导读:本文包含了斜纹夜蛾细胞系论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:夜蛾,斜纹,细胞,凋亡,细胞系,病毒,色素。
斜纹夜蛾细胞系论文文献综述
田航宇[1]（2017）在《亲环素A在双斑侧沟茧蜂病毒抑制斜纹夜蛾细胞免疫中的作用研究》一文中研究指出亲环素A(CyclophilinA,CypA)是亲环素家族中最为重要的成员之一,广泛存在于真核及原核生物体内,因其具有肽基辅氨酰顺反异构酶活性及作为免疫抑制剂环保霉素A(CyclosporineA,CsA)的主要胞内受体,在蛋白质折迭、转运、介导细胞凋亡、参与病毒感染等方面具有重要作用。目前关于CypA在昆虫的先天免疫反应中的研究甚少,本文以斜纹夜蛾(Spodopteralitura)/双斑侧沟茧蜂(Microplitis bicoloratus)模式为研究对象,研究CypA是否及如何参与了茧蜂病毒主导的抑制寄主细胞免疫反应过程。通过提取寄生后的斜纹夜蛾血细胞进行凋亡检测,我们发现寄生后斜纹夜蛾血细胞发生凋亡,同时,CypA的表达显着升高。于是我们认为,CypA可能参与了此凋亡过程,进而影响斜纹夜蛾的免疫反应。为验证上述假设,我们通过离体培养粉纹夜蛾细胞(Hi5),研究CypA是否参与茧蜂病毒(MbBV)诱导的昆虫细胞死亡及其可能的作用机制。通过MbBV感染Hi5细胞24 h后提取总蛋白,western blot发现CypA表达升高,并且细胞发生凋亡。此外,沉默Hi5细胞中CypA后,再用MbBV感染细胞,细胞凋亡的数量明显减少,这表明了 CypA确实在MbBV引起的昆虫细胞凋亡中具有重要作用。为研究CypA具体的作用机制,我们通过western blot、免疫荧光、DNA Ladder等技术,研究MbBV感染Hi5后细胞中生化分子的变化。结果显示,经病毒感染后的细胞,凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)的表达量明显增加,CypA及AIF均进入到细胞核,DNA发生了片段化,最后引起细胞凋亡。当用CypA的抑制剂CsA抑制CypA的活性时,发现细胞核内CypA和AIF的分布均减少,同时凋亡细胞的数量也减少,表明CypA可能是通过协助AIF进入细胞核而发挥促凋亡的作用。总之,通过本论文的研究,我们发现在茧蜂病毒抑制昆虫细胞免疫反应的过程中,可能是通过上调CypA基因的表达,再由CypA蛋白协助从线粒体中释放的AIF进入细胞核中,最后通过AIF的作用裂解基因组发生DNA片段化,从而达到促进细胞凋亡,抑制昆明细胞免疫反应的作用。(本文来源于《云南大学》期刊2017-05-01）
王平,孟志远,陈思,陈小军[2]（2014）在《光敏剂对斜纹夜蛾细胞的光活化杀虫活性、单线态氧及稳定性(英文)》一文中研究指出[目的]提高光敏剂的光稳定性,延长光敏剂在环境中的半衰期。[方法]该研究以典型光敏剂α-叁联噻吩为模板,利用生物等排原理,以苯环代替噻吩环,合成了光敏剂2,5-二苯基噻吩和2,5-二乙炔苯基噻吩,并研究了所合成的光敏剂的对斜纹夜蛾细胞的光活化毒力、单线态氧及光稳定性。[结果]光敏剂2,5-二苯基噻吩对斜纹夜蛾细胞的24和48 h的抑制中浓度IC50值分别为0.22和0.16μg/ml,2,5-二乙炔苯基噻吩斜纹夜蛾细胞的24和48 h的抑制中浓度IC50值分别为0.06和0.04μg/ml;在紫外光照下,光敏剂2,5-二苯基噻吩和2,5-二乙炔苯基噻吩产生的1O2能力分别为1.047 5和1.529 4μg/mmol;2,5-二苯基噻吩和2,5-二乙炔苯基噻吩在甲醇中降解动力学方程分别为Ct=5.227 1e-0.006 1t和Ct=5.084 2e-0.0973t,其半衰期分别为111.79和7.12 h。[结论]所合成的光敏剂2,5-二苯基噻吩具有良好的光活化激发产生单线态氧的能力,对斜纹夜蛾SL细胞具有良好的光活化毒杀作用,克服了光活化杀虫剂见光易分解等不足,因此2,5-二苯基噻吩具有开发成光活化杀虫剂的潜力。(本文来源于《Agricultural Science & Technology》期刊2014年05期）
