》一文中研究指出以蓝莓采后主要病原菌灰霉为试验菌株,通过单因素试验对其培养基成分和发酵条件进行优化,并研究其酶学性质。结果表明,采用含橄榄油1%、蛋白胨1%,pH 7.0的PDA培养基,发酵温度25℃,发酵时间96 h时,灰霉菌具有最高的产胞外脂肪酶能力。酶学性质研究表明,该脂肪酶对pH和温度的适应范围较宽,在40℃、pH 9.0的反应条件下,粗酶的脂肪酶活性最高;Na~+、Fe~(3+)能促进粗酶的活性,K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Cu~(2+)则抑制粗酶的活力;该粗酶在一定体积分数的异丙醇、甲醇、丙酮中具有良好耐受性,而在乙酸乙酯和二甲苯中处于激活状态。优化使病菌灰霉菌脂肪酶的产率增加,为后续脂肪酶的分离纯化奠定基础。初步探讨胞外脂肪酶的粗酶性质,为蓝莓采前病害防治及采后品质保护提供科学依据。(本文来源于《中国食品学报》期刊2019年11期）
何小玉,刘承忠,陈明霞,李和阳[2]（2019）在《产碱性冷适蛋白酶菌株Chryseobacterium sp. vv8的鉴定及粗酶性质》一文中研究指出为鉴定金黄杆菌属(Chryseobacterium)菌株vv8及分析其胞外蛋白酶的酶学特性,首先,通过分子及生理生化特性对菌株vv8进行鉴定;然后,采用明胶平板筛选法和Lowry法对菌株vv8进行产酶筛选和蛋白酶活性测定;最后,研究pH值、温度、金属离子和抑制剂对该蛋白酶活性的影响.研究结果表明:菌株vv8的16S rDNA与比目鱼黄杆菌(C.scophthalmum)具有98.24%的序列相似性,属于Chryseobacterium属;菌株vv8的最适生长条件是温度为22℃,NaCl质量浓度为0 mg·mL~(-1),pH值为6.0;菌株vv8的胞外蛋白酶在pH值为5.0～10.0,温度为0～90℃范围内均具有酶活性,其最适酶活温度和pH值分别为40℃,8.5;在最适条件下,蛋白酶具有较高的稳定性,在冻干过程中,添加葡萄糖具有明显的酶活保护作用;Fe~(3+),Fe~(2+),Cu~(2+)等金属离子及乙二胺四乙酸(EDTA)对酶活性有明显的抑制作用,该酶对洗衣液和尿素具有较好的耐受性.(本文来源于《华侨大学学报(自然科学版)》期刊2019年05期）
徐萌,杨召阳,李夏云,路宜男,陈依帆[3]（2019）在《纹藤壶附生菌的分离鉴定及蛋白酶菌株的产酶性质研究》一文中研究指出目的:研究纹藤壶附生菌的分离鉴定及蛋白酶菌株的产酶性质。方法:黄渤海潮间带海域纹藤壶中分离到54株菌株,经酪蛋白酶实验,筛选得到4株高产蛋白酶的菌株,并对其进行菌种鉴定、产蛋白酶的发酵条件优化及产酶活性测定。结果:经筛选,得到4株高产蛋白酶的菌株,编号分别为X8、X18、X21、X48。通过16S rDNA序列分析,结合透射电镜及形态学观察、生理生化测试结果,初步鉴定X8为河豚毒素假交替单胞菌、X18为乔治亚海杆菌、X21为杀鱼假交替单胞菌、X48为康氏菌。通过测定菌株的生长曲线,确定菌株X8发酵量最高的培养时间为18h、确定菌株X18发酵量最高的培养时间为18h、确定菌株X21发酵量最高的培养时间为21h、确定菌株X48发酵量最高的培养时间为18 h。在最适培养时间的基础上,通过单因素多水平试验设计,可得产蛋白酶菌株X8的最佳发酵条件:可溶性淀粉5. 0‰、初始p H 7. 0、培养基盐度10‰、培养温度25℃; X18最佳发酵条件:可溶性淀粉5. 0‰、初始p H 7. 0、培养基盐度15‰、培养温度30℃; X21最佳发酵条件:蔗糖5. 0‰、初始p H 7. 0～8. 0、培养基盐度15‰、培养温度25℃; X48最佳发酵条件:可溶性淀粉5. 0‰、初始p H 7. 0、培养基盐度15‰、培养温度25℃。结论:在优化发酵条件下,X8、X18、X21、X48菌株产蛋白酶酶活力分别达到707. 06、240. 00、441. 18、328. 22 U/m L。该研究为探索潜在的高产蛋白酶菌株提供了科学依据。(本文来源于《中国食物与营养》期刊2019年07期）
