导读:本文包含了酶促动力学论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:微粒,色素,补骨脂,细胞,柠檬酸,甲基,力学。
酶促动力学论文文献综述
夏涛,王昌权,陈浩,郑林,巩仔鹏[1]（2019）在《白及有效成分Militarine在肝微粒体中的体外代谢途径及其酶促动力学特征》一文中研究指出目的:研究白及有效成分Militarine在肝微粒体中的体外代谢途径及其酶促反应动力学特征。方法:建立大鼠和人肝微粒体体外孵育体系,对Militarine进行体外孵育反应;采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术,结合UNIFI数据库并参考文献对其代谢产物进行结构鉴定。同时,以葛根素为内标,采用超高效液相色谱-叁重四极杆串联质谱联用技术对Militarine在大鼠肝微粒体中的代谢转化量进行定量分析,通过GraphPad Prism 5.0软件拟合代谢转化曲线,并计算在有/无还原性辅酶Ⅱ(NADPH)参与的反应条件下的Militarine酶促动力学参数[最大清除速率(v_(max))、米氏常数(k_m)、固有清除率(CL_(int))]。结果:Militarine在大鼠和人肝微粒体中孵育后,生成了1个化学式为C_(21)H_(29)O_(11)的化合物,推测其为Militarine的酯键水解代谢产物。酶促动力学研究显示,有/无NADPH参与的Militarine酶促反应的v_(max)分别为1.955、2.129 nmol/(h·mg),k_m分别为8.601、9.854 nmol/mL,CL_(int)分别为0.227 3、0.216 1 mL/(h·mg),两者无明显差异。结论:Militarine在肝微粒体中的主要代谢途径为C1或C4位酯键的水解;其代谢不依赖于由NADPH启动反应的细胞色素P_(450)酶代谢途径。(本文来源于《中国药房》期刊2019年10期）
邓真真,叶明亮[2]（2017）在《基于蛋白质组学技术的复杂体系酶促动力学研究》一文中研究指出复杂体系酶促反应经常出现在各种生化分析过程中,比如酶底物的筛选、酶促标记以及蛋白质的酶解等。复杂体系中的酶底物不仅种类丰富,丰度的分布也在几个数量级以上,因此充分了解酶底物自身丰度与酶促反应速率之间的相互关系,有助于我们更好地理解复杂体系中酶促反应的进行,从而进一步从结果中提取更有意义的酶促信息,比如酶与特定底物之间的特异性常数等。我们之前的工作己经从实验结果角度己经发现复杂体系中的酶解反应速率几乎与底物的丰度无关,但是并没有足够的理论支持。这次我们在原有的工作基础上[1-3],以经典米氏动力学方程为基础,构建复杂体系中酶促反应动力学模型,从理论以及实验角度来全面地对体系中底物的丰度与其相应酶促速率之间的关系进行研究。从得到的方程p_i=1-(1-p_j)~((k_(cat)~i)/(κ_m~i)/(k_(cat)~j)/(k_m~j))(1)中可以看到,复杂体系中任意底物的消耗百分比不仅与自身动力学性质以及浓度相关,同样受到存在竞争关系的其他底物的影响。进一步对方程进行处理,我们得到方程ln(1-p_i)=((ln(1-p_j))/((k_(cat)~j)/(K_m~j))((k_(cat)~i)/(K_m~i)(2),将该方程应用到多底物体系可以得到:ln(1-p_1):ln(1-p_2):…:ln(1-p_i):…:ln(1-p_n)=(k_(cat)~1)/(K_m~1):(k_(cat)~2)/(K_m~2):…:(k_(cat)~i)/(k_m~i):...:(k_(cat)~n)/(K_m~n)(3),也就是说在一个确定的复杂体系当中,当酶促反应进行一定时间后,体系中各个底物剩余百分比的自然对数值与底物的催化效率常数之间存在线性关系,并且与底物的丰度无关。再进一步,当复杂体系中底物种类不变,但是底物之间相对丰度发生变化时,同样会存在:(ln(1-p_1):ln(1-p_2):…:ln(1-p_i):…:ln(1-p_n)_A=(k_(cat)~1)/(K_m~1):(k_(cat)~2)/(K_m~2):...:(k_(cat)~i)/(K_m~i):...:(k_(cat)~n)/(K_m~n)=(ln(1-p_1):ln(1-p_2):...:ln(1-p_i):...:ln(1-p_n)}_B(4)。