赵婧妍[3]（2014）在《斜纹夜蛾细胞Spli Apaf-1蛋白在细胞凋亡过程中作用机制的初步研究》一文中研究指出细胞凋亡通路的研究受到科学工作者的广泛关注,并且取得了众多成果。目前研究的较为透彻的是在线虫、果蝇和人类中的细胞凋亡通路,由于细胞凋亡事件在进化过程中的保守性,它们存在着许多相似的地方,但也有许多进化上的分歧引发的不同。最具保守性的是内源性线粒体凋亡通路,以哺乳动物为例,当细胞发生凋亡时,细胞色素C从线粒体的内外膜间质释放到细胞质中,跟位于细胞质中的Apaf-1结合引起其聚合形成凋亡体复合物,继而募集起始Caspase9酶原并活化形成一个大型的蛋白水解机器,切割活化效应Caspase引起凋亡的级联反应。然而在对鳞翅目昆虫凋亡通路的研究中却发现了与进化上相近的果蝇凋亡通路中相左事件,即内源性通路起始因子细胞色素C在该通路中是否参与的问题。凋亡体复合物是内源性线粒体通路的中心,而其组装亚单位Apaf-1更是该通路的核心蛋白,对鳞翅目昆虫Apaf-1的研究将为进一步揭示昆虫细胞凋亡通路的分子机制提供条件。本研究首先制备了斜纹夜蛾细胞Apaf-1蛋白的多克隆抗体,并运用该抗体对Apaf-1蛋白的功能进行初步研究。根据本实验室获得的斜纹夜蛾Apaf-1SNP序列,选取其中一段编码147个氨基酸的保守序列作为目的片段,构建原核表达载体pET22b-Apaf1N147,表达并纯化融合蛋白His-Apaf1N147,免疫兔子制备多克隆抗血清,然后以亲和层析的方法纯化所获得的抗血清并通过Western blot检测。结果表明,制备并纯化后的抗体可以特异性结合原核表达的Apaf-1抗原蛋白和斜纹夜蛾内源的Apaf-1蛋白。斜纹夜蛾Apaf-1兔多克隆抗体的制备,为进一步研究鳞翅目昆虫Apaf-1蛋白的结构和功能提供了有力的条件；同时,我们也提出了一个快速高效纯化多克隆抗体的方案。通过免疫荧光,我们利用所制备的Apaf-1兔多克隆抗体以及带有FITC标签的荧光二抗,以BSA作为对照间接地鉴定了这个蛋白在斜纹夜蛾细胞中的定位,结果显示它定位在胞质中。为了更进一步研究Apaf-1蛋白在鳞翅目昆虫凋亡通路中的作用,需要将该蛋白的ORF正确地扩增出来并外源表达。我们通过改变扩增体系中Mg2+浓度和退火温度以高保真KOD酶最终经过双轮PCR获得了Apaf-1的ORF全长,将其连接到原核表达载体上进行原核表达尝试,结果未获得完整正确表达的Apaf-1蛋白。之后我们构建真核表达载体pIE1-Apaf-1-EGFP并将构建好的真核表达载体转染进处于对数生长期的斜纹夜蛾细胞中,并在荧光显微镜下观察,结果发现外源的融合蛋白Apaf-1-GFP在斜纹夜蛾细胞中得以表达并且表达了的融合蛋白定位在细胞质当中,这与免疫荧光实验的结果相一致。用免疫共沉淀技术通过抗原抗体之间相互作用以及Protein G与抗体IgG之间特异的相互作用将斜纹夜蛾胞质蛋白中能够与Cyto C相互作用的Apaf-1蛋白沉淀下来并通过western blot检测；用pull-down技术通过挂在Ni-NTA树脂上的原核表达的融合蛋白His-Cyto C将斜纹夜蛾胞质蛋白中能与细胞色素C相互作用的Apaf-1蛋白留滞在Ni-NTA树脂上,然后通过western blot检测,结果发现在斜纹夜蛾细胞凋亡的线粒体内源性通路中存在Apaf-1蛋白和Cyto C之间的相互作用。