一株人源抗狂犬病病毒单克隆抗体的表位及中和活性的研究

论文摘要

目的通过ELISA相加试验和狂犬病毒（Rabies virus,RV）逃逸突变试验对一株人源抗狂犬病病毒单克隆抗体（human anti-rabies virus monoclonal antibody,Ab1）进行抗原表位分析。方法将已知表位的对照抗体（CR57和CR4098）和Ab1进行ELISA相加试验;以及对RV逃逸株氨基酸突变位点分析进一步验证Ab1针对的抗原表位,用小鼠中和试验（mouse neutralization test,MNT）分析Ab1的体内抗狂犬病病毒中和活性。结果 Ab1和CR57可同时与RV结合;与CR4098存在竞争,Ab1的逃逸株在氨基酸位点333、336发生突变,MNT检测体内中和活性为550.32 IU/mg,MNT和快速荧光灶抑制试验（rapid fluorescent focus inhibition test,RFFIT）结果基本一致。结论该抗体针对III号抗原表位且具有较高的抗狂犬病病毒中和活性。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 毒种、细胞
•   1.2 载体
•   1.3 参照抗体及引物
•   1.4 主要试剂及仪器
•   1.5 ELISA相加试验
•     1.5.1 测定参照抗体和人源抗狂犬病病毒单克隆抗体的饱和曲线
•     1.5.2 相加指数（AI）的测定
•   1.6 狂犬病毒逃逸突变试验
•     1.6.1 狂犬病毒逃逸株的获得
•     1.6.2 狂犬病毒逃逸株RNA的提取、cDNA的合成和PCR扩增狂犬病毒糖蛋白
•     1.6.3 狂犬病毒逃逸株氨基酸突变位点分析
•   1.7 人源抗狂犬病病毒单克隆抗体（Ab1）体内中和活性验证
•     1.7.1 病毒悬液毒力的预测
•     1.7.2 中和活性测定
•   1.8 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 参照抗体（CR57和CR4098）与抗体（Ab1）的饱和曲线的测定
•   2.2 抗体结合位点分析
•   2.3 狂犬病毒糖蛋白的扩增及鉴定
•   2.4 Ab1逃逸株氨基酸突变位点分析
•   2.5 体内中和活性验证
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 房世娣,陈继军,赵晓瑞,安晨,汪艳艳,李守丽,毛晓燕

关键词: 狂犬病病毒,人源化单克隆抗体,抗原表位,小鼠中和试验

来源: 微生物学免疫学进展 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 基础医学

单位: 兰州生物制品研究所有限责任公司第四研究室甘肃省疫苗工程技术研究中心

基金: 兰州市科技重大专项(2017-02-1)

分类号: R392

DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2019.06.003

页码: 15-19

总页数: 5

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