食品中克罗诺杆菌属双重PCR检测试剂盒的评价

论文摘要

【背景】在食品安全领域,克罗诺杆菌属于需要重点监测的致病菌,当前随着分子检测相关技术的不断发展,研制有关食品中克罗诺杆菌简便、高效的检测产品至关重要。【目的】研制克罗诺杆菌检测的双重PCR检测试剂盒并评价其用于食品中克罗诺杆菌检测的实效性。【方法】优化双重PCR反应体系,反应试剂采用冻干工艺,确立了试剂盒组成,并评价其特异性、灵敏度、重复性、保质期等性能指标。【结果】克罗诺杆菌标准菌株和分离菌株均在目标位置出现两条明显条带,非克罗诺杆菌标准菌株和分离菌株均检测为阴性,纯基因组DNA检测灵敏度为2.3×10-1 ng/μL,纯培养菌检验限为3.2×104CFU/mL;对65份食品样品进行克罗诺杆菌检测,该试剂盒检测结果与标准方法检测结果一致性较高;批内、批间检测重复率均为100%,可在42°C环境放置120 h且其检测效力不受影响,4°C保质期可长达12个月。【结论】该试剂盒性能好,检测结果稳定、可靠,适用于食品中克罗诺杆菌的快速检测。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 菌株
•   1.2 主要试剂与仪器
•   1.3 方法
•     1.3.1 双重PCR检测体系建立
•     1.3.2 试剂盒制备
•     1.3.3 各种DNA样品制备
•     1.3.4 特异性试验
•     1.3.5 灵敏度试验
•     1.3.6 与标准检测方法对比验证
•     1.3.7 重复性验证
•     1.3.8 保质期验证
• 2 结果与分析
•   2.1 双重PCR检测体系的建立
•   2.2 特异性试验
•   2.3 灵敏度试验
•   2.4 与标准检测方法的对比验证
•   2.5 重复性验证
•   2.6 保质期验证
• 3 讨论与结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 周杨,万强,蔡芷荷,卢勉飞,吴清平,李健顺

关键词: 克罗诺杆菌,双重检测试剂盒,性能评价

来源: 微生物学通报 2019年09期

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 广东环凯微生物科技有限公司,广东环凯生物科技有限公司,广东省微生物研究所

基金: 广东省重大科技专项项目(2015B020230006),广州市科技计划项目(201604016068),国家重点研发计划(2018YFC1604201)~~

分类号: TS207.4

DOI: 10.13344/j.microbiol.china.190044

页码: 2282-2291

总页数: 10

文件大小: 1065K

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