何丽[4]（2019）在《二羧基邻菲啰啉金属有机凝胶的制备及其模拟酶性质的分析应用研究》一文中研究指出天然酶广泛存在于生命体中,可以高效率和高选择性地催化和加速代谢过程中的化学反应。然而,天然酶的高成本、易变性和使用条件严苛等缺点极大地限制了它们的应用。为解决这一难题,低成本、易制备、性质稳定、高催化活性的纳米酶应运而生,开启了纳米材料性能研究的新篇章。金属有机凝胶(Metal-Organic Gels,MOGs)是金属离子与有机桥联配体配位后通过超分子作用力自组装形成的一种金属有机智能软材料。MOGs材料一般具有大的比表面积、疏松多孔的结构和开放的金属活性位点,具有良好的光学、电学、以及刺激响应等特性,已被广泛地应用于吸附、分析检测、催化和生物医学等领域。目前,MOGs在催化领域中作为催化剂的应用局限于有机催化,而MOGs的模拟酶性质还未见报道。因此,本文以二羧基-邻菲啰啉为配体与金属离子Fe(Ⅲ)和Ru(Ⅲ)反应制备了新型金属有机凝胶及其复合材料,研究了其模拟酶性质,并成功应用于药物小分子的检测。具体研究内容如下:1.模拟酶特性Fe-MOGs的制备及其在多巴胺检测中的应用。以2,9-二甲酸-1,10-邻菲啰啉为配体,Fe3+为中心金属离子,在室温下通过简单的混合得到片状形貌的Fe-MOGs。经冷冻干燥除去MOGs中的溶剂分子后,得到的金属有机干凝胶(Fe-MOXs)具有优异的氧化物模拟酶活性,能直接催化溶解氧分解产生活性氧自由基从而氧化鲁米诺产生化学发光。由于多巴胺能被自由基氧化从而直接抑制鲁米诺的化学发光,据此,建立了检测尿样中多巴胺的化学发光新方法。在最优条件下,多巴胺浓度与化学发光强度呈良好的线性关系,线性范围和检测限分别为为0.05μM-0.6μM和20.4 nM。2.高模拟酶活性AuNPs/MOGs(Fe)复合材料的制备及其在灭线磷检测中的应用。铁基金属有机凝胶(MOGs(Fe))具有配位不饱和的金属活性中心,能与含酚羟基的还原剂络合从而还原氯金酸生成具有模拟酶活性的金纳米颗粒(AuNPs),极大地增强材料的模拟酶活性。本实验先通过鞣酸中酚羟基与MOGs(Fe)表面配位不饱和Fe(Ⅲ)间的络合作用将鞣酸固定在MOGs(Fe)表面,以鞣酸为还原剂在MOGs(Fe)表面原位还原氯金酸生成AuNPs。这一复合材料AuNPs/MOGs(Fe)具有协同增强的过氧化物模拟酶催化活性。在H2O2存在下,AuNPs/MOGs(Fe)能协同催化H2O2分解产生多重活性氧自由基,从而氧化鲁米诺产生增强的化学发光信号。基于有机磷农药能不可逆地抑制乙酰胆碱酯酶的活性,从而抑制H2O2的产生,降低鲁米诺化学发光强度,建立了环境水样中灭线磷灵敏检测的化学发光新方法。在最优检测条件下,灭线磷的线性范围和检测限分别为5 nM-800 nM和1 nM。3.双重过氧化物模拟酶特性Ru-MOGs的制备及其在葡萄糖检测中的应用。以2,9-二甲酸-1,10-邻菲啰啉为配体,Ru3+为中心金属离子,通过简单的一步法合成了叁维纤维网状结构的Ru-MOGs。在对Ru-MOGs冷冻干燥处理除去包裹的溶剂以暴露出纤维多孔结构后,该Ru-MOGs展现出双重过氧化物模拟酶活性。在H2O2存在下,Ru-MOGs既具有辣根过氧化物酶活性,能在酸性条件下催化氧化多巴胺,在碱性条件下催化鲁米诺化学发光,又具有NADH过氧化物酶活性,能催化NADH氧化产生具有生物活性的NAD+辅因子。此外,酶促动力学研究表明Ru-MOGs是一种有效的非均相催化剂,具有高催化速率和与底物的强亲和能力。应用其辣根过氧化物模拟酶活性,构建了葡萄糖检测的化学发光分析方法,其检测范围和检测限分别为0.02μM-5μM和9 nM。(本文来源于《西南大学》期刊2019-04-18）