之后我们构建了真核表达载体pIEl-EGFP-Cyto C和pIE2-Apaf-1-Cherry,然后将它们同时转染进处于对数生长期的斜纹夜蛾细胞并在激光共聚焦显微镜下观察,结果显示转染后细胞发生凋亡并且红色代表的Apaf-1蛋白和绿色代表的Cyto C蛋白存在基本的共定位现象。这些实验结果进一步肯定了在鳞翅目昆虫斜纹夜蛾中存在类似哺乳动物的内源性线粒体通路。Apaf-1多克隆抗体的制备,ORF的克隆以及与细胞色素C之间相互作用的研究都为鳞翅目昆虫细胞凋亡通路分子机制的阐明奠定了基础。(本文来源于《华中师范大学》期刊2014-05-01）
温好菊,宋香宁,张志祥,程东美,张清鹏[4]（2012）在《植物精油对鱼藤酮和辣椒碱在斜纹夜蛾离体培养细胞系SL-1中活性的影响》一文中研究指出应用流式细胞术研究了24种常用植物精油对斜纹夜蛾Spodoptera litura离体培养细胞系(SL-1)细胞膜通透性的影响,采用MTT法研究精油对2种植物源农药鱼藤酮和辣椒碱的细胞活性的影响.试验结果表明:与对照相比,50μg·mL-1芸香油处理SL-1细胞24 h后,细胞内荧光染料碘化丙啶(PI)的荧光强度增加了53.04%,其次是松节油和当归油,细胞内PI荧光强度分别增加了34.23%和33.67%;100μg·mL-1广藿香油、松节油、芸香油、当归油、香茅油、生姜油处理SL-1细胞后,细胞内PI荧光强度增加率超过40%.鱼藤酮和辣椒碱对SL-1细胞的抑制中浓度(IC50)分别为34.97和35.92μg·mL-1,而与100μg·mL-1芸香油联用时IC50分别为12.69和13.26μg·mL-1,与100μg·mL-1松节油联用的IC50分别为14.56和11.392μg·mL-1,均小于鱼藤酮和辣椒碱单剂用量,芸香油、松节油能够显着提高鱼藤酮和辣椒碱对SL-1细胞的细胞活性.(本文来源于《华南农业大学学报》期刊2012年04期）
余倩[5]（2011）在《斜纹夜蛾核多角体病毒诱导甜菜夜蛾细胞凋亡的研究》一文中研究指出斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura multiple nucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)不能成功感染亲缘关系相近的甜菜夜蛾Spodoptera exigua,为了探究其中原因,取SpltMNPV感染甜菜夜蛾离体细胞Se301,利用光学显微镜,电子显微镜以及DAPI(4',6-Diamidine-2'-phenylindole dihydrochloride)荧光染色等方法对其进行检测。结果显示Se301细胞被SpltMNPV感染后出现早期凋亡特征,但未进行至细胞凋亡晚期形成凋亡小体;病毒感染受到阻碍,始终没有病毒多角体和有感染性的芽生型子代病毒产生;综合以上结果说明早期细胞凋亡仍然是限制病毒完成复制周期的重要因素。(本文来源于《中山大学学报(自然科学版)》期刊2011年04期）
