蚤状溞caspase-3基因在不同环境条件下的表达分析

论文摘要

以蚤状溞（Daphnia pulex）为研究对象,采用Real-Time PCR技术分析了蚤状溞caspase-3 mRNA表达水平随着不同培养温度、种群密度和食物种类变化;用Caspase-3的特异性底物Ac-DEVD-AMC测定了Caspase-3酶活在不同培养温度、种群密度和食物种类条件下的变化,并通过整体原位杂交检测了caspase-3基因在蚤状溞不同生殖状态下的定位表达。研究结果:蚤状溞caspase-3 mRNA表达量随着温度和种群密度的增加而增加;以Banta培养液培养的蚤状溞caspase-3 mRNA表达量与小球藻培养的表达量无显著差异（P> 0. 05）;且caspase-3 mRNA的表达量与Caspase-3酶活的变化规律相一致;整体原位杂交结果显示,caspase-3基因在蚤状溞活体细胞几乎都有表达,在两性溞中表达量较高,孤雌成溞中表达量较低。caspase-3基因的表达与环境有关,而蚤状溞的衰老和caspase-3 mRNA的表达及Caspase-3的酶活有关,但环境因子如何影响caspase-3基因的表达进而调控枝角类生殖转换还需今后进一步的研究。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验材料驯化与培养
•   1.2 不同温度下蚤状溞的培养
•   1.3 不同密度下蚤状溞的培养
•   1.4 不同食物投喂下蚤状溞的培养
•   1.5 蚤状溞总RNA的提取和第一链c DNA的合成
•   1.6 caspase-3基因荧光定量
•   1.7 Caspase-3酶活的检测
•   1.8数据处理
•   1.9 caspase-3 RNA探针的制备
•   1.1 0 整体原位杂交检测caspase-3基因的表达定位
• 2 结果
•   2.1 蚤状溞存活率和生长情况观察
•   2.2 蚤状溞caspase-3 mRNA在不同环境条件下的表达
•     2.2.1 蚤状溞caspase-3 mRNA在不同温度下的表达
•     2.2.2 蚤状溞caspase-3 mRNA在不同种群密度下的表达
•     2.2.3 蚤状溞caspase-3 mRNA在不同食物下的表达
•   2.3 蚤状溞Caspase-3酶活性在不同环境因子中的变化
•     2.3.1 蚤状溞Caspase-3酶活性在不同温度下的变化
•     2.3.2 蚤状溞Caspase-3酶活性在不同密度下的变化
•     2.3.3 蚤状溞Caspase-3酶活性在不同食物条件下的变化
•   2.4 整体原位杂交检测caspase-3基因在蚤状溞不同生殖状态下的表达
• 3 讨论
•   3.1 温度对蚤状溞caspase-3 mRNA表达和酶活的影响
•   3.2 种群密度对蚤状溞caspase-3 mRNA表达和酶活的影响
•   3.3 食物种类对蚤状溞caspase-3 mRNA表达和酶活的影响
•   3.4 caspase-3基因在蚤状溞不同生殖状态下的定位表达
• 4结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 吴乐乐,叶功照,童巧琼,王丹丽

关键词: 蚤状溞,基因,表达,酶活,原位杂交

来源: 生物学杂志 2019年01期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 宁波大学海洋学院,宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室

基金: 国家自然基金项目(31572221)

分类号: Q953

页码: 29-34

总页数: 6

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