何建川[5]（2018）在《铁基金属有机框架及其纳米复合材料的模拟酶性质及应用研究》一文中研究指出天然酶是生命系统中重要的生物催化剂,具有高活性、强特异性等优势,然而,天然酶一般易变性、成本高,这限制了天然酶在实际生产生活中的大规模使用。因此,人们致力于开发同等功效且稳定、便宜的天然酶替代物,即模拟酶,纳米酶是具有酶催化性质的纳米材料,也是新一代的模拟酶。研究表明,铁氧体是典型且高效的模拟酶催化剂,而铁基金属有机框架,尤其是羧酸类配体的铁基金属有机框架,其构成节点为铁氧金属簇,因而铁基金属有机框架是潜在高效的模拟酶材料。此外,金属有机框架固有的高比表面积和多孔性不仅有利于酶催化,而且可作为分散其他纳米酶材料的载体。本文制备了一系列的铁基金属有机框架及其纳米复合材料,应用于染料降解体系、TMB比色体系和鲁米诺化学发光体系,证明并评估其模拟酶催化性质,并实现了染料的有效去除和生物小分子的灵敏检测。本文主要内容包括以下五个部分:第一章:简述了模拟酶和金属有机框架在模拟酶应用方面的发展并提出本文的研究目标和研究内容。第二章:制备铁基金属有机框架NH_2-MIL-88(Fe)并用作过氧化物模拟酶催化剂类芬顿降解水中的亚甲蓝。NH_2-MIL-88(Fe)通过微波法简单快速制备,并用SEM、FTIR、XRD和BET等方法进行表征。制得的NH_2-MIL-88(Fe)表现出过氧化物模拟酶性质,并且可以有效地催化降解MB。接着对MB降解反应的影响参数进行探讨,包括溶液pH、NH_2-MIL-88(Fe)浓度、H_2O_2浓度和温度。结果表明,NH_2-MIL-88(Fe)的工作pH范围宽(3-11),温度耐受性好,最优条件下,45分钟即可实现MB的完全清除。此外,将NH_2-MIL-88(Fe)循环使用5次,MB的去除率仍能达到80%以上,表明其良好的再循环使用能力。NH_2-MIL-88(Fe)具有易制备、高效率、可循环使用等优势,电子自旋共振和荧光探针实验表明MB的降解过程涉及到了羟基自由基的参与。这些发现为MOF作为高效类芬顿催化剂在水处理上的应用提供了可能。第叁章:采用微波加热法得到了十二烷基苯磺酸钠修饰的MIL-88(Fe)(SDBS@MIL-88(Fe)),并考察其过氧化物模拟酶特性。结果表明,修饰后的SDBS@MIL-88(Fe)的过氧化物模拟酶活性大大提升,约为原MIL-88(Fe)的2倍。SDBS@MIL-88(Fe)的动力学行为表明,以TMB为底物的表观米氏常数值K_m为0.21 mM,低于已报道的铁基MOF纳米酶,证明了SDBS@MIL-88(Fe)对TMB的良好的亲和能力。SEM图和动态光散射的结果表明,SDBS@MIL-88(Fe)的尺寸和水合粒径小于MIL-88(Fe),说明SDBS可诱导生成小尺寸的MOF且可有效分散MOF颗粒。这些研究表明SDBS@MIL-88(Fe)的催化效果提升可能是由于负电荷的增多、小尺寸的生成以及良好的水分散性。基于SDBS@MIL-88(Fe)良好的过氧化物模拟酶性质,可构建高效、灵敏的过氧化氢和葡萄糖比色分析方法,该方法可用于人体血清样品中葡萄糖的分析。第四章:通过MOF在GO上原位生长得到复合材料GO@MIL-88(Fe),并采用SEM、XRD、FTIR和Raman光谱技术进行表征,此外,通过鲁米诺化学发光体系来评估复合材料的氧化物模拟酶活性。结果表明,GO的引入有效增强了MIL-88(Fe)的氧化物模拟酶活性,鲁米诺化学发光增敏倍数约为12。