余倩[6]（2011）在《斜纹夜蛾核多角体病毒感染甜菜夜蛾细胞的研究》一文中研究指出研究发现斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus,SpltNPV)不能成功感染同属甜菜夜蛾(S.exigua,Se)昆虫,为深入研究SpltNPV在离体Se301细胞中的感染进程以及病毒感染失败的原因,对感染后Se301细胞进行DNA复制、病毒基因转录以及病毒蛋白表达等检测。结果显示被感染的Se301细胞中病毒完成了DNA的复制和病毒早、晚期基因转录,但检测不到极晚期基因多角体基因(polyhedrin)的表达,病毒的蛋白表达受阻从而影响了病毒完成复制周期。研究发现病毒蛋白表达受阻是SpltNPV在Se301细胞中无法形成子代病毒,完成整个病毒复制的主要原因,这为深入研究其感染失败机理奠定了坚实基础。(本文来源于《中山大学学报(自然科学版)》期刊2011年03期）
童松,徐汉虹,张志祥[7]（2010）在《辣椒碱对斜纹夜蛾细胞增殖及凋亡的影响》一文中研究指出采用3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑(MTT)检测法、荧光显微镜细胞形态观察法和流式细胞仪(flow cytometry,FCM)技术,研究了辣椒碱对离体培养斜纹夜蛾Spodopt-era litura(SL)细胞增殖及凋亡的影响。结果表明:辣椒碱对SL细胞24 h的IC50值为46.89μg/mL,与鱼藤酮差异不显着。40μg/mL辣椒碱处理SL细胞24h后,细胞形态明显不规则,呈现出凋亡的典型症状。10、20和40μg/mL辣椒碱处理SL细胞48h后,细胞早期凋亡率分别为13.56%、18.61%和3.81%,而晚期凋亡和坏死率分别为23.78%、34.28%和61.72%。辣椒碱处理细胞48h后,细胞周期变化明显,细胞生长阻滞于G2/M期。表明辣椒碱对斜纹夜蛾细胞具有良好的抑制作用,能致细胞凋亡并有一定的浓度依赖性。(本文来源于《植物保护学报》期刊2010年05期）
付涛[8]（2010）在《氨基酸饥饿诱导的斜纹夜蛾细胞程序性死亡的研究》一文中研究指出在微生物与宿主细胞的相互作用过程中,细胞程序性死亡(Programmed Cell Death, PCD)是宿主一种重要的防御手段,了解宿主细胞的程序性死亡类型及其分子机制在应用微生物防治害虫等研究中具有重要的意义。程序性细胞死亡的类型除了经典的细胞凋亡(Apoptosis)外,近年细胞自噬程序性死亡(Autophagic cell death)的研究也颇受关注。此外,还有人提出了类凋亡(Paraptosis)、有丝分裂灾变(Mitotic catastrophe)等新的细胞程序性死亡类型。在先前的实验中,我们发现采用放线菌来源的雷帕霉素模拟氨基酸饥饿处理两种鳞翅目昆虫细胞,细胞死亡的实验结果差别很大。处理的家蚕离体细胞(Bmn-e细胞)在12h后就能观察到明显的细胞自噬和细胞凋亡现象；而饥饿处理斜纹夜蛾离体细胞SL则需要48h以上才能观察到明显的变化,而这种变化也与Bmn-e细胞显着不同。这表明SL细胞可能对氨基酸饥饿处理有较强的耐受性,细胞程序性死亡的类型与Bme细胞的相比,可能存在一些差异。为了深入探讨氨基酸饥饿对SL细胞的影响,也为了避免雷帕霉素除抑制Tor激酶外对SL细胞可能的毒性影响,本实验进一步采用直接剥夺氨基酸法处理SL细胞,应用活体染色、细胞化学、酶学分析、流式细胞术和DNA凝胶电泳等多种技术定性和初步定量研究了处理细胞的PCD类型,并试图探寻SL细胞耐氨基酸饥饿可能的初步机制,为微生物防治害虫理论的发展提供参考。实验结果表明：饥饿早期,细胞内的溶酶体数量增多,体积增大,线粒体数量减少,表明细胞的自噬水平开始显着上升。电镜观察也表明：饥饿后,部分SL细胞内出现了大量的簇状核糖体颗粒和较多的自噬溶酶体。72-96h,死亡细胞逐渐增多,96h后细胞的死亡率才达到45-55%。但是只有少数细胞出现染色质碎裂,凋亡小体数量较少,caspase-3的活性上升,但是远低于放线菌素D诱导组,这表明细胞凋亡只是饥饿细胞发生的多种类型的程序性死亡方式之一。