NP蛋白NLS3区氨基酸位点突变对H1N1亚型流感病毒复制增殖的影响

论文摘要

流感病毒的核蛋白(nucleoprotein,NP)不仅保守性较高,而且含有较多的功能区,这与NP的功能密不可分。其中,存在于NP蛋白中的至少3个核定位信号(nuclear location signals,NLSs)控制着流感病毒复制过程中NP蛋白的入核过程。目前,对前两个核定位信号(NLS1和NLS2)的功能研究报道相对较多,而鲜有报道NLS3在病毒复制增殖中的作用。通过对大流行性和季节性H1N1亚型流感病毒NP蛋白NLS3区的氨基酸序列进行比较时发现,二者有6个氨基酸位点存在明显差异。为此,本研究采用重叠PCR技术将这些位点进行了逐一突变,然后利用激光共聚焦和双荧光素酶实验研究这些位点突变对NP蛋白入核效率和聚合酶活性的影响,通过荧光定量PCR和病毒生长动力学曲线比较了所拯救病毒在细胞中复制和增殖能力的差异,以便明确NP蛋白NSL3区的这些位点对病毒复制增殖能力的影响。本研究从蛋白和病毒水平,通过体外实验初步探讨了NP蛋白NLS3区氨基酸位点突变对H1N1亚型流感病毒的NP蛋白入核、聚合酶活性、病毒复制和增殖能力等生物学活性的影响。

论文目录

• 内容提要
• 中文摘要
• abstract
• 缩略词
• 引言
• 第一篇 文献综述
•   1 NP结构域
•     1.1 核定位信号
•     1.2 核聚集信号
•     1.3 核输出信号
•     1.4 胞质积累信号
•     1.5 RNA结合域
•     1.6 NP-NP结合域
•     1.7 PB1?PB2 结合域
•   2 NP性质与功能
•     2.1 NP性质
•     2.2 NP功能
•   3 RNP在流感病毒增殖过程中的作用
•   4 NP靶向抗流感药物研发
•     4.1 抑制NP蛋白入核的药物
•     4.2 抑制NP蛋白寡聚化的药物
•     4.3 诱导高级寡聚体形成的药物
•     4.4 干扰NP与 RNA结合的药物
•     4.5 干扰NP与 RdRp结合的药物
•     4.6 NP靶向抗流感药物研发面临的挑战和发展趋势
•   5 本研究的目的意义
• 第二篇 研究内容
•   第一章 NLS3 区位点突变对NP入核效率和聚合酶活性影响
•     1.1 材料
•     1.2 方法
•     1.3 结果
•     1.4 讨论
•     1.5 小结
•   第二章 NP基因位点突变对病毒复制与增殖能力的影响
•     2.1 材料
•     2.2 方法
•     2.3 结果
•     2.4 讨论
•     2.5 小结
• 结论
• 参考文献
• 作者简介及在学期间所取得的研究成果
• 导师简介
• 致谢

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 徐文章

导师: 丛彦龙

关键词: 流感病毒,亚型,核蛋白,定点突变,复制,增殖

来源: 吉林大学

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 吉林大学

分类号: S852.65

总页数: 78

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