基于GO@MIL-88(Fe)高效的氧化物模拟酶性质,可构建灵敏的抗坏血酸(AA)的化学发光分析方法,其检测的线性范围为1 nM-5μM,检出限可低至1 nM。该方法成功的用于了果汁中抗坏血酸的含量分析,该工作对于MOF的氧化物模拟酶性质的开发及应用具有重要意义。第五章:以GO@MIL-88(Fe)为基质,分散过氧化物模拟酶CoFe_2O_4 NPs,成功得到高效的过氧化物模拟酶材料CoFe_2O_4 NPs/GO@MIL-88(Fe),所制备的CoFe_2O_4 NPs/GO@MIL-88(Fe)催化鲁米诺-H_2O_2化学发光信号为原CoFe_2O_4 NPs的10倍左右。这是由于MOF稳定分散CoFe_2O_4 NPs,实现了对CoFe_2O_4 NPs的一次增敏(5倍),进而GO稳定水稳定性较差的MOF从而实现对CoFe_2O_4 NPs/MOF的二次增敏(2倍)。基于CoFe_2O_4 NPs/GO@MIL-88(Fe)高效的过氧化物模拟酶性质,可实现对过氧化氢和葡萄糖的高灵敏化学发光测定,检出限可分别低至5 nM和10 nM,所构建的葡萄糖测定方法用于分析人体血清样品,得到令人满意的结果。(本文来源于《西南大学》期刊2018-10-08）
王佳懿,李泰仑,王天女,卢磊[6]（2018）在《短小芽孢杆菌LC01的鉴定及其芽孢漆酶性质的研究》一文中研究指出【目的】对前期获得的1株具有较高漆酶活性的细菌菌株LC01进行鉴定及相关酶学性质研究,以开发具有较好工业应用特性的细菌漆酶。【方法】通过形态观察和生理生化实验,结合16S r DNA序列分析对菌株进行鉴定,测定其芽孢漆酶在不同条件下的催化性质及染料降解能力。【结果】经鉴定菌株LC01为短小芽孢杆菌,该菌株的芽孢漆酶氧化底物2,2'-连氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)、丁香醛连氮和2,6-二甲氧基苯酚的最适p H分别为3. 0、6. 6和8. 6,以丁香醛连氮为底物的最适催化温度为80℃,在p H 9. 0放置10 d或50℃处理10 h后均有较高活性。在p H 9. 0时,芽孢漆酶-介体系统能有效脱色不同结构的染料。对染料活性黑5和靛红反应1 h后脱色率达90%以上,对RB亮蓝的脱色6 h后也达到了90%。【结论】短小芽孢杆菌LC01的芽孢漆酶能有效脱色染料且在碱性和高温条件下具有良好稳定性,表明其在多种工业领域具有较好的应用前景。(本文来源于《南京林业大学学报(自然科学版)》期刊2018年05期）
郑苑琳[7]（2018）在《蛋白质功能化铂及其复合材料的模拟酶性质与可视化传感应用》一文中研究指出随着纳米科技的飞速发展,不同纳米材料的新型人工模拟酶(纳米酶)受到越来越广泛的关注。纳米酶的稳定性和催化活性是其在化学和生物领域应用的关键。铂纳米酶具有优越的催化活性,但较差的稳定性、昂贵的价格和稀少的储量限制了在诸多领域的应用。本论文利用生物分子和无机材料功能化铂纳米粒子,构建高活性、高稳定性和多功能性的铂基复合纳米酶,并对其在环境与生物的分析检测应用进行了研究。1.S~（2-）对酪蛋白稳定的铂纳米颗粒模拟酶活性的抑制作用:作用机制、底物依赖性与检测以β-酪蛋白为模型蛋白,制备了具有模拟过氧化物酶活性的β-酪蛋白稳定的铂纳米粒子(CM-PtNPs),并系统地研究了硫离子诱导CM-PtNPs纳米酶活性“开关效应”及作用机制。硫离子诱导的活性“开关效应”在很大程度上取决于纳米酶的物理化学特性和底物专一性。一方面,硫离子结合在铂纳米酶表面导致Pt~（2+）向Pt~0转变,使活性中心增多,类过氧化物酶活性“开启”,另一方面,硫离子通过Pt-S键相互作用阻碍了底物与活性中心的接触,导致类过氧化物酶活性“关闭”。