导读:本文包含了罗汉果花叶病毒论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:罗汉果,花叶,病毒,葫芦,小西,寄主,血清。
罗汉果花叶病毒论文文献综述
谭秀梅[1]（2015）在《利用RNAi技术培育抗花叶病毒转基因罗汉果的研究》一文中研究指出罗汉果花叶病毒严重影响罗汉果的产量,通过转基因获得抗病毒品种是防治罗汉果病毒病最有效的途径,转基因技术和RNAi技术的日渐成熟为培育抗花叶病毒转基因罗汉果奠定了基础。小西葫芦黄化花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)是罗汉果花叶病的主要病原病毒,分布较广、危害较重。为了针对生产实践中普遍发生的花叶病毒培育具有生产应用价值的抗病毒罗汉果品种,本研究以规模种植罗汉果基地的花叶病发病植株为基因克隆的实验材料。为了提高RNA干扰罗汉果花叶病毒复制的效率,把感染罗汉果的花叶病毒多个功能基因片段串联起来作为RNAi目标片段,转化罗汉果,从而建立一个稳定高效的遗传转化体系,利用基因工程策略获得对花叶病毒具有广谱抗性的抗花叶病毒罗汉果植株。本研究优化了罗汉果组织培养扩繁的条件,最适外植体为茎尖,芽诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L,诱导率为97.5%;继代培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+GA3 0.1 mg/L,增殖率为9;通过叶片再生实验结果表明:叶片诱导再生苗的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+TDZ0.05 mg/L,出芽系数达10.68,为抗病毒罗汉果转基因实验提供充足的材料。本文研究了罗汉果组培苗的茎段、叶柄及叶片不同类型的外植体的再生能力,结果表明,叶片的再生率明显高于叶柄和茎段,是罗汉果遗传转化最佳外植体的选择。同时对罗汉果遗传转化的条件进行优化,研究结果表明:预培养1 d、菌液浓度的OD值为0.2、外植体与农杆菌侵染15 min、共培养4 d、抗生素羧苄霉素的浓度为200 mg/L、筛选剂G418浓度以40 mg/L作为筛选压力的转化率最高。本研究将ZYMV的Hc-pro,NIa,NIb,CP基因和3’UTR区多个基因片段串联构成RNAi的目标序列,获得的目的片段克隆到可以形成RNAi茎环结构的中间载体pXQ中,形成RNAi结构片段。通过PCR鉴定阳性克隆,最终获得含有正确目的片段的植物表达载体pLou-Anti5。通过农杆菌介导的方法,把目的基因导入到罗汉果中,获得了89株转基因罗汉果植株,经侵染实验证明,转基因罗汉果具有一定的抗性。从而获得不仅具有广谱抗花叶病毒特性,而且具有抗除草剂特性的转基因罗汉果阳性植株,具有很大的生产应用前景。(本文来源于《吉首大学》期刊2015-06-04）
朱英芝[2]（2012）在《小西葫芦黄化花叶病毒罗汉果分离株及转基因罗汉果的研究》一文中研究指出小西葫芦黄化花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus, ZYMV)为马铃薯Y病毒科Y病毒属的成员之一,是葫芦科作物重要的病原病毒之一。ZYMV单独或与其他病毒一起侵染罗汉果,引起罗汉果(Siraitia grosvenorii)病毒病。为了明确罗汉果ZYMV (ZYMV-LHG)病毒病的流行规律和侵染源,本研究开展了罗汉果全生育期田间病毒病发生情况监测,并对罗汉果田块内和周边植物进行广泛的病毒血清学检测；对来自不同罗汉果种植区的侵染罗汉果的ZYMV的外壳蛋白(CP)基因序列进行分析,以明确ZYMV-LHG在分子水平上的分化程度；同时,对罗汉果抗病毒转基因方法进行了初步探索。