但是流式细胞术分析表明,在饥饿的后期,细胞膜上磷脂酰丝氨酸外翻的细胞可达到38%,而caspase活性远低于放线菌素D诱导的凋亡细胞,表明饥饿后期部分细胞具有类凋亡的特征。因此,在饥饿条件下,斜纹夜蛾细胞发生了细胞自噬、细胞凋亡和类凋亡等多种类型的细胞程序性死亡。在哺乳动物细胞凋亡过程中,细胞色素c (cytochrome c, cyto c)具有重要的作用,在昆虫细胞凋亡过程中的作用则需要深入研究。本实验室先前的学生在早期的研究中发现,病毒或紫外线诱导SL细胞凋亡的过程中能够检测到cyto c的释放,应用环孢菌素A阻碍线粒体外膜上通透性转换孔的形成也可以抑制SL细胞的诱导性凋亡,马心线粒体细胞色素c能够诱导斜纹夜蛾无细胞体系的凋亡。本文进一步就cyto c对多种无细胞体系(哺乳动物细胞和昆虫细胞)凋亡的诱导进行了初步的比较研究,结果表明马心线粒体细胞色素c诱导哺乳动物细胞无细胞体系中caspase-3的活化的条件不同于昆虫细胞无细胞体系活化所需的条件。上述这些实验结果为昆虫细胞程序性死亡以及病原微生物与昆虫宿主细胞的相互作用的研究提供了一定的参考。(本文来源于《华中师范大学》期刊2010-05-01）
袁园[9]（2010）在《干扰Cyt-c表达对AfMNPV诱导斜纹夜蛾细胞凋亡的影响》一文中研究指出Cyt-c是一类水溶性蛋白,是由核基因编码合成,依附在线粒体内膜表面。Cyt-c作为一种载体,在呼吸链电子传递过程起重要作用。一旦Cyt-c功能出现障碍或是Cyt-c缺失,将会致使呼吸链功能出现异常,进而引起ATP缺乏,最终使细胞出现死亡。此外,Cyt-c由线粒体释放至细胞质也是线粒体介导凋亡信号转导的最重要事件,即通过caspase等途径诱导细胞凋亡。尽管在哺乳动物细胞凋亡研究中已经证实Cyt-c能由线粒体释放至细胞质进而影响细胞凋亡,但昆虫细胞凋亡中是否也存在同样的途径并不没完全阐明。在双翅目昆虫细胞凋亡研究中,关于Cyt-c的作用存在一些不同结果。到目前为止,普遍性认为Cyt-c不会从线粒体释放至细胞质,caspase的活化与细胞凋亡也不依靠细胞Cyt-c o然而,鳞翅目昆虫细胞凋亡的研究结果却与双翅目体系相反的结论。如：利用2-dexory-D-ribose诱导舞毒蛾IPLB-LdFB细胞的细胞凋亡,发现了Cyt-c的释放和caspase-3的活性；紫外线诱导Sf9细胞凋亡,Western杂交检测到Cyt-c由线粒体释放至细胞质,且能激活相关的凋亡蛋白。同时,杆状病毒P35基因的表达会抑制Cyt-c从线粒体释放出来。本实验室利用杆状病毒处理鳞翅目斜纹夜蛾SL-1细胞,Cyt-c会由线粒体释放至细胞质中,且能激活caspase-3的活化。但是这些研究主要建立在western杂交上需要利用其他方法验证。本实验室已利用RNAi技术研究Cyt-c在SL-1细胞凋亡体系的作用。研究发现,利用RNAi沉默SL-1细胞的Cyt-c表达后,再经杆状病毒处理细胞,Cyt-c的mRNA水平降低、caspase-3的活性有所降低等。在前期的研究基础之上,我们继续采用RNAi技术进一步研究Cyt-c在鳞翅目昆虫细胞凋亡中作用。利用体外转录的方法,合成相应的dsRNA;用双染(Annexin V-FITC和PI)对经RNAi处理的细胞进行细胞凋亡率的检测；经RNAi干扰,病毒诱导凋亡细胞后,分析caspas-9的活性等。从形态上,利用显微镜观察经DAPI染色的细胞,我们可以发现RNAi沉默Cyt-c的表达,细胞凋亡数量减少,凋亡小体和半月牙变少等。同时,不同时间段(24h、48h和72h)转染dsRNA,应用DNA电泳检测发现转染Cyt-c dsRNA的细胞DNA片段化程度相对较低。