对于底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)和2,2'-偶氮二(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐(ABTS),两种底物分子与纳米酶之间不同的相互作用,使其在纳米酶表面分布不同,以上两种因素起着不同的决定性作用。基于CM-PtNPs对不同底物不同的响应特性,构建了性能优越的具有不同检出限(LOD)的比色传感器。首次从分子层次探讨了底物是如何影响环境因素诱导纳米酶类酶活性的开关效应,这为合理预测纳米酶活性对环境因素响应的“开关效应”及拓宽纳米酶在众多领域的应用提供了理论指导。2.蛋白质功能化铋铂纳米链/氧化石墨烯复合材料的模拟酶性质及一步法可视化检测葡萄糖采用简便的一步法制备了蛋白质功能化铋铂纳米链/氧化石墨烯复合材料(CM-BiPt NC/GO)。CM-BiPtNC/GO复合材料具有突出的类过氧化物酶活性。在H_2O_2存在下,CM-BiPtNC/GO复合材料能有效催化过氧化氢氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)反应。H_2O_2的线性范围为0.01-1500 μM,当信噪比为3时,该传感器对H_2O_2的检测限为10 nM。在此基础上,CM-BiPtNC/GO复合材料与葡萄糖氧化酶构建酶级联反应系统,提出了一种简单高灵敏度检测葡萄糖的比色法。葡萄糖的线性范围为0.01-1500 μM,当信噪比为3时,该传感器对葡萄糖的检测限为50 nM。该系统在临床诊断、药物和环境化学等领域具有广阔的应用前景。3.蛋白质功能化铂/四氧化叁铁复合材料的模拟酶性质及一步法可视化检测胆固醇人体体液中胆固醇含量是临床上重要的分析指标,其灵敏检测在诊断中具有重要意义。在Fe3O4表面原位生长制备了具有高类过氧化物酶活性的CM-Pt/Fe_3O_4复合纳米粒子,并利用CM-Pt/Fe_30_4与胆固醇氧化酶复合成功地制备了胆固醇比色生物传感器(ChOx/CM-Pt/Fe_3O_4)。在胆固醇存在下,H_2O_2在胆固醇氧化酶(ChOx)的催化作用下产生,并在CM-Pt/Fe_3O_4的类过氧化物酶催化作用下氧化有机底物生成有色底物,从而对胆固醇进行检测。在最佳条件下,紫外可见吸收光谱法测定H_2O_2和胆固醇的线性范围分别为0.01-1000 μm和0.1-400 μM。当信噪比为3时,该生物传感器对H_2O_2和胆固醇的检测限分别为1nM和50 nM。本工作为胆固醇的检测提供了一种简便、灵敏的方法,在临床诊断中具有广阔的应用前景。(本文来源于《扬州大学》期刊2018-06-01）
丁玎[8]（2018）在《生物分子功能化纳米酶的模拟酶性质及可视化生物传感应用》一文中研究指出近年来,随着纳米技术的发展,具有天然酶性质的无机纳米酶倍受研究者关注。与天然酶相比,纳米酶具有成本低廉、制备简单、易于保存运输、环境耐受性高等优点,已广泛应用于催化化学、分析化学和生物医学等领域。无机纳米酶表面的物化特性是影响其类酶催化活性的关键因素,因此纳米酶的表面修饰为新型纳米酶的设计、制备和应用提供了契机。氨基酸和蛋白质用于合成多功能纳米材料具有明显的优势,例如温和的反应条件、独特的分子结构、多样化的功能、高度特异性的生物识别和灵活的自组装能力。基于此,研究制备了氨基酸和蛋白质修饰的纳米酶,并对它们的类过氧化物酶活性以及在可视化检测生物分子应用等方面进行了研究,主要开展了以下叁个方面的工作:1.组氨酸功能化金纳米团簇的模拟酶性质及可视化检测铜离子和组氨酸结合组氨酸稳定的纳米金团簇(His-AuNCs)模拟酶性质和组氨酸的两可配体性质,发展了一种基于纳米金团簇的类酶活性“开关”探针检测铜离子和组氨酸的新方法。