神经生长因子及其受体调节胶质瘤细胞Warburg效应促进其转移的作用机制研究

论文摘要

目的:探究神经生长因子（nerve growth factor,NGF）及其受体调节胶质瘤细胞Warburg效应促进其转移的作用机制。方法:Western blot和实时荧光定量PCR检测3株胶质瘤细胞中NGF以及TrkA的蛋白及m RNA水平。以U251为实验细胞,将U251分为Control组和NGF组,50μg/L的NGF干预。CCK-8检测细胞活力,PI染色后流式细胞术检测细胞周期的变化,Transwell小室实验检测细胞的侵袭能力,Western blot检测神经生长因子受体（growth factor receptor,TrkA）、AKT、PI3K以及代谢酶磷酸果糖激酶（Phosphofructokinase,PFK）、丙酮酸激酶M2（pyruvate kinase M2,PKM2）的表达水平,检测葡萄糖摄取水平、乳酸水平、细胞氧耗水平。将U251细胞分为为Control组、AKT inhibitor组和NGF组,Control组为常规培养细胞,AKT inhibitor组为AKT抑制剂预处理后再使用50μg/L的NGF干预,而NGF组为50μg/L的NGF干预。同样进行上述检测。结果:胶质瘤细胞中NGF和TrkA水平高于胶质细胞,其中U251水平最高。NGF干预后,U251细胞活力增高,NGF组细胞中G2期明显高于Control组,NGF组细胞的侵袭数目明显高于Control组,NGF组细胞中TrkA、AKT、PI3K的蛋白水平明显高于Control组。而代谢酶PFK、PKM2的表达水平明显低于Control组。NGF组细胞葡萄糖摄取水平、乳酸水平、细胞氧耗水平相比Control组具有明显差异。AKT信号抑制后,NGF组细胞活力高于Control组、AKT inhibitor组,NGF组细胞中G2期比例明显高于Control组和AKT inhibitor组。NGF组细胞的侵袭数目明显高于Control组和AKT inhibitor组,NGF组细胞中TrkA、AKT、PI3K的蛋白水平明显高于Control组和AKT inhibitor组。而代谢酶PFK、PKM2的表达水平明显低于Control组和AKT inhibitor组。NGF组细胞葡萄糖摄取水平、乳酸水平、细胞氧耗水平相比Control组和AKT inhibitor组具有明显差异。结论:NGF可以通过TrkA-PI3K/AKT信号促进胶质瘤细胞Warburg效应,促进其转移。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1主要试剂和材料
•   1.2 细胞实验分组
•   1.3 Western blot检测蛋白的表达
•   1.4 RT-QPCR检测mRNA的表达水平
•   1.5 CCK-8检测细胞活力
•   1.6 Transwell小室检测细胞迁移的能力
•   1.7 葡萄糖摄取水平和乳酸产生水平的检测
•   1.8 细胞氧耗的检测
•   1.9 统计学处理
• 2 结果
•   2.1 胶质瘤细胞中NGF及TrkA的表达水平
•   2.2 NGF对于U251细胞生物学作用及Warburg效应的影响
•   2.3 阻断AKT信号后，NGF对于U251细胞生物学作用及Warburg效应的影响
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杜鹏程,张海军,武焕颖,郭伟伦

关键词: 神经生长因子,胶质瘤细胞,效应,转移

来源: 重庆医科大学学报 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 神经病学,肿瘤学

单位: 河北省承德市中心医院神经外科

基金: 2016年河北省级重大医学科研课题资助项目(编号:zd2016008)

分类号: R739.41

DOI: 10.13406/j.cnki.cyxb.002262

页码: 1571-1576

总页数: 6

文件大小: 1960K

下载量: 144