产蛋白酶芽孢杆菌的筛选及其发酵对豆粕的影响

论文摘要

筛选高产蛋白酶芽孢杆菌并评价其发酵对豆粕的影响,从吉林省猪饲料中分离出1株蛋白酶产量为（519.1±4.7）U/g的需氧芽孢杆菌JL8。通过生化实验和16S rDNA基因分析,鉴定其为暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）。通过分析不同发酵时间芽孢杆菌产芽孢数量、豆粕中可溶性还原糖含量、总蛋白含量、可溶性蛋白与总蛋白的比值以及蛋白过敏源降解情况,确定最佳发酵时间,并在最佳发酵时间下,通过扫描电镜（scanning electronmicroscopy,SEM）和X射线衍射（X-raydiffraction,XRD）分析芽孢杆菌发酵对豆粕蛋白微观结构的影响。结果表明:在37℃、物料含50%水的条件下,24 h为最佳发酵时间。发酵24 h后,SEM结果显示发酵显著改变了豆粕蛋白的微观结构,使其结构更加疏松。XRD结果显示发酵改变了蛋白质的主链结构,并且使β-折叠结构在二级结构中的占比大幅度提高,可能会提高豆粕蛋白的溶解性。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与培养基
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 方法
•     1.3.1 产蛋白酶菌株筛选
•     1.3.2 产蛋白酶菌株的鉴定
•       1.3.2. 1 形态观察
•       1.3.2. 2 生理生化鉴定
•       1.3.2.316S rDNA序列扩增与鉴定
•     1.3.3 豆粕发酵时间对豆粕成分的影响
•       1.3.3. 1 豆粕发酵
•       1.3.3. 2 芽孢随时间的生长变化
•       1.3.3. 3 可溶性还原糖检测
•       1.3.3. 4 粗蛋白检测
•       1.3.3. 5 可溶性蛋白检测
•       1.3.3. 6 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodiumdodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）检测致敏蛋白分解
•     1.3.4 豆粕蛋白提取
•     1.3.5 SEM检测
•     1.3.6 豆粕蛋白XRD检测
•   1.4 数据分析
• 2 结果与分析
•   2.1 菌株的筛选
•     2.1.1 初筛
•     2.1.2 复筛
•   2.2 菌株鉴定
•     2.2.1 形态学鉴定
•     2.2.2 生理生化鉴定
•     2.2.3 菌株JL8的分子生物学鉴定
•   2.3 发酵时间对豆粕营养成分的影响
•     2.3.1 发酵菌株芽孢数分析
•     2.3.2 豆粕可溶性还原糖含量分析
•     2.3.3 豆粕总蛋白含量分析
•     2.3.4 豆粕可溶性蛋白占总蛋白含量分析
•     2.3.5 SDS-PAGE检测过敏蛋白
•   2.4 发酵豆粕蛋白的微观结构
•   2.5 蛋白结构的XRD分析
• 3 结论与讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 郑丽,李达,牛红红,苗欣宇,王景会,苏颖

关键词: 芽孢杆菌,蛋白酶,发酵豆粕,扫描电镜,射线衍射

来源: 食品科学 2019年20期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业,轻工业手工业

单位: 吉林省农业科学院农产品加工研究所

基金: 吉林省农业科技创新工程杰出青年项目（CXGC2017JQ009）,吉林省农业科技创新工程自由创新项目(CXGC2017ZY018,CXGC2018ZY003)

分类号: TS229;TQ920.6

页码: 185-191

总页数: 7

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