本研究于2006年5月、7月和9月分别对广西桂林的永福和广西柳州的融安两地的7个罗汉果果园进行了罗汉果全生育期田间病毒病发病率调查。在生长前期,宿根苗已全部发病,但组培苗均未见发病；生长中期,有宿根苗的果园的病毒病发病率已经达到100%,田间长势相对较弱,与其邻近的果园发病率也远远高于周围无宿根苗的果园。生长后期,所有罗汉果果园都能看到发病罗汉果植株,发病率从0.8%到100%不等。用提纯的ZYMV-LHG病毒粒子免疫新西兰大白兔,获得效价1：16000的抗血清。用ZYMV-LHG抗血清对罗汉果果园及周围植物进行带毒率检测,在46科96属的114种植物中,发现分别属于葫芦科、苋科、豆科、菊科、禾本科、蓼科、锦葵科、鸭跖草科和茜草科共9个科的部分植物呈阳性反应,植物阳性检出率与田间罗汉果的病情发展趋势一致,表明ZYMV-LHG有较广泛的自然寄主范围。对罗汉果种子传播ZYMV-LHG的效率进行了测定。结果表明,ZYMV不能够通过罗汉果种子进行传播或者其传播的概率很低。为了解ZYMV-LHG的进化规律,对从桂林的永福、龙胜和兴安叁个县的15个果园采集的表现典型花叶病症状罗汉果的ZYMV-LHG的不同分离物进行了基因序列分析。以病叶总RNA为模板,通过RT-PCR的方法获得17条来源于独立样品ZYMV-LHG的外壳蛋白(CP)基因序列,它们的核苷酸序列同源性为92.1%-100%,氨基酸序列同源性为96.4%-100%。利用Dnasp进行分析,发现ZYMV-LHG CP基因的5’端具有较高的多样性,Tajima's D统计值为0.44664,表明ZYMV-LHG核苷酸序列的进化为平衡选择,没有群体扩张的倾向。此外,这17条序列的蚜传保守DAG基序均未发生改变,暗示它们均可以通过蚜虫传播。线性抗原表位预测显示,在ZYMV-LHG的CP的N端,线性抗原表位发生较多变化,17个分离物可以分为6种不同的抗原类型,其中Ⅰ型最多,包括了6、7、8、9、12、N10-1和N10-4共7个分离物。用基于距离的邻近法(neighbor joining, NJ)构建系统进化树和用贝叶斯-马尔科夫链-蒙特卡洛方法(Bayesia MCMC)对ZYMV-LHG的最近共同祖先出现时间进行了估计。世界各地已报道的ZYMV的各种株系的最近共同祖先的出现时间为736年(95%HPD,256-1357年),核酸替代率为1.7×104替代／每位点／每年(95%HPD,0.723-3.11×10-4替代／每位点／每年)。MCC树分析表明,,而本研究获得的ZYMV-LHG分离物主要归于两个基因簇群,并且没有明显的杂和其他来源的病毒,ZYMV-LHG在进化上处于比较保守的位置。本研究比较了罗汉果子叶、罗汉果实生苗叶盘和罗汉果组培苗叶盘叁种外植体的再生频率,发现罗汉果子叶具有再生能力强,再生效率高的特点,最适合作为罗汉果转化体系的外植体,以罗汉果子叶为外植体,60mg/L的卡那霉素(km)浓度为筛选压力。本研究所构建的罗汉果遗传转化系统,为今后罗汉果基因工程抗病毒育种奠定了初步基础。选择ZYMV的NIb和CP最保守的区域并分析它们的二级结构后,确定并获得了转基因用RNAi所需的目的片段。以pBI121为载体,构建分别携带ZYMV的NIb和CP的RNAi片段的双元表达载体pBI121ZYMVCPRNAi和pBI121ZYMVNIbRNAi。通过农杆菌介导的方法,把ZYMV的CP、NIb基因导入到罗汉果中,共获得了258棵转基因罗汉果植株,其中转pBI121ZYMVCPRNAi的转基因苗有139棵,转pBI121ZYMVNIbRNAi的转基因苗有119棵。(本文来源于《广西大学》期刊2012-06-01）
