基于Kd的谷胱甘肽可逆探针的设计及其合成

论文摘要

细胞内的谷胱甘肽浓度为0-1OmM,而细胞能够容忍的最大探针浓度为10μM。因此,要实现对细胞内谷胱甘肽定量检测的目标就需要探针与谷胱甘肽的反应必须是可逆的。迈克尔加成反应一种快速平衡的反应,当迈克尔加成反应的给体为巯基时尤为如此。基于活泼双键与巯基的迈克尔加成反应来设计谷胱甘肽可逆探针的关键是构筑反应活性适度的活泼双键,而活泼双键的构筑要以Kd值为指标,才能满足实际检测时对探针的要求,能够应用于实际体内检测谷胱甘肽的探针Kd值应3 mM。目前,能够定量检测谷胱甘肽的探针仅有三例,但这三种探针的Kd值并不是很接近于3 mM,因此探针的结构还有必要进一步优化而使Kd≈3mM。本文以Kd值微调为目标,采用远距离调控迈克尔逆反应中间体稳定性的策略,设计了目标分子。完成了四种探针分子的合成与表征并探讨了远距离调控基团与Kd值的关系。结果显示基团为吗啉的探针QG-d各项性能最优。即响应时间短、最低检出限低（4.4 μM）且Kd=3.26 mM。探针QG-d的Kd值是目前报道文献中最接近最佳值的一个。此外,吗啉基团还有一个功能是溶酶体的定位性,探针QG-d可用于对溶酶体内谷胱甘肽定量检测,为进一步了解溶酶体内的生理过程提供良好的基础。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
•   1.1 谷胱甘肽的介绍
•     1.1.1 细胞内谷胱甘肽的产生及代谢
•     1.1.2 谷胱甘肽与氧化应激
•   1.2 谷胱甘肽荧光探针研究进展
•   1.3 有关Kd值
•   1.4 本文主要研究内容
• 第二章 荧光探针的设计与合成
•   2.1 设计思想
•   2.2 合成路线
•   2.3 主要试剂及测量仪器
•     2.3.1 主要试剂
•     2.3.2 主要测量仪器
•   2.4 化合物的合成及表征
•     2.4.1 7-二乙氨基香豆素的合成
•     2.4.2 醛基香豆素的合成
•     2.4.3 化合物QG-a的合成与表征
•     2.4.4 化合物QG-b的合成与表征
•     2.4.5 化合物QG-c的合成与表征
•     2.4.6 化合物QG-d的合成与表征
•     2.4.7 化合物QG-e的合成与表征
•     2.4.8 化合物QG-f的合成与表征
•   2.5 结果与讨论
•   2.6 本章小节
• 第三章 探针与谷胱甘肽的响应
•   3.1 测试溶液的配制和使用
•   3.2 探针对谷胱甘肽的响应
•     3.2.1 水溶性实验
•     3.2.2 滴定实验
•     3.2.3 探针Kd的计算
•     3.2.4 响应时间
•     3.2.5 稀释实验
•     3.2.6 选择性实验
•     3.2.7 稳定性实验
•   3.3 结果与讨论
•   3.4 本章小节
• 第四章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 附录（谱图）

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 刘冰倩

导师: 吴学

关键词: 负碳离子,谷胱甘肽,可逆型,荧光探针

来源: 延边大学

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学,化学

单位: 延边大学

分类号: O657.3;Q516

总页数: 70

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