以组氨酸为还原剂和稳定剂,水相合成了组氨酸稳定的纳米金团簇。His-AuNCs在以3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)和双氧水作为底物时表现出较强的类过氧化物酶的活性。向His-AuNCs中加入Cu~(2+),Cu~(2+)与His-AuNCs中组氨酸中的羧基与氨基以配位作用结合于团簇表面,降低TMB与纳米酶的亲合性,导致纳米酶活性的降低,且模拟酶活性降低程度与铜离子的浓度线性相关,从而实现对铜离子可视化检测。更为有趣的是,向His-AuNCs/Cu~(2+)中加入游离的组氨酸时,由于组氨酸中咪唑环参与配位,Cu~(2+)与组氨酸的强配位结合使Cu~(2+)离开His-AuNCs表面,His-AuNCs的模拟酶活性又得以恢复,且模拟酶活性恢复程度与组氨酸的浓度线性相关,进一步实现对组氨酸的检测。本工作首次基于纳米金团簇的过氧化物模拟酶性质构建了铜离子和组氨酸比色传感。该方法避免了对纳米金进行复杂的表面修饰和固定化,操作简便快捷,成本低廉,且具有高灵敏度、选择性和可视化等特点。2.组氨酸功能化磁性粒子的模拟酶性质及可视化检测抗坏血酸纳米粒子的表面修饰不仅可以有效防止Fe_3O_4磁性纳米粒子的聚集,还会影响其本身的类过氧化物酶活性。本章我们用共沉淀法合成了稳定的组氨酸修饰的Fe_3O_4纳米粒子(His-Fe_3O_4 NP),所制备粒子具有类过氧化物酶活性,并系统地研究了抗坏血酸(AA)对His-Fe_3O_4 NP纳米酶的类酶活性的影响及作用机制。抗坏血酸对纳米酶活性的影响在很大程度上取决于纳米酶表面组分和底物的结构。AA的加入对纳米酶的催化活性具有双重作用。一方面,AA可以加速Fe~(3+)向Fe~(2+)的还原,增强粒子的活性;另一方面,AA本身可与羟基自由基直接反应消耗自由基而抑制酶的活性。选择不同的底物,则这两个因素发挥不同的作用,因此AA对纳米酶的活性表现出不一样的调控作用。在此基础上,我们构建了高选择性和高灵敏度的抗坏血酸传感器,检测限可以达到1 nM(s/n=3)。这不仅加深了对有机生物小分子调控四氧化叁铁纳米酶活性的理解,而且对合理设计和应用纳米酶提供了重要理论依据。3.酪蛋白功能化磁性粒子的模拟酶性质及可视化检测乙醇本章通过水热法制备了酪蛋白稳定的Fe_3O_4纳米粒子,以TEM,SEM,FT-IR,XRD和XPS等测试手段对产物进行表征,结果表明酪蛋白对Fe_3O_4纳米粒子的稳定起了重要作用。进一步研究结果表明,Casein-Fe_3O_4复合微粒中的蛋白分子对Fe_3O_4纳米粒子的类过氧化物酶活性具有增强效应。基于复合粒子的类过氧化物酶活性,我们构建了一种速度快,灵敏度高测定H202的方法。检测限为50nM(s/n=3),线性范围为50nM-10μM。并在Casein-Fe_3O_4复合粒子的基础上制备乙醇氧化酶/酪蛋白功能化四氧化叁铁(AOx/Casein-Fe_3O_4)复合粒子,构建了一种快速简便测定乙醇的方法。检测限为10 μM,线性范围为10μM-10 mM。Casein-Fe_3O_4复合纳米微粒制备简单、容易储存、生物相容性好、易进行磁分离,因此基于具有类过氧化物酶活性的蛋白质功能化纳米酶构建酶级联反应平台在生物医学和环境等相关领域中有着潜在的应用空间。(本文来源于《扬州大学》期刊2018-06-01）