朱英芝,陈保善,蒙姣荣[3]（2011）在《罗汉果种子传播小西葫芦黄化花叶病毒的检测》一文中研究指出为了解小西葫芦黄化花叶病毒(Zucchini yellow mosaicvirus,ZYMV)是否能通过罗汉果种子传播。本研究通过取ZYMV阳性的罹病罗汉果植株种子700粒,400粒直接播种于防虫网室中,300粒经表面消毒处理后播种于MS培养基上。最终获得213棵罗汉果实生苗。对所获得实生苗进行生物学鉴定及ZYMV特异性RT-PCR检测,均未检测到ZYMV阳性植株。结果表明ZYMV不能经罗汉果种子传播,或其传播率很低。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2011年06期）
朱英芝,韩英,蒙姣荣,廖咏梅,邹承武[4]（2011）在《小西葫芦黄化花叶病毒罗汉果分离株抗血清的制备和应用》一文中研究指出将分离自罗汉果(Siraitia grosvenorii)的小西葫芦黄化花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV-LHG)在西葫芦上繁殖,利用差速离心法与PEG沉淀法相结合提纯病毒粒子,用于免疫新西兰大白兔,成功制备出效价为1∶10 240的抗血清。分别用健康西葫芦叶片总蛋白及健康西葫芦叶片汁液吸附处理抗血清,比较2种处理后抗血清背景反应,以健康西葫芦汁液吸附法较佳。用间接ELISA对罗汉果果园及附近共46个科114种植物进行检测,其中9个科25种植物有阳性反应,以葫芦科、苋科、豆科、锦葵科等阳性率较高。田间病毒病发病率调查表明,宿根苗发病率比组培苗高,发病时间更早,是田间罗汉果病毒病的主要初侵染来源之一。(本文来源于《热带作物学报》期刊2011年09期）
朱英芝,韦茂春,邹承武,蒙姣荣,陈保善[5]（2011）在《小西葫芦黄化花叶病毒罗汉果分离物进化分析》一文中研究指出小西葫芦黄化花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)为马铃薯Y病毒科成员,是葫芦科作物的重要病原之一。之前的研究发现,ZYMV是罗汉果最主要的病原病毒。本研究于2009年在广西的永福、龙胜、兴安共3个县采集罗汉果花叶病标本,每个县采集5个样本。用RT-PCR扩增ZYMV CP片段并测序,从15个样本中共获得17条ZYMV CP基因核苷酸及氨基酸序列。序列比对显示,这些病毒分离物的核(本文来源于《中国植物病理学会2011年学术年会论文集》期刊2011-08-18）
林纬,杨义,叶云峰,唐金凤,黎起秦[6]（2010）在《板蓝根粗提物对罗汉果花叶病毒病防治效果试验》一文中研究指出为探索防治罗汉果花叶病毒病的新途径,进行了板蓝根粗提物对罗汉果花叶病毒病的室内和大田防治效果试验。结果显示,板蓝根粗提物100倍液对罗汉果花叶病毒病的防治效果最好,其防治效果高于市售化学药剂可卡宁,且大田防治效果比室内高;随着防治次数的增加,其室内防治效果有所提高,而大田防治效果有所降低,表明板蓝根粗提物对罗汉果花叶病毒病的预防效果大于治疗效果;同时,经板蓝根粗提物处理后,罗汉果的产量和大果数均有显着提高。(本文来源于《广西农业科学》期刊2010年01期）