完善理论模型之后,我们分别利用多条标准肽段构成的模拟复杂体系对方程(2)以及细胞裂解液构成的实际复杂体系对方程(4)的准确性进行考察(见图1及图2),并且得到相应线性关系,验证我们的理论模型的正确性。因此,从我们的理论推导和实验结果中都可以发现,对于一个存在多种底物且底物丰度分布多样的复杂酶促体系,任意底物的消耗速率会受到自身以及其他共存底物性质与浓度的影响,但是底物之间的消耗速率之比与其催化效率之间存在线性关系,与丰度无关,该发现有利于进行复杂体系酶促体系的深入研究。(本文来源于《第叁届全国质谱分析学术报告会摘要集》期刊2017-12-09）
魏文增,黄慧玲,叶丽香,林菁,俞昌喜[3]（2017）在《钩吻素子在人和猪、大鼠、猴、犬肝微粒体的酶促动力学及CYP450酶亚型分析》一文中研究指出目的研究和比较钩吻素子(KM)在人与各种实验动物肝微粒体体外代谢的酶促动力学及选择性CYP450酶抑制剂对其代谢的影响。方法采用优化的反应体系和UPLC检测方法,测定系列浓度的KM与各种属肝微粒体孵育的降解曲线,以底物消除法计算酶动力学参数;共孵育方法考察选择性CYP450酶抑制剂对KM在各种属肝微粒体代谢的影响。结果在人肝微粒体,KM的米氏常数(K_m)、最大反应速率(V_(max))、半哀期(T_(1/2))、固有清除率(CL_(int))分别为(0.135±0.067)mmol/L、(1.89±0.19)μmol·min~(-1)·g~(-1) pro、(712±23)min和(15.7±5.2)mL·min~(-1)·g~(-1)pro。与人相比,犬、猪的K_m值较大,大鼠及猴的CL_(int)较高,4种实验动物的V_(max)值均较大、T_(1/2)均较短。酮康唑在各种属均可显着抑制KM代谢,在人、猪、犬IC_(50)<1μmol/L,在大鼠、猴IC_(50)为1~10μmol/L,可见CYP3A为主要代谢酶。噻氯匹定、奎尼丁和磺胺苯吡唑仅对大鼠,噻氯匹定仅对猴和犬的KM代谢为弱抑制(抑制率20.43%~44.31%),说明在体情况下,CYP2B、CYP2D和CYP2C与KM的代谢可能无关。结论 KM在人与猪、大鼠、犬、猴肝微粒体中的主要代谢途径相同,均由CYP3A酶催化,但酶活性和代谢动力学特征有一定差异。(本文来源于《福建医科大学学报》期刊2017年02期）
龚振兴[4]（2016）在《第一篇：柔嫩艾美耳球虫2-甲基柠檬酸合成酶的酶促动力学分析 第二篇：鸡球虫基因组DNA甲基化修饰的检测》一文中研究指出基因组数据分析发现,鸡球虫具有真菌样Ⅰ型2-MCC途径催化酶的编码基因。抑制或阻断2-MCC途径有可能成为抗球虫药物的新药靶,对开发新型抗球虫药物、建立球虫病防治的新策略具有重要意义。本文在基因组数据分析的基础上,通过克隆和原核表达柔嫩艾美耳球虫2-MCC途径相关酶的基因,并对柔嫩艾美耳球虫中的2-MCC途径关键酶2-甲基柠檬酸合成酶进行了体外酶活力测定和动力学分析,为进一步研究鸡球虫2-MCC途径及其相关酶的功能以及寻找新的药靶和开发新型抗球虫药物奠定了基础。本文的主要工作包括：1.通过RT-PCR的方法,成功克隆获得了编码EtMS. EtACN. EtCS. EtACS的基因的全长ORF序列以及EtMD和EtML编码基因的部分序列,证实了2-MCC途径在鸡球虫中的存在。2.鸡球虫基因组数据生物信息学分析发现,编码EtPrpE的基因序列与编码EtACS基因序列完全一致。根据在部分细菌中已报道的研究结果推测,在鸡球虫中,ACS可能同时具有PrpE功能。3. EtMS. EtACN. EtCS和EtACS分别在大肠杆菌表达系统中成功获得表达,为进一步研究其功能奠定了基础。4.获得了具有活性的重组表达蛋白MBP-EtMS,并对其进行了酶促动力学分析。证实EtMS不仅能利用丙酰辅酶A为底物还能以乙酰辅酶A为底物,进一步说明鸡球虫中的2-MCC途径与细菌中的2-MCC途径类似,可能也具有TCA循环的旁路功能。但其抑制物的筛选和抑制动力学分析有待进一步深入研究。