屎肠球菌Ef2的安全性评估及其产生物胺氧化酶培养和诱导条件的优化

论文摘要

采用溶血实验、药敏实验、耐药基因和毒力基因PCR扩增对屎肠球菌Ef2进行安全性评估,实验结果表明,屎肠球菌Ef2溶血实验呈阴性,对庆大霉素、链霉素等不敏感,而对万古霉素等其他大部分抗生素抗菌药物敏感,无毒力基因检出,因此初步判定该菌株是安全的,可用作后续实验。通过单因素结合正交实验对该菌株产生物胺氧化酶的诱导培养基和培养条件进行优化,最后确定诱导培养基的最佳成分为:乳糖50 g/L、腐胺6 g/L、酵母膏8 g/L、MgSO43 g/L、MnSO40. 03 g/L、乙酸钠1. 5 g/L;最佳培养条件为:初始pH 7. 0、接种量0. 5%、培养时间36 h、培养温度32℃。生物胺氧化酶酶活力从诱导前的10. 9 U/mL提升至26. 12 U/mL,酶活力提高了139. 63%。研究结果表明,通过对培养和诱导条件的优化,可大幅度提升屎肠球菌Ef2产生物胺氧化酶的活力。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验材料
•   1.2 试剂与设备
•   1.3 实验方法
•     1.3.1 培养基的制作
•     1.3.2 屎肠球菌Ef2的安全性评估
•       1.3.2. 1 溶血实验
•       1.3.2. 2 药敏实验
•       1.3.2. 3 耐药基因的PCR检测
•       1.3.2. 4 毒力基因PCR检测
•     1.3.3 诱导产酶培养基优化
•       1.3.3. 1 不同氮源及其质量浓度对产酶的影响
•       1.3.3. 2 不同碳源及其质量浓度对产酶的影响
•       1.3.3. 3 酵母膏及其质量浓度对产酶的影响
•       1.3.3. 4 不同金属离子及其质量浓度对产酶的影响
•       1.3.3. 5 诱导产酶培养基成分优化的正交实验
•     1.3.4 诱导产酶培养条件优化
•       1.3.4. 1 不同初始pH值对产酶的影响
•       1.3.4. 2 不同培养温度对产酶的影响
•       1.3.4. 3 不同接种量对产酶的影响
•       1.3.4. 4 培养时间对产酶的影响
•       1.3.4. 5 诱导产酶培养条件优化的正交试验
•     1.3.5 AOs粗酶液的提取
•     1.3.6 酶活性的测定方法
•     1.3.7 数据处理与统计分析
• 2 结果与讨论
•   2.1 屎肠球菌Ef2安全性检测结果
•     2.1.1 溶血实验结果
•     2.1.2 药敏实验结果
•     2.1.3 耐药基因的PCR检测结果
•     2.1.4 毒力基因的PCR测定结果
•   2.2 屎肠球菌Ef2诱导产酶培养基优化结果
•     2.2.1 氮源及其质量浓度对酶活力的影响
•     2.2.2 碳源及其质量浓度对酶活力的影响
•     2.2.3 酵母膏及其质量浓度对酶活力的影响
•     2.2.4 不同金属离子及其质量浓度对酶活力的影响
•     2.2.5 不同金属离子对产酶影响的正交实验结果
•     2.2.6 诱导产酶培养基的正交实验结果
•   2.3 屎肠球菌Ef2诱导产酶培养条件优化结果
•     2.3.1 诱导产酶培养条件的单因素实验结果
•     2.3.2 诱导产酶培养条件的正交实验结果
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李彬彬,宋桂森,全鑫杰,蒲艳,徐晔,牛淑慧,敖晓琳,陈淑娟,何利,刘书亮,杨勇

关键词: 屎肠球菌,安全性评估,生物胺氧化酶,培养条件优化,诱导条件优化

来源: 食品与发酵工业 2019年09期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学,轻工业手工业

单位: 四川农业大学食品学院

基金: 四川省科技厅重点研发项目(2018NZ0002)

分类号: TS201.3

DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019666

页码: 41-48

总页数: 8

文件大小: 459K

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