何玉林崔晓蓬班慧惠韦思明梁嘉慧强占荣李牧赵琰（桂林医学院广西桂林541004）
【摘要】目的研究桂花（金桂、银桂、丹桂、四季桂）提取物的抑菌活性。方法K-B法进行体外抑菌实验。结果金桂、银桂、丹桂、四季桂提取物对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌有抑菌环形成；但不同桂花对不同菌种的抑菌效果不同。结论桂花提取物有一定的抑菌活性。
【关键词】桂花抑菌K-B法
【中图分类号】R93【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）32-0179-02
1材料与方法
1.1材料
桂花:（购于桂林市乐群市场）
蛋白胨:(广州达晖生物技术有限公司)
琼脂粉:(广州达晖生物技术有限公司)
牛肉浸膏:(北京双旋微生物培养基制品厂)
NaCl:(广州化学试剂厂)
1.2菌株
标准菌株：金黄色葡萄球菌（A209）；大肠埃希菌（W1485）。
1.3培养基的制备
牛肉浸膏:1.5g蛋白胨:5.0gNaCl:2.5g琼脂粉：10.0g
称取以上试剂放入烧杯中，加入适量的蒸馏水在水浴锅里煮，直到完全溶化，后加水至500ml，用pH计测其pH为7.2（pH用1mol/LNaOH调节）。然后置于立式压力蒸汽灭菌器中121℃灭菌20min，取出后倒平板冷却备用。
1.4菌液制备
分别将标准菌株接种到琼脂平板上，置37℃培养箱中培养24h，用生理盐水将培养平板上的细菌洗脱下来，调整浊度，使其与标准比浊管（配法如下）的浊度相同，此时菌液浓度约为1.5×108CFU(colonyformingunit,CFU)/ml备用。
0.5麦氏比浊管配法如下：
0.048mol/LBaCL20.5ml
0.18mol/LH2SO499.5ml
将二液混合，置螺口试管中，放室温暗处保存。用前混匀。有效期为6个月。
1.5滤纸片的制备
将桂花提取物溶解于0.9%生理盐水，灭菌备用。每张纸片（直径6mm）加药物样品10ul,阴性对照为0.9%生理盐水，空白对照为无菌蒸馏水。
1.6K-B法
取菌液浓度为1.5×108CFU的菌株0.2ml，均匀涂布整个MH琼脂培养基表面，置室温10min后，用无菌镊子贴加制备好的含药滤纸片，然后将平皿置于37℃恒温培养箱培养24h后，测定其滤纸片周围抑菌环直径的大小。
2结果
如表1所示，金桂、银桂、丹桂、四季桂提取物能抑制金黄色葡萄球菌A209菌株和大肠埃希菌W1485菌株的生长繁殖而形成抑菌环，且抑菌环的直径随药物浓度的增加增大。同时显示桂花提取物的抑菌作用明显弱于青霉素钠和链霉素。
表1：金桂、银桂、丹桂、四季桂提取物体外抑菌结果（mm）
3讨论
桂花在我国已有2500多年的栽培历史，是我国的十大名花之一，古人对桂花就颇有研究,认为桂为百药之长，用桂花酿制的酒味感醇厚、沁人心脾、男女老少皆宜,并能达到“饮之寿千岁”的功效[1]。桂花性温、味辛，入肺、大肠经，煎汤、泡茶或浸酒内服，有温中散寒、暖胃止痛、化痰散瘀的作用，对食欲不振、痰饮咳喘、痔疮、痢疾、经闭腹痛有一定疗效[2、3].桂花含有黄酮，黄酮类化合物具有多方面的抗炎、抗氧化、抗肿瘤作用[4、5、6、7]。现代研究表明，桂花有很好的观赏价值,也是一种具有广泛防病治病效果的植物，价格便宜，随处可得,而且食用安全，在食品及医疗保健等方面更是有广阔的发展前景。但是桂花在抑菌实验方面研究的报道却很少，本实验着重研究金桂、银桂、丹桂、四季桂[8、9]提取物抑菌活性的比较,探索不同桂花的抑菌作用[10]。
该实验证明了桂花提取物可有效地抑制或杀灭一些革兰阳性和阴性细菌，金桂和丹桂对金黄色葡萄球菌的抑菌作用比较强，银桂对大肠埃希菌比较强，但其抑菌活性明显弱于青霉素钠和链霉素。
参考文献
[1]《中国中草药汇编》.
[2]《本草纲目》：“桂花可收茗，浸酒，盐渍，及作香擦发泽之类.”
[3]《陆川本草》：“治痰饮咳嗽.”
[4]郭娇娇.罗佳.宫智勇桂花中总黄酮提取工艺及其抗氧化活性的研究[期刊论文]-武汉工业学院学报2011(1).
[5]潘英明;张晓璞;朱金婵虎杖中抗氧化成分的提取分离及其活性研究[期刊论文]-精细化工2005(11).
[6]赵梅，周淑琴.黄酮类化合物抗肿瘤作用及其相关机制研究进展.药论.2011，20（23）:001-003.
[7]刘玉莲桂花品种分类及木犀属种质资源的利用[期刊论文]-植物资源与环境1993(02).
[8]木犀属植物的研究进展[期刊论文]《南京林业大学学报(自然科学版)》ISTICPKU-2003年2期刘龙昌向其柏.
[9]孙美萍.无锡桂花品种资源调查研究及其应用[学位论文]2005.
[10]六种植物源活性物质对黄瓜枯萎病菌的抑菌作用期刊论文]《湖北农业科学》ISTICPKU-2009年12期.
广西大学生科技创新课题，编号：JG2012058