DNA甲基化是在DNA甲基转移酶(DNA Methyltransferases, DNMTs)催化作用下,利用S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)提供甲基,在CpG二核苷酸中胞嘧啶嘧啶环的5号碳原子上加上甲基的共价修饰过程(5-methylcytosine,5-mC)。基因组DNA甲基化作为一种重要的表观遗传修饰系统,在调控基因表达、细胞分化以及其它各种生命过程中起到了非常重要的作用。本研究通过检测4种鸡球虫基因组DNA甲基化水平,还检测了刚地弓形虫、新孢子虫和3种隐孢子基因组DNA甲基化水平。另外,我们还对鸡球虫不同发育阶段的基因组DNA甲基化水平进行了检测。通过DNA甲基转移酶抑制物5-azacytidine处理子孢子和子孢子总蛋白提取物DNA甲基转移酶活性检测来验证鸡球虫体内是否具有有活性的DNA甲基转移酶,同时我们还克隆表达了柔嫩艾美耳球虫DNMT2编码基因,并对其进行了酶活力测定。通过体外培养模型,对DNA甲基化水平与鸡球虫入侵细胞的关系进行了初步研究。本文的主要结论是：1.证实了5-mC在顶复门原虫中广泛存在,但水平较低。2.5-mC水平在鸡球虫不同发育阶段差异显着,子孢子阶段明显高于其它4个阶段,说明基因组DNA甲基化在鸡球虫发育转化中可能发挥着重要作用。3.柔嫩艾美耳球虫子孢子基因组DNA甲基化水平能被DNA甲基转移酶抑制物5-azacytidine抑制,而且在柔嫩艾美耳球虫子孢子总蛋白提取物中能检测到DNA甲基转移酶样活性,说明鸡球虫体内存在可能的DNA甲基转移酶样机制。4. EtDNMT2可能不具有DNA甲基转移酶活性。5.体外试验证实了抑制子孢子基因组DNA甲基化水平能促进其入侵细胞。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2016-08-01）
李睿,阮文辉[5]（2016）在《纳豆激酶NKⅡ分离纯化及其酶促动力学研究》一文中研究指出该实验主要采用疏水柱层析分离纯化纳豆激酶NKII,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果为单一蛋白条带,分子量为28 ku,酶活回收率56.51%,纯化倍数17.90,比活力达48 407.77 IU/mg。采用纤维蛋白平板法及显色底物法测定酶活力,结果表明,两种方法相关性高。以S-2251为底物的动力学研究表明,米氏常数Km值为0.379 6 mmol/L,最大反应速度Vm值为0.059 8 mmol/(L·min),Ca2+、Mg2+对酶活稳定性效果明显。(本文来源于《中国酿造》期刊2016年07期）
韩邦兴,陈钧[6]（2016）在《醉鱼草有效组分杀灭钉螺的酶促动力学研究（英文）》一文中研究指出目的分析醉鱼草有效组分(AIBL)对湖北钉螺的酶促动力学影响。方法湖北钉螺浸泡于3.55 mg/L AIBL溶液中,分别于浸泡后24、48、72 h时用赖氏法测定钉螺GPT活性,用化学抑制乳酸底物法测定LDH活性,用磷酸苯二钠比色法测定AKP活性,ELISA法测定ACh E和MDH活性,硫酸甲酯吩嗪反应法测定钉螺SDH活性。结果浓度为3.55 mg/L的AIBL溶液在浸泡湖北钉螺24 h后,钉螺GPT、LDH、AKP活性显着提高,钉螺头足部及肝脏SDH和MDH活性显着降低,但对ACh E活力无影响。结论 AIBL能显着损害湖北钉螺肝脏、作用于无氧和有氧呼吸作用位点、影响能量代谢,并导致能源供应不足,最终导致钉螺死亡。(本文来源于《中国血吸虫病防治杂志》期刊2016年04期）
阳海鹰,钟玉环,陈琳,李桦,庄笑梅[7]（2015）在《补骨脂素和异补骨脂素在大鼠和人肝微粒体的酶促动力学》一文中研究指出目的研究中药有效成分补骨脂素和异补骨脂素的细胞色素P450(CYP)酶促动力学特征,比较其结构和种属差异,为体内药代动力学特征的预测提供科学依据。方法建立补骨脂素和异补骨脂素的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测方法,在优化人和大鼠肝微粒体孵育体系和评价体外代谢稳定性的基础上,进行了代谢稳定性和酶促动力学研究,应用非线性回归法计算最大反应速率(V_(max))和米氏常数(K_m)。