海南敬钊缨毛蛛论文_李江

导读:本文包含了海南敬钊缨毛蛛论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:海南,毒素,复性,生物学,活性,蜘蛛,质谱。

海南敬钊缨毛蛛论文文献综述

李江^[1]（2006）在《1.穴居狼蛛粗毒的生物学活性研究 2.海南捕鸟蛛毒素-Ⅶ和敬钊缨毛蛛毒素-Ⅳ的电生理活性研究》一文中研究指出1．穴居狼蛛粗毒的生物学活性研究穴居狼蛛是一种主要分布于我国新疆及东欧等地的大型蜘蛛，多穴居地下。自新疆采回的穴居狼蛛由本实验室室内饲养，用硅胶管刺激采毒的方法进行粗毒的采集，并进一步对粗毒进行生物学活性研究。粗毒的蛋白质含量为65.9％，分别得到了粗毒的MALDI TOF质谱图和SDS凝胶电泳图谱，显示了粗毒中蛋白质和多肽的分子量分布范围。通过对酶活力的测定，发现穴居狼蛛粗毒中含有透明质酸酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、乙酰胆碱酯酶、脱氧核糖核酸酶，其中透明质酸酶和脱氧核糖核酸酶活力较高。通过小鼠注射实验，膈神经膈肌实验和大鼠输精管实验发现穴居狼蛛粗毒的毒性不强，可能不含或只含极少作用于哺乳动物的神经毒素。1mg／ml粗毒可以使离体蟾蜍心脏标本收缩频率和幅度都加强，幅度增加约为平衡时的2倍。粗毒具有溶血活性，EC_(50)为1.4983mg／ml。对腊状芽孢杆菌，谷氨酸棒杆菌，枯草芽孢杆菌，藤黄八迭球菌，白色葡萄球菌，大肠杆菌，酿酒酵母和白色念珠菌进行抑菌圈实验，发现粗毒对多数革兰氏阳性菌有很强的抑菌作用。利用阳离子交换色谱结合反相高效液相色谱的方法对狼蛛粗毒进行了初步的分离纯化研究。2．海南捕鸟蛛毒素-Ⅶ和敬钊缨毛蛛毒素-Ⅳ的电生理活性研究本室前期已报导海南捕鸟蛛毒素-Ⅶ和敬钊缨毛蛛毒素-Ⅳ是从海南捕鸟蛛粗毒和敬钊缨毛蛛粗毒中分离纯化的两种多肽毒素，分别含33和32个氨基酸残基且同源性分析结果显示它们都包含叁对二硫键，连接方式可能为Ⅰ-Ⅳ，Ⅱ-Ⅴ，Ⅲ-Ⅵ。但它们的功能仍然不清楚。在本研究中，我们确定了它们对哺乳动物心肌细胞钠通道和棉铃虫神经细胞上的钠通道和钾通道的作用。在膜片钳全细胞记录模式下，去极化刺激可在急性分离的棉铃虫神经细胞上诱导出TTX敏感型钠电流和瞬时外向钾电流，大鼠心肌细胞诱导出TTX不敏感型钠电流。海南捕鸟蛛毒素-Ⅶ在1nM～1μM浓度范围内可对棉铃虫神经细胞TTX敏感型钠电流和瞬时外向钾电流产生抑制作用。1μM浓度的海南捕鸟蛛毒素-Ⅶ不能延缓钠通道失活，显示其对钠通道的作用方式可能与海南捕鸟蛛毒素-Ⅲ和海南捕鸟蛛毒素-Ⅳ相似。而敬钊缨毛蛛毒素-Ⅳ与海南捕鸟蛛毒素-Ⅶ存在明显不同，具有抑制心肌细胞钠通道快速失活的作用，IC_(50)为0.41μM。上述实验结果表明这两种毒素极有可能是以不同的作用机制来影响钠通道的。(本文来源于《湖南师范大学》期刊2006-05-01）

