miR-29c对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞增殖与凋亡的影响及其机制的初步研究

miR-29c对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞增殖与凋亡的影响及其机制的初步研究

论文摘要

目的研究miR-29c对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法空白对照组、miR-29c过表达阴性对照组、miR-29c过表达组、miR-29c抑制表达阴性对照组、miR-29c抑制表达组预先转染HUVECs,再用TNF-α(10 ng/mL)诱导HUVECs 48 h,然后分别采用MTT法和Hoechst 33342荧光染色法检测miR-29c对TNF-α诱导HUVECs增殖活力及凋亡的影响;再采用Western blot技术检测miR-29c对Akt、eNOS磷酸化水平及eNOS蛋白表达的影响。结果 miR-29c可显著降低TNF-α诱导的HUVECs的增殖活力(P<0.05);Heochst 33342荧光染色结果显示,miR-29c可促进TNF-α诱导的HUVECs凋亡(P<0.05);miR-29c可显著下调Akt、e NOS的磷酸化(P<0.05),但其对e NOS蛋白的表达无影响。结论 miR-29c可降低TNF-α诱导的HUVECs增殖,并促进其凋亡,其机制可能与下调Akt、e NOS的磷酸化相关。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 一般材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 细胞培养及处理
  •     1.2.2 细胞的转染
  •     1.2.3 MTT法检测HUVECs增殖活力
  •     1.2.4 Hoechst 33342荧光染色法检测HUVECs凋亡
  •     1.2.5 Western blot法检测HUVECs的eNOS、p-Akt及p-eNOS磷酸化蛋白的表达
  •     1.2.6 总一氧化氮检测试剂盒检测HUVECs中NO释放量
  •   1.3 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 TNF-α诱导HUVECs最佳时间和浓度的筛选
  •   2.2 TNF-α诱导对HUVECs miR-29c表达的影响
  •   2.3 miR-29c mimics转染对HUVECs增殖活力的影响
  •   2.4 mi R-29c对经TNF-α诱导的HUVECs增殖的影响
  •   2.5 miR-29c对经TNF-α诱导的HUVECs凋亡的影响
  •   2.6 miR-29c对Akt磷酸化(p-Akt)、eNOS磷酸化(p-eNOS)及eNOS蛋白表达的影响
  •   2.7 miR-29c对经TNF-α诱导的HUVECs NO释放量的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈武哲,冷超群,何彬彬

    关键词: 人脐静脉内皮细胞,增殖,凋亡

    来源: 中国现代医生 2019年35期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 心血管系统疾病

    单位: 永州职业技术学院基础医学部

    基金: 湖南省教育厅优秀青年项目(16B272)

    分类号: R54

    页码: 35-40+169

    总页数: 7

    文件大小: 1255K

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