韩冰,王施岚,德青美朵,沈微,陈献忠[9]（2018）在《一种黑曲霉高耐热β-葡聚糖酶基因的克隆、表达及重组酶性质分析》一文中研究指出通过RT-PCR克隆、鉴定了黑曲霉中编码1种葡聚糖酶基因eglA6,所编码的重组酶蛋白命名为AneglA6。通过密码子优化提高了AneglA6在巴斯德毕赤酵母中的表达水平,对重组酶进行纯化并研究酶学性质,重组酶表观分子量约为52 ku。以大麦葡聚糖为底物时,重组酶比酶活为12 450. 6 U/mg;以CMC-Na为底物时,酶活是1 645. 7 U/mg;以酵母葡聚糖等β-1,3-葡聚糖为底物时,重组酶未表现出明显的活力。重组酶最适温度为75℃,在75℃和70℃下半衰期分别为1. 9和4. 6 h。AneglA6最适pH为4. 0,在pH 3. 0～5. 5范围内具有酶活力的50%以上。AneglA6是一种在酸性和高温条件下有较高活力和稳定性的耐热内切-β-1,4-葡聚糖酶。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2018年11期）
刘梁涛[10]（2018）在《高效木质素降解菌菌株的筛选、鉴定及漆酶性质的研究》一文中研究指出木质素是一种高分子的聚合物,在自然界中的含量仅仅低于纤维素,作为苯丙烷的基本结构单元,其连接形式通过C-C键和C-O-C键相互连接,从而构成无规则的空间叁维结构,因而在自然存在的状态下难以被降解。目前在利用微生物降解的同时,也使得能产生大量的降解木质素的酶对木质素进行分解转化,不单单可以治理环境污染的问题,而且可以合理利用自然界中的木质素资源。因此,利用合理的方法分离纯化木质素降解菌,探索产酶能力及发酵条件,构建高效表达漆酶基因工程菌并应用于生产实践显得尤为重要,这将大大加快木质素原料在工农业生产的利用步伐,同时也是制约环境污染的关键所在。试验一高产漆酶菌株的筛选及鉴定为了获得高产漆酶的菌株用于降解木质素,分别从新乡周边腐木堆积处、秸秆堆积处和造纸厂废水这些木质素含量丰富的地方取样。本研究以木质素为唯一碳源,初筛出42株对木质素具有降解能力的菌株,采用愈创木酚平板法对产漆酶的菌株进行复筛得到4株产漆酶能力较强的真菌菌株,通过生理生化及18 SrDNA序列分析对菌株进行鉴定,确定了2号菌株为疣孢漆斑菌(Myrothecium verrucaria),6号菌株为粗毛革孔菌(Coriolopsis gallica),8号菌株为黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium),11号菌株为白腐菌(White rot fungi)。并通过液态发酵培养及ABTS法对漆酶活性木质素降解能力进行研究。试验二目的菌株产酶能力的比较及发酵条件的探索研究挑取筛选出来的四种真菌菌株于液体培养基中,制备粗酶液,并利用ABTS法每天测定上清液中的酶活力。试验表明,在经过培养6天后,8号菌株漆酶活力达到最高,为233.33 U/L。接下来以黄孢原毛平革菌为目的菌株为研究对象,利用液态发酵研究碳源、氮源、金属离子、pH、温度对其发酵产漆酶的影响,优化产酶条件。结果表明:该菌株的最优碳源为乳糖,最优氮源为酵母粉,最适铜离子浓度为0.6 mmol/L,最适温度为30℃,最适pH为4。在此条件下木质素去除率达到了84.7%,具有良好的降解木质素的能力,为进一步利用此菌株进行工业化生产奠定了基础。试验叁黄孢原毛平革菌漆酶基因的克隆表达及蛋白的纯化为了获得高产漆酶的工程菌株,根据目前已知的黄孢原毛平革菌中的漆酶基因序列,设计特异性的引物,通过PCR扩增,可以成功的获得cds区为1680bp片段,送生工测序后对比发现此基因的序列与目前已公布的漆酶基因片段的同源性达98%,这就表明我们成功克隆到了该基因,将其命名为lac1680。在漆酶基因两段引入Nde I和Xho I进行酶切,将切下来的漆酶基因,通过pET-24a载体进行连接转化到大肠杆菌原核菌株中,得到基因工程菌。