林纬,蒙姣荣,朱彬,黄永禄,袁高庆[7]（2009）在《药用植物粗提物对罗汉果花叶病毒病的防治作用研究》一文中研究指出[目的]寻找有效防治罗汉果花叶病毒病的方法。[方法]研究测定4种药用植物粗提物对罗汉果病毒病的防治作用。[结果]结果表明,板蓝根、贯众、大黄和黄芩的粗提取物对罗汉果病毒病的防治效果分别为73.10%、46.20%、46.20%和57.60%;板蓝根粗提取物用水稀释5、10、50、100和200倍液对罗汉果病毒病的防治效果分别为77.48%、59.15%、59.15%、52.14%和43.69%。[结论]该研究为探讨防治罗汉果病毒病的新途径提供理论依据。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2009年04期）
任艳玲[8]（2008）在《小西葫芦黄化花叶病毒罗汉果分离株的抗血清制备及其田间寄主检测》一文中研究指出罗汉果(Siraitia grosvenori)为葫芦科多年生藤本植物,是广西着名特产,具有重要的医疗和保健价值。长期以来,罗汉果一直受着病毒病的危害。本研究对小西葫芦黄化花叶病毒罗汉果分离株(ZYMV-LHG)进行了分离、繁殖、提纯、体外性质研究、抗血清的制备,并用抗血清检测田间植物的带毒情况。研究结果显示,用西葫芦可以从罗汉果病叶中分离到ZYMV-LHG,ZYMV-LHG在西葫芦上表现明脉、黄化、蕨叶症状;ZYMV-LHG的钝化温度为55℃,稀释限点为10~(-3),体外保毒期为6 d;自繁殖ZYMV-LHG的西葫芦病叶上提纯病毒;利用提纯的病毒免疫BALB/C小鼠制备抗血清,所获抗血清的效价为1∶16000;利用该抗血清检测罗汉果果园附近的作物及杂草,发现11科的14种植物表现阳性,其中包括葫芦科(Cucurbitaceae)的丝瓜(Luffa cylindrica)、南瓜(Cucurbita moschata)、葫芦(Lagenaria siceraria)、茄科(Solanaceae)的辣椒(Capsicum annuum)、豆科(Leguminosae)的四季豆(Amphicarpaea edgeworthii)和杂草中堇菜科(Violaceae)的堇菜(Viola verecunda)、马鞭草科(Verbenaceae)的大青(Clerodendrum cyrtopAyllum)、鸭跖草科(Commelinaceae)的鸭跖草(Commelina communis)、菊科(Compositae)的野茼蒿(Crossocephalumcrepidioides)、蓼科(Polygonaceae)的齿果酸模(Rumex dentatus)、苋科(Amaranthaceae)的莲子草(Alternanther sessilis)、车前草科(Plantaginaceae)的车前(Plantago asiatica)和酢浆草科(Oxalidaceae)的酢浆草(Oxalis corniculata)。温室测定化学药剂对罗汉果病毒病的防治效果,先喷施化学药剂后摩擦接种病毒的处理中,以1.45%叁氮唑核苷·烷醇·锌防治效果最好,其防效为58.99%,而5%二(辛基胺乙基)甘氨酸盐的防效最差,其防效为27.19%。在先摩擦接种病毒再喷施化学药剂的处理中,1.45%叁氮唑核苷·烷醇·锌、5%盐酸吗啉胍和20%盐酸吗啉胍·乙铜的防效较好,其防效分别为52.82%、50.23%、47.17%,而5%二(辛基胺乙基)甘氨酸盐的防效最差,其防效为22.07%。但整体来说,化学药剂对罗汉果病毒病防治效果不是太理想。(本文来源于《广西大学》期刊2008-06-01）
