内皮祖细胞条件培养基对间充质干细胞向内皮细胞分化的影响

论文摘要

目的探讨体外小鼠内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）条件培养基（CM）对间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）向内皮细胞（endothelial cells,ECs）分化的影响。方法全骨髓贴壁法和差速贴壁法提取培养MSCs和EPCs,流式细胞术检测MSCs和EPCs表面标记物,双荧光染色和体外成管实验对EPCs进行功能鉴定。将MSCs分为0%EPCs-CM组（对照组）、25%EPCs-CM组和50%EPCs-CM组。qRT-PCR检测各组CD31、v WF、e NOS的mRNA表达水平。体外成管实验检测各组细胞的体外成管能力;免疫荧光检测各组MSCs CD31、CD34表达情况;对各组上清中的NO进行检测。结果流式细胞术结果显示,第3代MSCs高表达Sca-1,低表达CD34、CD11b;EPCs高表达CD34、CD133和VEGFR2,可吞噬Dil-AC-LDL和结合UEA-1。在基质胶上可形成管腔样结构。qRTPCR显示3周时50%EPCs-CM组CD31、v WF、e NOS表达（2. 28±0. 25,1. 76±0. 71,8. 27±1. 65）,较对照组显著升高（P<0. 05）。50%EPCs-CM组MSCs可体外形成管腔样结构;免疫荧光显示50%EPCs-CM组MSCs CD31和CD34的表达明显高于对照组。对照组细胞与实验组细胞上清液中NO的含量（8. 81+3. 41,20. 93±9. 47）μmol/L,差异显著（t=3. 96,P<0. 05）。结论 EPCs-CM能提高MSCs体外成管能力,并促进MSCs向ECs分化。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•   1.3 流式细胞术检测MSCs和EPCs的表面标记物
•   1.4 EPCs的功能鉴定
•   1.5 EPCs-CM的制备
•   1.6 EPCs-CM对MSCs向内皮细胞分化的影响
•     1.6.1 qRT-PCR检测各组细胞在不同时间点CD31、v WF、e NOS mRNA表达
•     1.6.2 MSCs体外成管实验
•     1.6.3 免疫荧光实验检测各组MSCs CD31、CD34表达
•     1.6.4 NO含量测定
•   1.7 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 MSCs和EPCs的形态学
•     2.1.1 MSCs和EPCs的表面标记物表达
•     2.1.2 EPCs的功能鉴定
•   2.2 不同时间点各组MSCs CD31、vWF、e NOS的mRNA表达
•   2.3 EPCs对MSCs体外成管能力的影响
•   2.4 EPCs-CM促进MSCs CD31、CD34表达
•   2.5 EPCs-CM可促进MSCs分泌NO
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 韩欢欢,郭黎姣,杨雄峰,周青,姜慧娇,王小艺,陈雪玲,吴向未

关键词: 内皮祖细胞,间充质干细胞,条件培养基,分化,内皮细胞

来源: 石河子大学学报(自然科学版) 2019年02期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学,基础医学

单位: 石河子大学医学院第一附属医院,石河子大学医学院

基金: 国家自然科学基金项目(81760570),新疆兵团中青年科技创新领军人才计划项目(2018CB017)

分类号: R329.2

DOI: 10.13880/j.cnki.65-1174/n.2019.02.014

页码: 229-236

总页数: 8

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