论文摘要
目的:探索小鼠肺组织内造血干细胞分离、纯化与诱导分化为树突细胞（dendriric cell,DC）的方法,为小鼠肺组织内造血干细胞的相关研究提供理论基础和实验方法。方法:4只雄性C57小鼠肺组织经I型胶原酶、I型DNA酶和淋巴细胞分离液消化、分离、纯化为单个核细胞,采用流式细胞仪鉴定和分选Lin-Sca-1+c-Kit+细胞即造血干细胞（HSC）。向所获得的HSC加入干细胞因子（SCF）和白介素（IL）-3促进细胞增殖。停用SCF和IL-3后,加入粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和IL-4将HSC诱导分化为DC,加入脂多糖（LPS）促细胞成熟。倒置显微镜下观察DC形态,流式细胞术分析DC细胞表面分子CD11c、MHC-II、CD80和CD86的表达,酶联免疫吸附技术（ELISA）检测IL-12表达水平。结果:从流式细胞仪分选鉴定的4只小鼠肺组织单个核细胞中,共收集HSC2419. 67±247. 59个,纯度7. 16%±0. 43%。HSC经SCF和IL-3诱导7 d后扩增62. 34±3. 23倍;诱导培养15 d后获得成熟的树突状细胞,细胞表面具有典型的树枝状突起,高表达树突状细胞特异性表面分子CDllc（92. 62±3. 68）%、MHC-II（75. 96±5. 13）%、CD80（72. 07±4. 38）%、CD86（83. 89±6. 28）%。ELISA检测IL-12的表达水平为136. 12±16. 59 pg/ml。结论:肺组织内存在HSC,可经细胞因子增殖诱导向DC转化。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 李怡,王晓旭,冯玫
关键词: 肺组织,造血干细胞,树突细胞
来源: 中国实验血液学杂志 2019年04期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技,基础科学
专业: 生物学,基础医学
单位: 山西医科大学,山西医科大学附属大医院全科医学科
基金: 国家自然科学基金项目(61875113)
分类号: R329.2
DOI: 10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2019.04.046
页码: 1272-1276
总页数: 5
文件大小: 810K
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