结果应用建立的LC-MS/MS检测方法,补骨脂素、异补骨脂素在肝微粒体孵育液中定量范围为0.1~50.0μmol·L~(-1),线性关系良好,精密度和准确度等满足检测要求。体外代谢稳定性研究显示,当底物浓度为1μmol·L~(-1),蛋白浓度为0.5 g·L~(-1),孵育40 min内,补骨脂素和异补骨脂素在大鼠和人肝微粒体呈线性消除,体外半衰期分别为74.5,95.0,74.5和173.3 min。补骨脂素在大鼠和人肝微粒体中的V_(max)分别为:(1.140±0.080)μmol·min-1·g-1蛋白,(0.620±0.060)μmol·min-1·g-1蛋白;K_m分别为(12.9±0.3)μmol·L~(-1)和(7.4±1.3)μmol·L~(-1)。异补骨脂素在大鼠和人肝微粒体中的V_(max)分别为(0.251±0.012)μmol·min-1·g-1蛋白和(0.103±0.014)μmol·min-1·g-1蛋白;K_m分别为:(3.0±0.4)μmol·L~(-1)和(3.4±0.7)μmol·L~(-1)。结论补骨脂素和异补骨脂素的CYP酶促动力学特征及代谢稳定性具有一定的种属和结构差异,在大鼠两者基于CYP酶的代谢清除过程可能相似。而在人体,异补骨脂素的CYP代谢清除可能慢于补骨脂素,导致药代动力学特征的差异。(本文来源于《中国药理学与毒理学杂志》期刊2015年06期）
姚瑶,葛卫红[8]（2015）在《异丙酚在人肝微粒体中酶促动力学研究》一文中研究指出目的:研究异丙酚在人肝微粒体中的代谢。方法:高效液相色谱法测定孵育液中异丙酚的浓度。研究异丙酚的酶促动力学,推导出药物米氏常数(Km)和最大反应速度(Vmax);计算体外酶对药物的清除率(CLint)。同时观察CYP酶特异性抑制剂对异丙酚代谢的影响。结果:异丙酚在人肝微粒体中Km和Vmax分别为777.43μmol·L-1和172.41μmol·L-1·h-1·mg-1protein,CLint为0.22h-1·mg-1protein。CYP2B6特异性抑制剂氯吡格雷能够显着抑制异丙酚的代谢,而CYP2C9和CYP2C19特异性抑制剂对异丙酚代谢无显着影响。结论:异丙酚主要经CYP2B6代谢,CYP2B6酶抑制剂可能会抑制异丙酚的代谢,造成药效或毒性的增加。(本文来源于《药学与临床研究》期刊2015年04期）
姚瑶,葛卫红[9]（2014）在《异丙酚在人肝微粒体中酶促动力学研究》一文中研究指出目的:研究异丙酚在人肝微粒体中的代谢。方法:采用高效液相方法测定孵育液中异丙酚的浓度。研究异丙酚的酶促动力学,推导出药物米氏常数(Km)和最大反应速度(Vmax);并计算体外酶对药物的清除率(CLint)。同时观察不同种类的CYP酶特异性抑制剂对异丙酚代谢的影响。结果:异丙酚在人肝微粒体中Km和Vmax分别为777.43uM和172.413μM·h~1·mg~1·protein,Clint为0.22h1·mg~1·protein。CYP2B6抑制剂能够减少异丙酚的代谢。结论:CYP2B6主要参与异丙酚的代谢,CYP2B6酶抑制剂可能异丙酚的代谢受到抑制,造成药物药效或毒性的增加。(本文来源于《第四届全国治疗药物监测学术年会资料汇编》期刊2014-09-11）
姚瑶,葛卫红[10]（2014）在《异丙酚在人肝微粒体中酶促动力学》一文中研究指出目的:研究异丙酚在人肝微粒体中的代谢。方法:采用高效液相方法测定孵育液中异丙酚的浓度。研究异丙酚的酶促动力学,推导出药物米氏常数(Km)和最大反应速度(Vmax);并计算体外酶对药物的清除率(CLint)。同时观察不同种类的CYP酶特异性抑制剂对异丙酚代谢的影响。结果:异丙酚在人肝微粒体中Km和Vmax分别为777.43μmol·L-1和172.413μmol·L-1·h-1·mg-1,CLint为0.22 h-1·mg-1。CYP2B6抑制剂能够减少异丙酚的代谢。结论:CYP2B6主要参与异丙酚的代谢,CYP2B6酶抑制剂可能异丙酚的代谢受到抑制,造成药物药效或毒性的增加。(本文来源于《2014年全国医院药学（药物安全性与评价）学术会议论文汇编》期刊2014-07-18）
酶促动力学论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