秦碧霞,郑红英,蔡健和,陈炯,刘志明[9]（2005）在《侵染广西罗汉果的小西葫芦黄花叶病毒的鉴定及抗血清制备》一文中研究指出在广西临桂罗汉果花叶畸形病株上获得了一个线状病毒分离物LGL-1,寄主范围、蚜传能力测定、病毒粒子形态和细胞病理特征研究表明,它是马铃薯Y病毒科成员。采用马铃薯Y病毒科特异性简并引物做PCR扩增,并测定了分离物LGL-1的基因组3′-末端序列,序列分析表明它是小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)。系统进化树分析揭示,世界范围内的ZYMV分离物主要可分为3大群体,分离物LGL-1为中国特有群体Group III成员。原核表达制备了分离物LGL-1的外壳蛋白抗血清,明确了ZYMV是引起广西罗汉果病害的主要病毒,并且比较了原核表达法和提纯病毒法制备的抗血清,在病样的间接ELISA法检测中结果的差异。(本文来源于《病毒学报》期刊2005年06期）
甘晓静,廖咏梅,黎起秦,陈保善[10]（2005）在《侵染罗汉果的小西葫芦黄化花叶病毒基因组全序列的测定及其结构分析》一文中研究指出罗汉果(Siraitia grosvenorii(Swingle)C.Jeffrey)是我国特有的葫芦科药用植物,长期以来,一直受着花叶病的危害。对罗汉果花叶病病原病毒进行鉴定,发现是由两个马铃薯Y组成员病毒小西葫芦黄化花叶病毒(ZYMV)及番木瓜环斑病(本文来源于《2005年中南、西南植物病理学会和中国菌物学会联合学术年会论文集》期刊2005-06-30）
罗汉果花叶病毒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
小西葫芦黄化花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus, ZYMV)为马铃薯Y病毒科Y病毒属的成员之一,是葫芦科作物重要的病原病毒之一。ZYMV单独或与其他病毒一起侵染罗汉果,引起罗汉果(Siraitia grosvenorii)病毒病。为了明确罗汉果ZYMV (ZYMV-LHG)病毒病的流行规律和侵染源,本研究开展了罗汉果全生育期田间病毒病发生情况监测,并对罗汉果田块内和周边植物进行广泛的病毒血清学检测；对来自不同罗汉果种植区的侵染罗汉果的ZYMV的外壳蛋白(CP)基因序列进行分析,以明确ZYMV-LHG在分子水平上的分化程度；同时,对罗汉果抗病毒转基因方法进行了初步探索。本研究于2006年5月、7月和9月分别对广西桂林的永福和广西柳州的融安两地的7个罗汉果果园进行了罗汉果全生育期田间病毒病发病率调查。在生长前期,宿根苗已全部发病,但组培苗均未见发病；生长中期,有宿根苗的果园的病毒病发病率已经达到100%,田间长势相对较弱,与其邻近的果园发病率也远远高于周围无宿根苗的果园。生长后期,所有罗汉果果园都能看到发病罗汉果植株,发病率从0.8%到100%不等。用提纯的ZYMV-LHG病毒粒子免疫新西兰大白兔,获得效价1：16000的抗血清。用ZYMV-LHG抗血清对罗汉果果园及周围植物进行带毒率检测,在46科96属的114种植物中,发现分别属于葫芦科、苋科、豆科、菊科、禾本科、蓼科、锦葵科、鸭跖草科和茜草科共9个科的部分植物呈阳性反应,植物阳性检出率与田间罗汉果的病情发展趋势一致,表明ZYMV-LHG有较广泛的自然寄主范围。对罗汉果种子传播ZYMV-LHG的效率进行了测定。结果表明,ZYMV不能够通过罗汉果种子进行传播或者其传播的概率很低。为了解ZYMV-LHG的进化规律,对从桂林的永福、龙胜和兴安叁个县的15个果园采集的表现典型花叶病症状罗汉果的ZYMV-LHG的不同分离物进行了基因序列分析。以病叶总RNA为模板,通过RT-PCR的方法获得17条来源于独立样品ZYMV-LHG的外壳蛋白(CP)基因序列,它们的核苷酸序列同源性为92.1%-100%,氨基酸序列同源性为96.4%-100%。