陈再冉^[2]（2003）在《虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ突变体K27A的化学合成与性质以及两种海南敬钊缨毛蛛毒素的结构与功能研究》一文中研究指出摘要1：用芴甲氧羰基(Fmoc)固相多肽合成的方法在Pioneer固相多肽合成仪上合成了用丙氨酸代替虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ的第27位的赖氨酸的突变体K27A-HWTX-Ⅳ，通过反相HPLC对不同条件下突变体的氧化复性结果进行监测，摸索出其最佳氧化复性条件为：0.1 mol／L Tris-HCl，pH 8.0，GSH 1 mmol／L，GSSG 0.1 mmol／L的复性缓冲液，样品浓度为0.1 mg／mL。复性产物经HPLC纯化并用基质辅助激光解吸飞行时间质谱法进行鉴定，相对分子质量为4050.63 Da。小鼠离体膈神经-膈肌标本测活实验表明：复性后的突变体生物学活性比天然HWTX-Ⅳ降低86％，表明第27位的赖氨酸为虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ活性相关的残基。摘要2：从我国海南敬钊缨毛蛛(Chilobrachys jingzhao)粗毒中，结合阳离子交换和反相高效液相色谱分离得到两种多肽神经毒素，分别命名为海南敬钊缨毛蛛毒素-Ⅴ(jingzhaotoxin-Ⅴ，JZTX-Ⅴ)和海南敬钊缨毛蛛毒素-Ⅳ(jingzhaotoxin-Ⅳ，JZTX-Ⅳ)。经MALDI-TOF质谱分析，相对分子质量分别为3951.69 Da和3601.47 Da。利用Edman降解气相蛋白质测序仪测得海南敬钊缨毛蛛毒素-Ⅴ的一级结构NH_2-ECTKLLGGCTKDSECCPHLGCRKKWPYHCGWDGTF-CONH_2，六个Cys形成叁对二硫键。10 μg／mL的该毒素完全阻断小鼠膈神经-膈肌神经肌肉接头传递的时间为30±0.6min。小白鼠脑室注射能产生神经性兴奋，高剂量可使小鼠致死。同源性搜索表明该毒素与蜘蛛Grammostola spatulata中ω-Grammotoxin SIA和HaTx毒素和蜘蛛Scodra griseipes中的SGTx1毒素有很高的同源性。利用Edman降解气相蛋白质测序仪测得海南敬钊缨毛蛛毒素-Ⅳ一级结构为NH_2-GCGGLMAGCDGKSTFCCSGYNCSPTWKWCVYARP-CONH_2，六个Cys形成叁对二硫键。同源性搜索表明该毒素与蜘蛛Chinese bird spider Ornithoctonus huwena中的SHL-Ⅰ、Chinese bird spider Ornithoctonus hainana中的HNTX—Ⅲ和Mexican red knee tarantula(Brachypelma smithii)中的TXP 5有较高的同源性。生物(本文来源于《湖南师范大学》期刊2003-04-01）

杨粤军^[3]（2003）在《海南敬钊缨毛蛛肽类毒素与虎纹捕鸟蛛非肽类毒素的结构与功能研究》一文中研究指出蜘蛛毒素在药理学、神经生物学和医学领域已展现出广阔的应用前景，对蜘蛛毒素的研究具有重要的意义。蜘蛛毒素中神经毒素是最重要的。海南敬钊缨毛蛛(Chilobrachys jingzhao)毒素是最近在海南发现的蜘蛛新种，该蜘蛛粗毒中含有多种活性多肽和蛋白质成分。通过离子交换和反相HPLC分离纯化出两种多肽类毒素分别命名为海南敬钊缨毛蛛毒素-Ⅱ(Jingzhao-Ⅱ，JZTX-Ⅱ)和海南敬钊缨毛蛛毒素-Ⅲ(Jingzhao-Ⅲ，JZTX-Ⅲ)。JZTX-Ⅱ和JZTX-Ⅲ的氨基酸序列全部测出，分别由34和36个氨基酸组成，含有6个半胱氨酸，形成3对二硫键。MALDI-TOF质谱测定它们的相对分子质量分别为3726.35Da和3918.46Da。JZTX-Ⅱ对电刺激诱导的小鼠膈神经-膈肌收缩产生抑制作用，浓度为1.0×10~(-6)mol/L时的阻断时间为15分钟左右，对钠通道和延迟调整型钾通道的激活和失活没有影响。通过同源性搜索，它与蜘蛛Hysterocrates gigas中的SNX-482毒素具有63％的同源性，而SNX-482能阻断人的E系钙通道，该毒素对其他K~+、Na~+、Cl~-、Ba~(2+)及其它类型的Ca~(2+)离子通道都没有作用。根据JZTX-Ⅱ与毒素SNX-482高度的同源性，可推测JZTX-Ⅱ很可能也是一种E型钙通道阻断剂。JZTX-Ⅲ对电刺激诱导的小鼠膈神经-膈肌的收缩没有作用，小鼠脑室注射5分钟致死，能阻断表达在非洲爪蟾(Xenopus Laevis)卵母细胞上的hH1(Nav1.5)有阻断作用，半有效浓度为144.5nmol／L。虎纹捕鸟蛛(Ornithoctonus huwena)是生活在我国南部云南、广西的山区，本实验室在其粗毒中发现了许多神经肽类毒素，但对其中的非肽类组分研究甚少。采用两次反相高效液相色谱从虎纹捕鸟蛛中分离出一种相对分子质量为147Da的成分，命名为HWTXs-Ⅰ。经质谱、红外光谱、核磁共振等方法鉴定为一类酰胺类物质，该毒素可以阻断蟾蜍离体灌流心脏的跳动，其功能与乙酰胆碱相似但结构相差很大。将该小分子成分与标准的谷氨酰胺、乙酰胆碱红外光 .1.义摘’丝潜、核磁共振进行对照，叁者差别很人。据此我们推断该毒素分子可能为一种拟胆碱类的新成分。根据核磁共振谱推测其基本结构单元有两个亚甲基和一个次甲基。(本文来源于《湖南师范大学》期刊2003-04-01）