将我们得到的漆酶的氨基酸序列和GeneBank中现有的真菌漆酶氨基酸序列对比分析表明:该氨基酸序列与其它真菌漆酶蛋白序列有较高的序列同源性;通过对重组菌预表达的全菌裂解物进行SDS-PAGE,出现75KDa目的条带,表明诱导表达成功;预表达成功后,通过收菌,破碎,上样流出液进行NI-NTA的层析柱,对纯化洗脱下来的mco1-c-His6蛋白进行纯化;为了更进一步的验证这个条带就是所需的漆酶条带,我们通过WesternBlot方法,洗脱纯化后和浓缩后的溶液中在目的位置都出现了75KDa的目的条带,证明这个条带就是诱导纯化后的漆酶。并经纯化回收后,漆酶纯度在98%以上。通过酶学性质的探究,对比基因工程菌和黄孢原毛平革菌培养不同时间酶活力的比较,构建好的工程菌活力比原菌酶活力有明显的提高,提高了39%,为进一步利用工程菌株进行工业化生产奠定了基础,也为以后的应用指明了方向。(本文来源于《河南师范大学》期刊2018-05-01）
酶性质论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为鉴定金黄杆菌属(Chryseobacterium)菌株vv8及分析其胞外蛋白酶的酶学特性,首先,通过分子及生理生化特性对菌株vv8进行鉴定;然后,采用明胶平板筛选法和Lowry法对菌株vv8进行产酶筛选和蛋白酶活性测定;最后,研究pH值、温度、金属离子和抑制剂对该蛋白酶活性的影响.研究结果表明:菌株vv8的16S rDNA与比目鱼黄杆菌(C.scophthalmum)具有98.24%的序列相似性,属于Chryseobacterium属;菌株vv8的最适生长条件是温度为22℃,NaCl质量浓度为0 mg·mL~(-1),pH值为6.0;菌株vv8的胞外蛋白酶在pH值为5.0～10.0,温度为0～90℃范围内均具有酶活性,其最适酶活温度和pH值分别为40℃,8.5;在最适条件下,蛋白酶具有较高的稳定性,在冻干过程中,添加葡萄糖具有明显的酶活保护作用;Fe~(3+),Fe~(2+),Cu~(2+)等金属离子及乙二胺四乙酸(EDTA)对酶活性有明显的抑制作用,该酶对洗衣液和尿素具有较好的耐受性.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酶性质论文参考文献
[1].柳萌,刘瑞玲,郜海燕,吴伟杰,孙健.蓝莓采后病原菌胞外脂肪酶的提取及粗酶性质研究[J].中国食品学报.2019
[2].何小玉,刘承忠,陈明霞,李和阳.产碱性冷适蛋白酶菌株Chryseobacteriumsp.vv8的鉴定及粗酶性质[J].华侨大学学报(自然科学版).2019
[3].徐萌,杨召阳,李夏云,路宜男,陈依帆.纹藤壶附生菌的分离鉴定及蛋白酶菌株的产酶性质研究[J].中国食物与营养.2019
[4].何丽.二羧基邻菲啰啉金属有机凝胶的制备及其模拟酶性质的分析应用研究[D].西南大学.2019
[5].何建川.铁基金属有机框架及其纳米复合材料的模拟酶性质及应用研究[D].西南大学.2018
[6].王佳懿,李泰仑,王天女,卢磊.短小芽孢杆菌LC01的鉴定及其芽孢漆酶性质的研究[J].南京林业大学学报(自然科学版).2018
[7].郑苑琳.蛋白质功能化铂及其复合材料的模拟酶性质与可视化传感应用[D].扬州大学.2018
[8].丁玎.生物分子功能化纳米酶的模拟酶性质及可视化生物传感应用[D].扬州大学.2018
[9].韩冰,王施岚,德青美朵,沈微,陈献忠.一种黑曲霉高耐热β-葡聚糖酶基因的克隆、表达及重组酶性质分析[J].食品与发酵工业.2018
[10].刘梁涛.高效木质素降解菌菌株的筛选、鉴定及漆酶性质的研究[D].河南师范大学.2018
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