家蚕BmRpt4基因在翅膀发育中的功能研究

论文摘要

【目的】研究分析编码蛋白酶体调控复合物亚基基因BmRpt4（Regulatoryparticletriple-A ATPase4,BGIBMGA010794）在家蚕翅膀发育过程中的功能。【方法】利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术,将BmRpt4的gRNAs和Cas9mRNA直接注射到家蚕胚胎中,观察G0代家蚕个体雏翅率,并分析雏翅个体中BmRpt4基因突变情况。【结果】经统计,对照组G0代家蚕个体均表现为正常翅,而实验组注射BmRpt4的gRNAs和Cas9 mRNA后,G0代约66.7%家蚕个体表现出小翅表型。在分子水平上对小翅表型个体进行检测,发现BmRpt4基因在两个gRNA及其之间位置均有不同长度片段的缺失或者插入,说明在这些突变个体中BmRpt4基因被不同程度的敲除,从而其功能缺失,导致出现小翅表型。【结论】该研究结果表明编码蛋白酶体调控亚基的BmRpt4基因在家蚕翅膀发育中具有重要作用,为蛋白酶体在生物组织器官发育中调控作用研究提供重要实验依据。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 BmRpt4 sgRNA位点选择及其序列检测
•   1.3 BmRpt4 sgRNA与Cas9 mRNA合成与纯化
•   1.4 家蚕胚胎显微注射
•   1.5 表型观察与突变分析
• 2 结果与分析
•   2.1 BmRpt4转基因家蚕获得
•   2.2 雏翅个体BmRpt4基因突变检测
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 孙霞,张静,印锦,秦笙,张国政,李木旺

关键词: 雏翅,蛋白酶体,技术,基因组编辑,家蚕

来源: 应用昆虫学报 2019年05期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 江苏科技大学生物技术学院,中国农业科学院蚕业研究所

基金: 国家自然科学基金面上项目(31572320),现代农业产业技术体系建设专项(CARS-18)

分类号: Q953

页码: 1048-1053

总页数: 6

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