复杂体系酶促反应经常出现在各种生化分析过程中,比如酶底物的筛选、酶促标记以及蛋白质的酶解等。复杂体系中的酶底物不仅种类丰富,丰度的分布也在几个数量级以上,因此充分了解酶底物自身丰度与酶促反应速率之间的相互关系,有助于我们更好地理解复杂体系中酶促反应的进行,从而进一步从结果中提取更有意义的酶促信息,比如酶与特定底物之间的特异性常数等。我们之前的工作己经从实验结果角度己经发现复杂体系中的酶解反应速率几乎与底物的丰度无关,但是并没有足够的理论支持。这次我们在原有的工作基础上[1-3],以经典米氏动力学方程为基础,构建复杂体系中酶促反应动力学模型,从理论以及实验角度来全面地对体系中底物的丰度与其相应酶促速率之间的关系进行研究。从得到的方程p_i=1-(1-p_j)~((k_(cat)~i)/(κ_m~i)/(k_(cat)~j)/(k_m~j))(1)中可以看到,复杂体系中任意底物的消耗百分比不仅与自身动力学性质以及浓度相关,同样受到存在竞争关系的其他底物的影响。进一步对方程进行处理,我们得到方程ln(1-p_i)=((ln(1-p_j))/((k_(cat)~j)/(K_m~j))((k_(cat)~i)/(K_m~i)(2),将该方程应用到多底物体系可以得到:ln(1-p_1):ln(1-p_2):…:ln(1-p_i):…:ln(1-p_n)=(k_(cat)~1)/(K_m~1):(k_(cat)~2)/(K_m~2):…:(k_(cat)~i)/(k_m~i):...:(k_(cat)~n)/(K_m~n)(3),也就是说在一个确定的复杂体系当中,当酶促反应进行一定时间后,体系中各个底物剩余百分比的自然对数值与底物的催化效率常数之间存在线性关系,并且与底物的丰度无关。再进一步,当复杂体系中底物种类不变,但是底物之间相对丰度发生变化时,同样会存在:(ln(1-p_1):ln(1-p_2):…:ln(1-p_i):…:ln(1-p_n)_A=(k_(cat)~1)/(K_m~1):(k_(cat)~2)/(K_m~2):...:(k_(cat)~i)/(K_m~i):...:(k_(cat)~n)/(K_m~n)=(ln(1-p_1):ln(1-p_2):...:ln(1-p_i):...:ln(1-p_n)}_B(4)。完善理论模型之后,我们分别利用多条标准肽段构成的模拟复杂体系对方程(2)以及细胞裂解液构成的实际复杂体系对方程(4)的准确性进行考察(见图1及图2),并且得到相应线性关系,验证我们的理论模型的正确性。因此,从我们的理论推导和实验结果中都可以发现,对于一个存在多种底物且底物丰度分布多样的复杂酶促体系,任意底物的消耗速率会受到自身以及其他共存底物性质与浓度的影响,但是底物之间的消耗速率之比与其催化效率之间存在线性关系,与丰度无关,该发现有利于进行复杂体系酶促体系的深入研究。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酶促动力学论文参考文献
[1].夏涛,王昌权,陈浩,郑林,巩仔鹏.白及有效成分Militarine在肝微粒体中的体外代谢途径及其酶促动力学特征[J].中国药房.2019
[2].邓真真,叶明亮.基于蛋白质组学技术的复杂体系酶促动力学研究[C].第叁届全国质谱分析学术报告会摘要集.2017
[3].魏文增,黄慧玲,叶丽香,林菁,俞昌喜.钩吻素子在人和猪、大鼠、猴、犬肝微粒体的酶促动力学及CYP450酶亚型分析[J].福建医科大学学报.2017
[4].龚振兴.第一篇：柔嫩艾美耳球虫2-甲基柠檬酸合成酶的酶促动力学分析第二篇：鸡球虫基因组DNA甲基化修饰的检测[D].中国农业科学院.2016
[5].李睿,阮文辉.纳豆激酶NKⅡ分离纯化及其酶促动力学研究[J].中国酿造.2016
[6].韩邦兴,陈钧.醉鱼草有效组分杀灭钉螺的酶促动力学研究（英文）[J].中国血吸虫病防治杂志.2016
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[9].姚瑶,葛卫红.异丙酚在人肝微粒体中酶促动力学研究[C].第四届全国治疗药物监测学术年会资料汇编.2014
[10].姚瑶,葛卫红.异丙酚在人肝微粒体中酶促动力学[C].2014年全国医院药学（药物安全性与评价）学术会议论文汇编.2014
论文知识图