利用Dnasp进行分析,发现ZYMV-LHG CP基因的5’端具有较高的多样性,Tajima's D统计值为0.44664,表明ZYMV-LHG核苷酸序列的进化为平衡选择,没有群体扩张的倾向。此外,这17条序列的蚜传保守DAG基序均未发生改变,暗示它们均可以通过蚜虫传播。线性抗原表位预测显示,在ZYMV-LHG的CP的N端,线性抗原表位发生较多变化,17个分离物可以分为6种不同的抗原类型,其中Ⅰ型最多,包括了6、7、8、9、12、N10-1和N10-4共7个分离物。用基于距离的邻近法(neighbor joining, NJ)构建系统进化树和用贝叶斯-马尔科夫链-蒙特卡洛方法(Bayesia MCMC)对ZYMV-LHG的最近共同祖先出现时间进行了估计。世界各地已报道的ZYMV的各种株系的最近共同祖先的出现时间为736年(95%HPD,256-1357年),核酸替代率为1.7×104替代／每位点／每年(95%HPD,0.723-3.11×10-4替代／每位点／每年)。MCC树分析表明,,而本研究获得的ZYMV-LHG分离物主要归于两个基因簇群,并且没有明显的杂和其他来源的病毒,ZYMV-LHG在进化上处于比较保守的位置。本研究比较了罗汉果子叶、罗汉果实生苗叶盘和罗汉果组培苗叶盘叁种外植体的再生频率,发现罗汉果子叶具有再生能力强,再生效率高的特点,最适合作为罗汉果转化体系的外植体,以罗汉果子叶为外植体,60mg/L的卡那霉素(km)浓度为筛选压力。本研究所构建的罗汉果遗传转化系统,为今后罗汉果基因工程抗病毒育种奠定了初步基础。选择ZYMV的NIb和CP最保守的区域并分析它们的二级结构后,确定并获得了转基因用RNAi所需的目的片段。以pBI121为载体,构建分别携带ZYMV的NIb和CP的RNAi片段的双元表达载体pBI121ZYMVCPRNAi和pBI121ZYMVNIbRNAi。通过农杆菌介导的方法,把ZYMV的CP、NIb基因导入到罗汉果中,共获得了258棵转基因罗汉果植株,其中转pBI121ZYMVCPRNAi的转基因苗有139棵,转pBI121ZYMVNIbRNAi的转基因苗有119棵。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
罗汉果花叶病毒论文参考文献
[1].谭秀梅.利用RNAi技术培育抗花叶病毒转基因罗汉果的研究[D].吉首大学.2015
[2].朱英芝.小西葫芦黄化花叶病毒罗汉果分离株及转基因罗汉果的研究[D].广西大学.2012
[3].朱英芝,陈保善,蒙姣荣.罗汉果种子传播小西葫芦黄化花叶病毒的检测[J].基因组学与应用生物学.2011
[4].朱英芝,韩英,蒙姣荣,廖咏梅,邹承武.小西葫芦黄化花叶病毒罗汉果分离株抗血清的制备和应用[J].热带作物学报.2011
[5].朱英芝,韦茂春,邹承武,蒙姣荣,陈保善.小西葫芦黄化花叶病毒罗汉果分离物进化分析[C].中国植物病理学会2011年学术年会论文集.2011
[6].林纬,杨义,叶云峰,唐金凤,黎起秦.板蓝根粗提物对罗汉果花叶病毒病防治效果试验[J].广西农业科学.2010
[7].林纬,蒙姣荣,朱彬,黄永禄,袁高庆.药用植物粗提物对罗汉果花叶病毒病的防治作用研究[J].安徽农业科学.2009
[8].任艳玲.小西葫芦黄化花叶病毒罗汉果分离株的抗血清制备及其田间寄主检测[D].广西大学.2008
[9].秦碧霞,郑红英,蔡健和,陈炯,刘志明.侵染广西罗汉果的小西葫芦黄花叶病毒的鉴定及抗血清制备[J].病毒学报.2005
[10].甘晓静,廖咏梅,黎起秦,陈保善.侵染罗汉果的小西葫芦黄化花叶病毒基因组全序列的测定及其结构分析[C].2005年中南、西南植物病理学会和中国菌物学会联合学术年会论文集.2005
论文知识图