采用Annexin V-FITC和PI对处理细胞进行双染色。流式细胞仪检测到转染eGFP dsRNA48h、Cyt-c dsRNA48h然后接种病毒和只加病毒处理的细胞凋亡率分别约为67.49%、51.88%和63.2%。利用caspase-9的特异性底物与提取蛋白反应后,荧光分光光度计测值。正常细胞的caspase-9值很低。转染eGFP dsRNA48h、Cyt-c dsRNA48h然后接种病毒和只加病毒处理的caspase-9活性约分别为108.3、72和102.3。显然,沉默细胞色素的表达抑制caspase-9活性说明caspase-9活性是细胞色素C依赖性的,这是鳞翅目昆虫凋亡细胞中首次关于细胞色素C与caspase-9关系的报道。通过显微镜形态观察、DNA电泳、流式细胞仪检测和caspase-9活性的测定结果,我们可以初步断定Cyt-c在AfMNPV诱导的鳞翅目昆虫细胞SL-1细胞凋亡具有重要作用。因此,我们认为细胞色素C在哺乳动物和鳞翅目昆虫细胞凋亡中具有相似的功能。(本文来源于《华中师范大学》期刊2010-05-01）
郭素英[10]（2009）在《细胞色素C在无细胞体系中对斜纹夜蛾细胞凋亡的影响》一文中研究指出细胞凋亡是当今生命科学研究的热点,科学技术的进步与发展为细胞凋亡的研究提供了有力武器。比如无细胞体系,在细胞凋亡的应用中有不可取代的优越性。无细胞体系最初主要应用于细胞重大生命活动的机理研究.。例如在亚细胞水平和分子水平上研究细胞核的体外重建、细胞周期的调控等。1993年,lazebnik等科学家首次将其应用于细胞凋亡的研究。无细胞体系在哺乳动物细胞和植物细胞凋亡的应用中已经取得了很多成果,但在昆虫细胞凋亡的应用中还正在深入。本文应用无细胞体系对昆虫细胞凋亡的有关方面进行了探讨和研究。我们以前的研究结果已证明,杆状病毒中的芹菜夜蛾核型多角体病毒SfMNPV和苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒AcMNPV诱导的斜纹夜蛾(Spodoptera litura)Sl-1细胞凋亡过程中,细胞色素C(cytc)从线粒体释放至胞质是细胞凋亡的关键步骤。本实验以Sl-1细胞核为研究对象,用Sl-1细胞浆制备的无细胞体系作为反应体系。在无细胞体系中以纯化的外源cytc作为诱导剂,诱导Sl-l细胞核发生凋亡,研究了Sl-1胞核凋亡的特征,进一步探究了cytc在昆虫细胞凋亡中的作用。主要工作包括以下几个方面:(1)外源cytc对Sl-1细胞核的影响细胞凋亡形态学判断是凋亡检测的经典标准,最为常用及最为简便的方法是使用荧光显微镜观察细胞核的凋亡过程。本实验采用DAPI染料,直接对细胞核进行染色,用荧光显微镜观察细胞核的形态变化。由于凋亡相关的特异核酸酶对细胞核染色质DNA进行特异切割,经琼脂糖凝胶电泳可见典型的梯形图谱。这是细胞凋亡一个强有力的生化指标。本实验提取凋亡细胞核DNA进行凝胶电泳,检测其DNA变化。通过上述两种方法研究了细胞色素C诱导Sl-1细胞核发生凋亡的作用。结果表明,一定浓度的外源cytc将无细胞体系激活为凋亡体系,细胞核在凋亡体系中,置28℃培养箱,分别孵育2hr,4hr,6hr,8hr。DAPI染色结果显示细胞核固缩并逐渐变形,核内染色质凝集并趋边化,有空泡形成。随着孵育时间的延长细胞核直至破裂成大量的小块而被核膜包裹,类似于凋亡体。细胞核孵育12 hr之后,荧光显微镜下几乎看不到完整的细胞核,整个视野中充满高亮度的细小的荧光球。这说明cytc可诱导Sl-1细胞核发生凋亡。