海南敬钊缨毛蛛论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

摘要1：用芴甲氧羰基(Fmoc)固相多肽合成的方法在Pioneer固相多肽合成仪上合成了用丙氨酸代替虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ的第27位的赖氨酸的突变体K27A-HWTX-Ⅳ，通过反相HPLC对不同条件下突变体的氧化复性结果进行监测，摸索出其最佳氧化复性条件为：0.1 mol／L Tris-HCl，pH 8.0，GSH 1 mmol／L，GSSG 0.1 mmol／L的复性缓冲液，样品浓度为0.1 mg／mL。复性产物经HPLC纯化并用基质辅助激光解吸飞行时间质谱法进行鉴定，相对分子质量为4050.63 Da。小鼠离体膈神经-膈肌标本测活实验表明：复性后的突变体生物学活性比天然HWTX-Ⅳ降低86％，表明第27位的赖氨酸为虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ活性相关的残基。摘要2：从我国海南敬钊缨毛蛛(Chilobrachys jingzhao)粗毒中，结合阳离子交换和反相高效液相色谱分离得到两种多肽神经毒素，分别命名为海南敬钊缨毛蛛毒素-Ⅴ(jingzhaotoxin-Ⅴ，JZTX-Ⅴ)和海南敬钊缨毛蛛毒素-Ⅳ(jingzhaotoxin-Ⅳ，JZTX-Ⅳ)。经MALDI-TOF质谱分析，相对分子质量分别为3951.69 Da和3601.47 Da。利用Edman降解气相蛋白质测序仪测得海南敬钊缨毛蛛毒素-Ⅴ的一级结构NH_2-ECTKLLGGCTKDSECCPHLGCRKKWPYHCGWDGTF-CONH_2，六个Cys形成叁对二硫键。10 μg／mL的该毒素完全阻断小鼠膈神经-膈肌神经肌肉接头传递的时间为30±0.6min。小白鼠脑室注射能产生神经性兴奋，高剂量可使小鼠致死。同源性搜索表明该毒素与蜘蛛Grammostola spatulata中ω-Grammotoxin SIA和HaTx毒素和蜘蛛Scodra griseipes中的SGTx1毒素有很高的同源性。利用Edman降解气相蛋白质测序仪测得海南敬钊缨毛蛛毒素-Ⅳ一级结构为NH_2-GCGGLMAGCDGKSTFCCSGYNCSPTWKWCVYARP-CONH_2，六个Cys形成叁对二硫键。同源性搜索表明该毒素与蜘蛛Chinese bird spider Ornithoctonus huwena中的SHL-Ⅰ、Chinese bird spider Ornithoctonus hainana中的HNTX—Ⅲ和Mexican red knee tarantula(Brachypelma smithii)中的TXP 5有较高的同源性。生物

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。