提取凋亡细胞核DNA经琼脂糖凝胶电泳呈现典型的凋亡细胞DNA梯形电泳谱带,且细胞核孵育时间越长,电泳梯形条带越明显。结果进一步证实了cyte可诱导Sl-1细胞核发生凋亡。(2) cytc对caspase-3活性的影响检测细胞凋亡的另外一个重要生化指标是检测胱天蛋白酶的活性。如caspase-3,caspase-8,caspase-9等在细胞凋亡过程中被激活,由无活性的酶原成为有活性的酶。活化的caspase对其底物具有特异性切割性,通过这一特性来检验相应的胱天蛋白酶的活性。本实验应用荧光定量技术检测cytc诱导Sl-1细胞核发生凋亡过程中caspase-3的活性变化。分别在孵育不同时间的凋亡体系中加入等量的caspase-3的特异性底物Asp-Glu-Val-Asp(DVED),根据底物被剪切的程度,用荧光定量法检测caspase-3的活性。实验结果表明,cytc诱导Sl-1细胞核发生凋亡过程中,caspase-3被激活,且其活性随着孵育时间的延长而增强。(本文来源于《华中师范大学》期刊2009-05-01）
斜纹夜蛾细胞系论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
[目的]提高光敏剂的光稳定性,延长光敏剂在环境中的半衰期。[方法]该研究以典型光敏剂α-叁联噻吩为模板,利用生物等排原理,以苯环代替噻吩环,合成了光敏剂2,5-二苯基噻吩和2,5-二乙炔苯基噻吩,并研究了所合成的光敏剂的对斜纹夜蛾细胞的光活化毒力、单线态氧及光稳定性。[结果]光敏剂2,5-二苯基噻吩对斜纹夜蛾细胞的24和48 h的抑制中浓度IC50值分别为0.22和0.16μg/ml,2,5-二乙炔苯基噻吩斜纹夜蛾细胞的24和48 h的抑制中浓度IC50值分别为0.06和0.04μg/ml;在紫外光照下,光敏剂2,5-二苯基噻吩和2,5-二乙炔苯基噻吩产生的1O2能力分别为1.047 5和1.529 4μg/mmol;2,5-二苯基噻吩和2,5-二乙炔苯基噻吩在甲醇中降解动力学方程分别为Ct=5.227 1e-0.006 1t和Ct=5.084 2e-0.0973t,其半衰期分别为111.79和7.12 h。[结论]所合成的光敏剂2,5-二苯基噻吩具有良好的光活化激发产生单线态氧的能力,对斜纹夜蛾SL细胞具有良好的光活化毒杀作用,克服了光活化杀虫剂见光易分解等不足,因此2,5-二苯基噻吩具有开发成光活化杀虫剂的潜力。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
斜纹夜蛾细胞系论文参考文献
[1].田航宇.亲环素A在双斑侧沟茧蜂病毒抑制斜纹夜蛾细胞免疫中的作用研究[D].云南大学.2017
[2].王平,孟志远,陈思,陈小军.光敏剂对斜纹夜蛾细胞的光活化杀虫活性、单线态氧及稳定性(英文)[J].AgriculturalScience&Technology.2014
[3].赵婧妍.斜纹夜蛾细胞SpliApaf-1蛋白在细胞凋亡过程中作用机制的初步研究[D].华中师范大学.2014
[4].温好菊,宋香宁,张志祥,程东美,张清鹏.植物精油对鱼藤酮和辣椒碱在斜纹夜蛾离体培养细胞系SL-1中活性的影响[J].华南农业大学学报.2012
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[8].付涛.氨基酸饥饿诱导的斜纹夜蛾细胞程序性死亡的研究[D].华中师范大学.2010
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[10].郭素英.细胞色素C在无细胞体系中对斜纹夜蛾细胞凋亡的影响[D].华中师范大学.2009
论文知识图
